丹酚酸B摄取机制研究

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1、中国药科大学本科毕业论文论文题目英文题冃theuptakemechanismofSalvianolicacidBinvitro专业食品质量与安全院部药学院学号0842910姓名马堕指导教师陈西敬教授课题完成场所论文工作时间：2012年3月至2012年5月丹酚酸B摄取机制研究目录摘要3刖吕5第一章人胚肾细胞（HEK293）的培养与转染71.1试验试剂与试验仪器以及试剂配制71.2细胞复苏、传代与计数81.3质粒的制备与转染9第二章高表达0ATP1B1的细胞模型验证122.1试验试齐1J与试验仪器122.2用荧光素验证细胞模型13第三章丹酚酸B的摄取实验193.1试验试剂与试验

2、仪器3.2浓度依赖性试验……3.3PH依赖性试验第四章试验讨论4.1试验讨论参考文献19致谢20附录X丹酚酸B摄取机制研究0842910马亭摘要药物转运体是存在于细胞膜上的一类功能性蛋白或多肽，通过将药物摄取或外排击细胞而影响许多药物在体内的动力学过程。在木实验屮我们通过从大肠杆菌屮提取质粒，并用紫外分光光度法测定其纯度后，转染入人胚肾细胞(HEK293)中，让质粒在细胞中成功表达，从而建立了高表达OATP1B1的细胞模型，并用荧光索验证了此模型的成功建立。丹酚酸B是丹参的主要药效成分之一，是水溶性的酚酸类化合物，在治疗心血管疾病方面发挥着重大的作用。本实验旨在研究此细胞模

3、型对丹酚酸B的摄取，了解丹酚酸B的摄取机制,进而指导在临床治疗心血管疾病采取联合用药吋是否会和其他药物发生相互作用，引发潜在的危险。关键词药物转运体；摄取；丹酚酸B；荧光素；心血管疾病；HEK293；质粒提取SalvianolicacidBuptakemechanismresearchAbstractDrugtransporterisakindoffunctionalproteinorpolypeptidepresentinthecellmembrane,anditcanaffectthepharmacokineticsprocessofmanydrugsbyuptakei

4、ngoreffluxingthedrug.InthisexperimentweextractplasmidfromEscherichiacoli,usetheUVspectrophotometricmethodforthedeterminationofthepurity,andtransfectitintohumanembryonickidneycells(HEK293),lettingtheplasmidexpressedsuccessfullyincell.SoweestablishthehighexpressionofOATP1B1cellmodel,andmakes

5、urethesuccessfulestablishmentofthecellmodelbyfluoresceinuptakenexpriment.SalvianolicacidBisoneofthemainactivecomponentsofSalviamiltiorrhiza.anditiswatersolublephenoliccompounds.Besidesitplaysagreatroleinthetreatmentofcardiovasculardisease.Thisexperimentisdesignedtostudythecellmodeltouptake

6、SalvianolicacidB,understandsalvianolicacidBuptakemechanism・SothatwecanguidetheclinicaltreatmentincardiovasculardiseasesifsalvianolicacidBcaninteractwithotherdrugswhentwoormoredrugsareusedtogether,causingpotentialdanger.KeywordsDrugtransporters;uptake;salvianolicacidB;fluorescein;cardiovasc

7、ulardisease;HEK293;extractionofplasmid1—刖百药物转运体是存在丁细胞膜上的一类功能性蛋白或多肽，通过将药物摄取或外排出细胞而影响许多药物在体内的动力学过程。国际人类基因组织将转运体分为两类，一类为原发性主动转运型(ATP2bindingcassette,ABC),另一类为续发性主动转运型或促进扩散型(Solutecarrier,SLC)。ABC类转运体主要是介导了细胞对药物的外排，SLC型转运体则主要介导了细胞对药物的摄取。其屮有机阴离子转运肽(OATPs)属于SLC型转运休，