植物组织培养实验报告材料

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1、标准文档植物组织培养实验报告学院：生命科学技术学院班级：11生物技术(制品)学号：2011192017姓名：李鹏实用大全标准文档植物组织培养实验报告实验一植物组织培养母液的配制一、实验目的1.了解植物组织培养基本培养基的组分及其作用。2.学习掌握植物组织培养MS培养基的配制方法。二、实验原理培养基是植物组织培养中离体组织赖以生存和发育的条件。大多数培养基的成分是有无机盐、有机化合物（碳源、维生素、肌醇、氨基酸等）、生长调节物质、水分和其他附加物等五大类物质组成。无机盐类由大量元素和微量元素组成。大量元素中，氮类化合物主要以硝酸类和铵类化合物的形式存在，但在培养

2、基中多用硝酸类，也可以将硝酸类和铵类混合使用；磷和硫常用磷酸盐和硫酸盐来提供；钾是培养基中主要的阳离子；钙、钠、镁的需要量较少。微量元素包括碘、锰、铜、锌、钴、铁。培养基中的铁离子，大多数以螯合物的形式存在，即硫酸亚铁与乙二胺四乙酸二钠的混合。有机化合物包括碳源、维生素、肌醇、氨基酸等。培养中的植物组织和细胞的光合作用较弱，因此，需要在培养基中附加一些碳水化合物物来提供营养需要。培养基中的碳水化合物通常为蔗糖。蔗糖除了作为培养基的碳源和能源外，对维持培养基的渗透压也起着重要的作用。在培养基中加入维生素有助于细胞的分裂和增长。一般包括VB1、B6、烟酸、生物素、

3、叶酸、泛酸钙、VC。肌醇在糖类的相互转化、维生素和激素的利用等方面具有重要的催进作用。常用的植物生长调节物质包括以下三类：①生长素类：吲哚乙酸（IAA）、萘乙酸（NAA）、二氯苯氧乙酸（2,4-D）②细胞分裂素：玉米素（ZT）6-苄基嘌呤（6-BA）和激动素（KT）。③赤霉素：组织培养中使用的赤霉素只有一种，即赤霉酸（GA3）。培养基中的其他附加物包括人工合成和天然的有机物附加物。其中最为常见的为酵母提取物。琼脂作为培养基的支持物，也是最常用的邮寄附加物，他可以是培养基呈固体状态，以利于组织和细胞的培养。植物组织培养是否成功，在很大的程度上取决于培养基的选择之

4、上。目前普遍使用的是MS培养基。MS固体培养基可用于诱导愈伤组织，或用于胚胎、茎段、茎尖及花药的培养等。MS培养基的硝酸盐、钾和铵的含量略高于其他的培养基，也是它被普遍使用的原因之一。三、实验材料、试剂、配方和仪器设备1．试剂NH4NO3,KNO3,KH2PO4,CaCl2·2H2O,MgSO4·7H2O,FeSO4·7H2ONa2-EDTA,MnSO4·4H2O,ZnSO4·7H2O,H3BO3,KI,Na2MoO4·2H2OCuSO4·5H2O,CoCl2·6H2O,肌醇，甘氨酸，盐酸硫胺素，盐酸吡哆醇，烟酸，蒸馏水。2.仪器设备电子天平，烧杯（50ml、

5、100ml、500ml）量筒（1000ml、100ml、25ml），容量瓶(1000ml、500ml、100ml)，移液管（10ml，5ml，1ml）试剂瓶，玻璃棒数支，药匙，称量纸等。实用大全标准文档3、培养基配方各种母液的吸取量药品名称扩大倍数1L培养基吸取母液的量（mL）大量元素10100微量元素10010铁盐10010有机10010蔗糖30g琼脂0.8gPH5.8-6.3MS培养基大量元素母液配制化合物名称培养基浓度(mg/L)称取质量(g)NH4NO3165041.25KNO3190047.50KH2PO41704.25MS培养基微量元素母液配制化合

6、物名称培养基浓度(mg/L)称取质量(g)MnSO4·4H2O22.355.7ZnSO4·7H2O8.621.5H3BO36.211.5KI0.8320.75Na2MoO4·2H2O0.256.25CuSO4·5H2O0.00250.625CoCl2·6H2O0.00250.625MS培养基铁盐母液配制化合物名称培养基浓度(mg/L)称取质量(g)FeSO4·7H2O27.86.95Na2-EDTA37.39.32MS培养基有机物质母液的配制化合物名称培养基浓度(mg/L)称取质量(g)肌醇1002甘氨酸20.2烟酸硫胺素0.48盐酸吡哆醇0.510烟酸0.5

7、10MS培养基钙盐和镁盐母液的配制化合物名称培养基浓度(mg/L)称取质量(g)CaCl2·2H2O44011MgSO4·7H2O3709.25实用大全标准文档四、实验步骤1、计算：计算各化学成分所需要的量。大量、微量和盐类按扩大50倍，定容500ml的配制计算。有机和肌醇按扩大100倍，定容200ml的配制计算。计算后制成配方表。2、制定标签：裁取适当大小的牛皮纸，用铅笔写上MS，种类，并标明此类母液所含物质，质量，定容体积，扩大倍数吸取量，制备人，制备日期以大量为例如图：MS钙盐母液CaSO4·2H2O定容500ml吸取量20mL/L制备人：李鹏配制日期：

8、2013.10.63、大量元素母液的配