抗核抗体的荧光模式分析

《抗核抗体的荧光模式分析》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。

1、抗核抗体的荧光模式分析河南大学淮河医院张铁tl的：分析颗粒型荧光模式与几种系统性口身免疫性疾病Z间的关系。方法：回顾总结几年來所采集的临床标本的抗核抗体的上千幅的荧光模式图片，分析它们与盐水町提取细胞核抗原抗体（ENA）以及干燥综合征、混合性结缔组织病、红斑狼疮之间的对应关系。结论：特定的荧光模式与ENAZ间有着密切的关系，特定的颗粒型荧光模式往往与干燥综合征、混合性结缔组织病、红斑狼疮Z间有很好的对应关系。抗核抗体的荧光模式分析是系统性自身免疫性疾病诊断分型的重耍依据。口06年以来，我们开发了数码相机显微摄影系统和抗核抗体

2、的图文报告系统，实现了实验结果的电子化管理。所有抗核抗体（ANA）阳性的结果，其荧光模式图片都被很好地保存了下来。两年以来搜集了人量的图片以及相对应标木的ENA和双链DNA（dsDNA）测定结果。同时也追踪了人量的病例数据。经过冋顾总结分析发现有些荧光模式与特定的ENA抗体之间有着很好的相关性，而口颗粒型荧光模式与干燥综合征、混合性结缔组织病、红斑狼疮有很好的相关性。检测对象：回顾分析06-08年以來采集的下图所示的ANA阳性的图片及相对应标本的ENA和双链DNA（dsDNA）测定结杲，追踪分析颗粒型荧光模式标本其相应的临床

3、资料。仪器和试剂ANA的检测:采用间接荧光抗体法检测.试剂盒中徳国欧蒙实验免疫制品有限公司提供.按说明书操作仪器:OLYMPUSBX51荧光显微镜，自制荧光显微摄影系统。ENA的检测:采用欧蒙斑点法检测.试剂盒由徳国欧蒙实验免疫制品有限公司提供.按说明书操作。结果：1.ANA的荧光模式在特定的患者疾病发展过程中有明显的连续性、继承性，即荧光模式在患者疾病过程中多次检测荧光模式基本不变，或者有明显的相似。这在免疫印迹法检测ENA抗体的条带分析上有很好的左证：免疫印迹法ENA检测的条带上总会出现很多未知和已知的条带。相同的患者在

4、历次免疫印迹法ENA检测时，对比所出现的条带会发现这些条带的位置基本相同。条带的形状基木上反映了盐水提取的细胞核抗原成分抗体（ENA）的类型，条带相似表明在疾病过程中ENA基木保持不变。与之相对应，ANA的荧光模式反映的抗核抗体的类型也是基木不变的。ANA的荧光模式是患者在疾病过■程中的特征性的表达。与干燥综合征密切相关的是一种细颗粒型+核仁型的特征性的荧光模式，一般滴度不高于1：I000o如下图。两年来有23份标本呈现细颗粒型+核仁型荧光模式，其中22份同吋有SSA抗体和SSB抗体。对应患者16人为典型的干燥综合症。3.与

5、混合性结缔组织病密切相关的是一种粗颗粒型的特征性的荧光模式，一般滴度非常高，可高达1：1000000。如下图。两年来有标本18例，17例其对应的ENA抗体有有U1RNP抗体，13例诊断为MCTD.4.诊断为狼疮的患者其荧光强度往往荧光模式混杂，为核颗粒型、核均质型、核仁型、胞浆颗粒型等的综合，或者不易区分是哪一种荧光模式。变化多端、滴度一般较高，1：10000寻常多见。讨论：自身免疫性疾病是山于自身免疫反应过于亢进，产生了大量针对于自身成分的免疫细胞和口身抗体，以此为病理基础造成器官、组织、细胞损伤而产牛的疾病。口身抗体的产

6、牛是很多系统性口身免疫性疾病的病理基础，口身抗体的类型决定了疾病发牛发展的方向。抗核抗体检测是反映系统性自身免疫性疾病中产生的自身抗体的敏感的实验，抗核抗体的荧光模式与临床综合症Z间有着密切的联系。如上述的试验结果1显示,抗核抗体的荧光模式在疾病的过程中基木不变或者其变化有规律可寻，是患者特征性的i种表现。不同的疾病荧光模式迥异□稳定不变，因此以荧光模式来分类具有可行性。在大量的临床实验室的检测中经常会出现图1图2所示的鮫为单纯的颗粒型的荧光模式，结果2.、3表明这些特征性的细颗粒型荧光模式与SSA抗体和SSB抗体，粗颗粒型

7、荧光模式与U1RNP抗体有着非當好的相关性。几乎见到这些特征性的荧光模式就能判定有无这些ENA抗体的存在。SSB抗体和高滴度的U1RNP抗体是干燥综合症以及MCTD的很特异的抗体。临床追踪调查则发现细颗粒型的荧光模式与干燥综合症的关系虽然不及其与SSA、SSB抗体的相关性高，但也有70%的病例出现典型的干燥的症状。而氓纯的高滴度的粗颗粒型的荧光模式在检测时往往仅仅只检测到U1RNP抗体,而高滴度的U1RNP是诊断MCTD的必要条件。上述结果充分表明了典型的荧光模式与特定的ENA抗体Z间的密切联系，而这些荧光模式与特定的临床综

8、合症也显示了很高的相关性。人们在一直探寻临床综合症的特异性好的实验指标，，如抗SM抗体为SLE的特异性实验，抗SSB抗体为干燥综合症的特异性实验。过于注至单特异性的抗体，反而忽略了反映总体白身抗体存在状态的荧光模式的诊断价值。目前系统性口身免疫性疾病是以临床综合表现作为诊断分类的主耍依据的