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时间:2019-10-13
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1、FKBP38肝脏特异敲除小鼠模型的构建王帅赖姨梅林艳李晓曦赵子建南京医科大学代谢疾病研究中心赣南医学院第一附属医院摘要:目的:构建FKBP38(FK506BindingProtein38)基因肝脏特异敲除小鼠。方法:利用胚胎注射法构建在FKBP38上携带loxP位点的转基因小鼠。在FKBP38基因位置携带loxP位点的小鼠的基础上,以肝脏实质细胞特异性表达的Alb-Cre介导FKBP38条件性敲除,以获得FKBP38基因肝脏特异敲除小鼠模型Alb-Cre:FKBP38rl/rio同时对FKBP38特异性敲除鼠进行鉴定。结果:(1)FKBP38肝
2、脏特异敲除小鼠FKBP38-肝脏屮FKBP38基因的mRNA水平相对于同年龄同窝野生型小鼠具有统计学差异(P<0.001)o(2)FKBP38肝脏特异敲除小鼠FKBP38"肝脏中FKBP38基因的蛋白表达水平相对于同年龄同窝野生型小鼠具有统计学差异(P<0.001)o(3)FKBP38肝脏特异敲除小鼠FKBP38"肝脏中,转录和翻译相关蛋白水平未见显著差异,p70S6K的磷酸化水平轻微上调,4EBP-1的磷酸化水平有轻微下调。(4)FKBP38肝脏特异敲除小鼠FKBP38"肝脏屮,凋亡相关蛋白Bcl-2未见差异化表达。结论:FKBP38肝脏特异
3、敲除小鼠FKBP38"肝脏中,FKBP38基因的mRNA和蛋白基本不表达,提示成功构建FKBP38基因肝脏特异敲除小鼠。关键词:FKBP38;肿瘤;条件性敲除;Crc/loxP重组酶系统;作者简介:王帅(1990-),主要研究方向:代谢疾病;电话:15250961512;E-mail:lian_over@outlook.com作者简介:赵子建,博丄牛导师,教授,主要研究方向:代谢疾病、肿瘤,E-mail:azzhao@njmu.edu.cn收稿日期:2017-03-30基金:国家重点基础研究发展规划(973计划)(2013CB945202)Co
4、nstruetionofaMouseModelofHepatocyteCell-specificDisruptionoftheFKBP38GeneWANGShuaiLAIYi-meiLINYanLIXiao-xiZHAOZi-jianCenterofMetabolicDiseaseResearch,SchoolofBasicMedicalSciences,NanjingMedicalUniversity;DepartmentofPathology,theFirstAffiliatedHospitalofGanrmnMedicalUniversi
5、ty;Abstract:Objective:TobuildthemodelofthegeneFKBP38(FK506bindingprotein38)conditionalknockoutinliver.Methods:TransgenicmousewhoseFKBP38genewasflankedwithloxPwasconstructedbyembryomicroinjection.TheFKBP38genewasdeletedbybreedingmiceharboringtwoloxPsitesinFKBP38(FKBP3811")wit
6、hthemicebearingtheexpressionofCrcrecombinasemicedrivenbyanalbumpromoter.Afterward,thegenotypeofFKBP38conditionalknockoutmicewasanalyzed.Results:(1)RelativehepaticFKBP38mRNAlevelsshowedsignificantdifferencebetweenFKBP38conditionalknockoutmice(FKBP38')andwildtype(P<0.001).(2)R
7、elativehepaticFKBP38proteinexpressionlevelsofFKBP38conditionalknockoutmice(FKBP38')weresignificantlydifferentwithwildtype(P<0.001).(3)Relativephosphorylationofhepaticp70S6Kand4E-BPTproteinofFKBP38conditionalknockoutmice(FKBP38")showednosignificantdifference,withslightdecreas
8、einphosphorylationof4E-BP-1,comparedwithwildtype.(4)Nosignificantdifference
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