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1、蛋黄抗体制备与应用进展张国红①于飞②王刚③吴忠伟②杜国清③汪勇③林永祯④(①四川华西动物药品研究所，绵阳高新区，621000；②四川绵阳宝莱生物药业有限公司，绵阳高新区，621000；③四川华西动物药业有限公司，绵阳高新区，621000；④西南科技大学生命科技学院，绵阳西山，621000)摘要：本文综述了蛋黄抗体的来源、特性，IgG和IgY的区别，提取制备方法，精制IgY和粗制IgY的区别，以及蛋黄抗体在医学和兽医临床及其它领域的应用概况。旨在为更好的利用家禽作为生物反应器，研究、生产与推广蛋黄抗体提供思路。蛋黄抗体(Egg
2、yolkantibodies,eyAb)是指蛋黄中存在的抗体，也称蛋黄免疫球蛋白(Eggyolkimmunogbulins,eylg),LeslieandB.Clemlgy(1969)提出以IgY表示。近十几年来,国内外学者就卵黄抗体的研究和开发作了许多工作，证明了免疫鸡的蛋是提供特异性IgG抗体最方便、最廉价的来源。Jcnscncus等(1981)报道认为，一只母鸡在一个月中生产制备的卵黄抗体相当于500ml血清抗体。Bar-Joseph(1980)实验证明每ml卵黄含有3~25mgIgG,也就是说每个蛋可提供40-500
3、mgIgG。Losch(1986)证明了ylgG和卵黄抗体对酸和温度具有一定抵抗力。当卵黄抗体1：20稀释与0.Imol/lHCl作用2h,IgG浓度减少40%,抗体效价从log29降到Iog260当与Imol/IHC1作用30min时,IgG活性降到log21；作用60min,IgG活性才完全消失。试验还证明将卵黄置于沸水中煮lOmin,ylgG和卵黄抗体活性降为零,煮6min几乎对卵黄中心的ylgG和卵黄抗体没有影响。商鸟类IgY与哺乳动物IgG在科研实验的使用上没有明显的差别，而口禽鸟类IgY还有它的一些优点，如与哺乳
4、动物TgG没有交叉反应；不与风湿因子反应，可降低免疫化验中的假阳性率；也不激活哺乳动物的补体；有良好的热稳定性。在蛋黃抗体的萃提精制过程中，国际通川的蛋黃抗体低温乙醇法、盐析法或层析法等蛋白质分离工艺无法解决“既要保证抗体牛化结构的完整，牛物活性的良好存在，乂要彻底去除垂市传播病原”的难题，但有学者采用综合了物理、化学、生物等多种灭活技术，并结合酸化法、高速离心、超过滤等现代牛物技术的HOF灭活工艺，成功提取、纯化制备注射用梢制蛋黄抗体，且显示出（1）安全，不具备垂直传播病原的危险、不产牛应激反应、对注射部位没有刺激；（2）
5、不损伤免疫系统，无免疫抑制；（3）使用方便，易于保存（可常温保存和低温保存）；（4）注射后3-6h,抗体即被吸收入血，开始发挥效能等粗制抗体所不具有的优点。粘制鸡传染性法氏囊蛋黄抗体已经获得国家二类新兽药证15,精制鸭病毒性肝炎抗体、楮制小鹅瘟蛋黄抗体正在川报新兽药证书。IgY在医学免疫诊断与疾病治疗方血的应用十分广泛。rh于IgY不激活补体、不结合类风湿因子、不与蛋白A、蛋白G、哺乳动物Fc受体和补体结合，与IgG几无交叉反应，作为免疫学实验检测工具，用于测定循环复合物、类风湿因子和补体等，减少假阳性，可用于多种特异性病毒
6、学与细菌学等免疫学检测。有学者证实IgY预防轮状病毒引起的腹泻、翻齿与蛀牙，M6P/IGFTI-R抗体与一种肿瘤干扰基因有关，TgY—RA生物导弹与中药相结合，形成抗癌药物，对消化道恶性肿瘤总有效率达76%。傅颖媛等证实应用抗白色念珠菌特异性IgY,对提高人鼠免疫功能，特异性预防白色念珠菌感染具有明显的作川。IgY在兽医临床和水产方面也有广泛的应用，预防和治疗大肠杆菌引起仔猪黄痢、口痢、水肿病，有效率高达90%以上；对小牛致死性伤寒沙门氏菌感染、仔猪与犊牛轮状病毒性腹泻有明显成效；使用卵黄抗体添加剂的试验组比对照组分别提高2
7、3.7%、11.4%和10.0%,说明了卵黄抗体添加剂明显促迹断奶仔猪的增重和饲料转化；范玉芳等制备抗传染性法氏囊病卵黄抗体注射后12h鸡体内开始有抗体，并在体内维持5〜7d,第8d全部转阴，应用该抗体早期预防对缺乏母源抗体的雏鸡可提高被动免疫水平，早期应用0.5mL/只的剂量可起到预防、紧急预防作用，治疗幼鸡总有效率为91%以上；土永山等制备了抗1BD、ND的二联抗体，进行临床对照试验，结果是治疗组的保护率71%,死亡率为29%,对照组病死率70%,治疗组和对照组的差异十分显苦；张英等制备抗小鹅瘟卵黄抗体，推广预防和治疗、
8、紧急治疗，预防保护率90.8%,治愈率95.2%。此外，抗鸡新城疫病、抗鸭病毒性肝炎病、抗番鸭细小病毒病、抗鸡减蛋综合征病、抗鸡脑脊髄炎病、抗鸡病毒性关节炎抗体病、抗鸡传染性喉气管炎病、抗鸡人肠杆菌病、抗鸡沙门氏菌病等高免蛋黄抗体已有较多报道。在改善家禽牛产性能方iflj,有学者对商品肉鸡
