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时间:2019-10-13
《parp1在dgal诱导大鼠拟老化模型中的表达研究》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在工程资料-天天文库。
1、独创性声明本人郑重声明,本学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果的总结。尽我所知,除文屮已经标明引用的内容外,本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的研究成果。对本文的研究做出贡献的个人和集体,均已在文中以明确方式标明。木人完全意识到木人将承担木声明引起的一切法律后果。学位论文作者签名:日期:年月日学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定,即:学校有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版,允许论文被查阅和借阅。本人授权华中科技大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行
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3、氨酸天冬氨酸蛋口酶cDNAconplementarydeoxyribonucleicacid互补脱氧核糖核酸galgalactose半乳糖hhour小时KDkilodalton千道尔顿KHZkilohertz千赫兹mtmitochondrial线粒体minminute分钟NADnicotinamideadeninedinucleotide尼克酰胺腺瞟吟二核苜酸NSnormalsaline生理盐水PARP1polyADP-ribosepolymerase-1聚腺昔二磷酸核糖聚合酶1PCRpolymerasechainreaction聚合酶链反应ipmrou
4、ndperminute每分钟转数ROSreactiveoxygenspecies活性氧簇Ssecond秒PARP1在D-gal诱导的大鼠拟老化模型中的表达研究中文摘要【冃的】观察D・gal诱导的大鼠拟老化模型中DNA修复蛋口PARP1的表达情况。【方法】180只2月龄SD大鼠,随机分为3组,各60只。B、C组为实验组,分别给予D-gal300mg/kg/d,D-gal500mg^g/d颈部皮下注射;A组为对照组,每天给予等量生理盐水注射。各组注射时间均为8周。造模后0个月,3个月,6个月时,听性脑干反应(ABR)检测各组用药前后听阈。通过Westernb
5、lot^免疫荧光等方法检测大鼠蜗核,听皮层和海马组织中PARP1表达的变化。【结果】①生理盐水或D-gal皮下注射8周后,大鼠内耳组织线粒体DNA4834bp缺失检出率分别为:A组(6.23+0.47)%,B组(14.92±0.61)%,C组D-gal组(17.15+0.93)%,B组和C组缺失率均高于A组(pV0.05)。②造模后,B组和C组动物听阈均较A组动物有所升高,但造模后0个月,3个月时,此升高变化无统计学意义。造模后6个月,在24KHZ,32KHZ频率处,C组动物听阈较A组动物升高,差异有统计学意义(p<0.05)o③Westernblot结
6、果显示:B、C两组中PARP1蛋白的89KD和113KD在蜗核,听皮层和海马处的表达较A组增加(p<0.05)o④激光共聚焦结果显示在蜗核,听皮层和海马的组织细胞的胞核和胞浆部位均出现PARP1阳性红色荧光。【结论】PARP1蛋白表达水平在拟老化大鼠的蜗核,听皮层和海马组织中内耳组织中存在不同程度的升高,提示PARP1可能通过参与DNA修复和细胞死亡,在老年性聋的发牛、发展过程中起着一定作用。【关键词】PARP1;半乳糖;老化;大鼠ExpressofPARP1onD-galactoseinducedagingratsAbstractObjectiveTo
7、investigatetheexpressionsoftheDNArepairproteinPARP1inD-galactoseinducedagingrats.MethodsOnehundredandeightySDratswererandomlydividedintothieegroupsandeachgrouphadsixtyrats.GroupB,CweretreatedwithhypodermicD-gal300mg/kg/d‘D-gal500mg/kg/drespectivelyforeightweeks.GroupAweretreatedw
8、ithsalineforthesamedoseandtime.ABRwasuse
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