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《表皮生长因子在醋酸诱导的结肠高敏感模型大鼠中的表达及其.doc》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在学术论文-天天文库。
1、表皮生长因子在醋酸诱导的结肠高敏感模型大鼠中的表达及其作用崔秀芳周尾梅程秀琴王颖林琳张红杰*(南京医科大学第一附属医院消化科,江苏南京210029)[摘要]目的初步探讨表皮生长因子(EGF)在醋酸诱导的结肠高敏感模型大鼠中的表达及其作用。方法新生雄性乳大鼠20只,于出生第10-21天,模型组(n=10)给予0.5%醋酸灌肠,建立慢性结肠高敏感模型,对照组(n=10)给予相同体积生理盐水。通过结直肠扩张(CRD)刺激,记录腹壁撤退反射(AWR)评分和腹外斜肌肌电活动(EMG),评估内脏敏感性。ELISA法检测两组大鼠血清及结肠组织中
2、EGF和5-HT水平,采用Westernblot方法检测模型组与对照组结肠组织中5-羟色胺转运体(SERT)表达,并分析两组大鼠结肠组织EGF水平与SERT蛋白表达间关系。体外细胞实验进一步探讨EGF对SERT表达的影响,大鼠肠上皮细胞(IEC-6细胞)给予不同浓度EGF(0、20、40、80ng/ml)刺激24h,检测SERT蛋白表达。结果结肠高敏感组大鼠AWR评分及EMG幅值较对照组显著增高(P<0.05),HE染色及MPO水平检测显示两组大鼠结肠组织均无明显炎症表现,提示持续内脏高敏感形成。与对照组相比,模型组大鼠血清EGF
3、水平明显降低(2.639±0.107vs4.066+0.573ng/ml,P<0.05),且结肠中EGF表达也明显减低(3.244±0.135vs3.582+0.197ng/100mg,P<0.05)。结肠组织中SERT蛋白表达量,模型组大鼠与对照组相比显著下降(0.711±0.219vs0.980±0.239,P<0.01)。模型组大鼠血清及结肠组织中5-HT水平显著高于对照组(6.125±0.534vs3.540±0.442,5.527±0.514vs2.650±0.495,P<0.05)。结肠组织中EGF水平与SERT蛋白表
4、达存在显著正相关(r=0.820,P<0.001)。体外细胞实验结果显示,予不同浓度EGF(20、40、80ng/ml)刺激细胞,SERT相对表达量(分别为1.398±0.091、1.725±0.124、1.571±0.088)与0ng/ml(1.011±0.012)比较,P<0.05。结论:醋酸诱导结肠高敏感大鼠结肠组织中5-HT水平增高,结肠组织SERT蛋白表达下降,同时其血清及结肠组织中EGF水平下降,且结肠组织中SERT表达与EGF水平呈正相关。体外细胞实验EGF可呈浓度依赖上调IEC-6细胞SERT蛋白表达,提示EGF可
5、能通过影响对SERT的表达参与内脏高敏感性形成。[关键词]内脏高敏感性;表皮生长因子;5-羟色胺转运体TheExpressionofEpidermalGrowthFactorandIt’sEffectonColonic-sensitizedRatsInducedbyAceticAcidCuiXiufang,ZhouWeimei,ChengXiuqin,WangYing,LinLin,ZhangHongjie*(DepartmentofGastroenterology,theFirstAffiliatedHospitalofNanj
6、ingMedicalUniversity,Nanjing210029,China)[Abstract]ObjectiveToinvestigatetheexpressionandeffectofepidermalgrowthfactor(EGF)onaratmodelofvisceralhypersensitivityinducedbyaceticacid.MethodsRatmodelsofvisceralhypersensitivitywereestablishedbyintra-colonicinfusionof0.5%ac
7、eticacid(AA)attheageof10days,thecontrolsreceivedthesamevolumesaline.Theexpressionofserotonintransporter(SERT)wasdeterminedbywesternblot.ThelevelsofEGFand5-HTinplasmaandintestinaltissuesweremeasuredbyenzyme-linkedimmunosorbentassay(ELISA).Furthermore,weanalyzedtherelat
8、ionshipbetweenEGFlevelsandSERTexpressionincolontissues.TofurtherconfirmtheinfluenceofEGFonSERT,ratintestinalepithelialcells(