以豌豆为材料进行植物组织培养实验报告

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1、甘肃农业大学2013.10.以豌豆为材料进行植物组织培养从豌豆种子的接种到愈伤组织的再生赵学荣生命科学技术学院生物技术（植物方向）730070以豌豆为材料进行植物组织培养赵学荣甘肃农业大学生命科学技术学院2011级生物技术植物方向730070摘要：利用一些简单的实验操作技术、统计计算和作图方法。在灭菌、接种、组织培养等试验方法的基础之上来了解在组织培养过程中豌豆的生活状态，生长条件和存在环境。这将为自己以后的学习和研究提供更好的技术保障。关键字：豌豆；组织培养；【1】豌豆属于豆科植物，起源于亚洲西部、地中海地区和埃塞俄比亚、小亚细亚西部。因其适应性很

2、强，在全世界的地理分布很广。豌豆在我国已有两千多年的栽培历史，现在各省均有栽培。全国耕种面积广大，是农民增收的渠道之一。豌豆是一年生缠绕草本，高90～180cm，全体无毛。小叶长圆形至卵圆形，长3～5cm，宽1～2cm，全缘；托叶叶状，卵形，基部耳状包围叶柄。荚果长椭圆形，长5～10cm，内有坚纸质衬皮；种子圆形，2～10颗，青绿色，干后变为黄色。花果期4～5月。偶数羽状复叶，顶端卷须为叶卷须，托叶呈卵形。花白色或紫红色、单生或1～3朵排列成总状腋生，花柱内侧有须毛，闭花授粉，花瓣蝴蝶形。荚果长椭圆形或扁形，根据内部有无内层革质膜及其厚度分为软荚及硬

3、荚。豌豆种子可呈圆形、圆柱形、椭圆、扁圆、凹圆形，每荚2～10颗，多为青绿色，也有黄白、红、玫瑰、褐、黑等颜色的品种。可根据表皮分为皱皮及圆粒，干后变为黄色。根上生长着大量侧根，主根、侧根均有根瘤。因其性状多样且为闭花授粉，孟德尔将其作为遗传因子实验的作物。豌豆味甘、性平，归脾、胃经，具有益中气、止泻痢、调营卫、利小便、消痈肿、解乳石毒之功效。对脚气、痈肿、乳汁不通、脾胃不适、呃逆呕吐、心腹胀痛、口渴泄痢等病症，豌豆具有一定的食疗作用。豌豆作为一种食材，有多种制作方法：1.豌豆可作主食，豌豆磨成豌豆粉是制作糕点、豆馅、粉丝、凉粉、面条、风味小吃的原料

4、，豌豆的嫩荚和嫩豆粒可菜用也可制作罐头。2.豌豆粒多食会发生腹胀，故不宜长期大量食用。豌豆适合与富含氨基酸的食物一起烹调，可以明显提高豌豆的营养价值。3.许多优质粉丝是用豌豆等豆类淀粉制成的，在加工时往往会加入明矾，经常大量食用会使体内的铝增加，影响健康。4.炒熟的干豌豆尤其不易消化，过食可引起消化不良、腹胀等。5.应用于消渴：豌豆适量，淡煮常吃。豌豆喜冷冻湿润气候，耐寒，不耐热，幼苗能耐5℃低温，生长期适结荚期适温15～20℃，超过25℃受精率低、结荚少、产量低。在了解这些基本情况之后，我们应该大力开发、利用和改造豌豆。而要实现这个目标，我们就应该

5、对豌豆进行组织培养，来扩大培养面积，以便更深、更好的了解其生活习性，掌握其生长状况，为进一步开发利用豌豆提供理论依据和技术保障。注：【1】摘自百度文库：由中国植物图像库（中国科学院植物研究所）提供一、材料与方法1.1实验材料豌豆种子材料由老师提供，已经经过春化作用和水的侵泡，并且进行了消毒处理（具体方法：将豌豆种子用次氯酸钙、双氧水、硝酸银溶液依次进行浸泡灭菌。在灭菌后，用无菌水冲洗几分钟，然后在低温条件下进行保存处理。注意:一定不能用没有用无菌水冲洗的种子进行接种，其主要原因是防止残留的消毒药物对豌豆种子造成影响。）。然后在低温条件下进行无菌保存，

6、为接下来的实验做准备。1.2研究方法1.2.1MS培养基的母液的制备方法 1.MS培养基母液的配制和保存，MS培养基含有近30种营养成分，为了避免每次配置培养基都要对着几十种成分进行称量，可将培养基中的各种成分，按原来量的10倍或100倍分别称量，配成浓缩液，这种浓缩液叫做培养基母液。2.按配方表配置MS培养基母液：大量元素100倍，微量元素配100倍，铁盐，有机成分配成100倍，母液储存于4摄氏度的冰箱中。激素配成浓度为o.1mg/ml.3.配制的各种母液成分按顺序加入，上一成分溶解后再进行下一成分的溶解。钙盐和铁盐都单独配置。生长素配制时，先用微

7、量1摩尔的NaOH溶解，再以蒸馏水定容；赤霉素配制时，先用微量0.1molHCl溶解，再以蒸馏水定容。1.2.2MS母液配制取量表项目母液扩大倍数定容体积(ml)配一升的吸取量（ml）称取量mg大量5050020NH4NO3(41.25)KNO3(47.5)KH2PO4(4.25)MnSO4.4.H2O(0.558)微量5050020ZnSO47H2O(0.215)H3BO3(0.155)KI(0.0208)Na2MoO4H2O(0.0063)CuSO45H2O(6.25*10-4)CoCl2H2O(6.25*10-4)铁5050020FeSO4.7

8、H2O(0.695)Na-EDTA(0.933)镁5050020MgSO4.7H2O(9.25)钙50500