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时间:2018-05-03
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1、系统性红斑狼疮的抗核抗体荧光核型与抗双链DNA抗体的关系作者:蔡逸婷谢松业丁莉莉【关键词】红斑狼【摘要】目的探讨系统性红斑狼疮(SLE)患者血清中的抗核抗体(ANA)各种荧光核型及其与抗双链DNA(dsDNA)抗体指标的关系。方法采用间接免疫荧光法检测56例SLE患者血清中ANA,ELISA方法检测抗dsDNA抗体。结果检测56例SLE患者,其中45例ANA为均质型,11例为颗粒型,前者占患者的80%。但两型统计学上差异无显著性。其中45例均质型患者抗dsDNA抗体浓度均>30IU/ml,与颗粒型患者抗dsDNA抗体浓度间统计学R
2、idit分析差异有显著性(P<0.05),且抗dsDNA抗体含量与均质型的荧光强度呈正比。结论检测ANA的核型表达,同时测定抗dsDNA抗体,可以动态地观察抗体滴度变化情况,为监测治疗提供有效的依据。关键词系统性红斑狼疮抗核抗体抗双链DNA抗体酶免疫荧光荧光核型酶免疫吸附【Abstract】ObjectiveToexploretheANAfluorescencepatternsinserumofpatientssufferedsystemiclupuserythermatosus(SLE)andinvestigatetherela
3、tionshipmunofluorescenceassay(ⅡFA),anti-dsDNAogeneouscases,ogeˉneouspatternarehigherthan30IU/ml,ogeˉneouspattern.ConclusionDetectingANApatterns,binedinationofanti-dsDNAconcentrationscanobservethealterationoftheantibodytiterdynamically,onitoringtheeffectivenessoftreatment
4、inSLEpatients.KeyeimmunofluorescencefluorescencepatternELISA系统性红斑狼疮(systemiclupuserythematosus,SLE)属于自身免疫性疾病,女性发病率较高,过去采用狼疮细胞涂片检查和自身抗体检测等方法,结果特异性和敏感性均不满意。近年来出现许多新的检测方法,本文采用欧蒙公司提供的酶联免疫荧光化学试剂检测SLE患者血清中抗核抗体(ANA),通过观察其阳性的核型定位和形态,同时用酶联免疫吸附测定(ELISA)方法定量检测dsDNA抗体,从中探讨荧光核型与抗dsDN
5、A抗体之间的关系。1资料与方法1.1标本来源本院住院或门诊确诊SLE患者共56例,其中女54例,男2例。年龄11~81岁,平均40岁。1.2操作方法1.2.1抗核抗体(ANA)的检测采用欧蒙公司提供的试剂盒(批号:T30607H),间接免疫荧光法:将患者血清以1:100、1:250、1:500、1:1000稀释后滴加于包被有HEp-2细胞的膜条上,血清中的特异性抗体与固相上细胞中的抗原结合,再滴加荧光素标记的抗人抗体,与已经结合的抗体反应,若血清中有特异性的抗体,呈现特异性的荧光,荧光显微镜下观察,荧光强度与抗体滴度相关。1.2.2抗d
6、sDNA抗体的检测采用BINDAZYME提供的试剂盒(批号:075122C),ELISA法:将患者血清稀释后滴加于包被有dsDNA抗原的微孔内,抗原与血清中的特异性抗体结合,再滴加纯化的过氧化物酶标记的兔抗IgG抗体,与已被俘获的自身抗体结合,显色的深浅与自身抗体的含量呈一定比例关系。1.2.3统计学方法采用按等级分组Ridit法(参照单位分析)。2结果2.1结果判断ANA反应性:阴性,1:100无荧光反应。阳性,滴度1:100或更高,可见到清晰的荧光核型。荧光核型可分为均质型、颗粒型、混合型。其中混合型又分为三种即均质型和颗粒型混合,
7、均质型和核膜型混合,均质型和抗着丝点型混合。抗dsDNA抗体:<30IU/ml,阴性;30~75IU/ml,临界值;>75IU/ml,阳性。2.2结果所有SLE病例ANA滴度均>1:100为阳性,其中抗体滴度≥1:1000的病例有48例,1:500的病例有6例,1:250的病例有2例。在Hep-2细胞上显示细胞核的荧光核型均质型14例,颗粒型11例,混合型31例。在混合型中,均质型/颗粒型的有27例,均质型/核膜型的有3例,均质型/抗着丝点型1例。具体结果见表1。从表中可以看出,所有的56例ANA阳性的结果中,有45例
8、ANA核型中存在均质型,占全部结果的80%。但以均质型作为标准组做比较,95%平均Ridit可信区间均有重叠,说明ANA滴度与各型ANA之间差异无显著性。在所有的56例标本中,有50例抗dsDNA抗体结果&
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