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《秋茄论文：秋茄 KcBURP基因 KcC2H2型锌指蛋白基因 转基因 抗盐性》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在教育资源-天天文库。
1、秋茄论文：秋茄KcBURP基因及KcC2H2型锌指蛋白基因的克隆及功能分析【中文摘要】秋茄(Kandeliacandel(L.)Druce)是红树的一种,属于非泌盐型红树,长期生活在海边,具有很强的耐盐性。前期研究显示,秋茄苗木KcBURP基因与KcC2H2型锌指蛋白基因在盐胁迫下表达明显上调,提示这两个基因可能对秋茄耐盐性有所贡献。本文以秋茄为材料,利用前期Microarry分析所获得的KcBURP及KcC2H2型锌指蛋白基因的cDNA序列设计引物,通过RT-PCR,获得这两个基因cDNA的开放读码框(ORF)。序列分析结果显示KcBU
2、RP基因的ORF长1131bp,编码一个等电点为9.07、分子量为39.8kD、由375个氨基酸组成的多肽蛋白。KcC2H2型锌指蛋白基因ORF长738bp,由245氨基酸组成,蛋白分子量约26.1kD,理论等电点为8.65。将秋茄KcBURP基因构建到植物表达载pCAMBIA-2300中,转化烟草。选取10个卡那霉素抗性株系进行基因组PCR鉴定,数据表明其中的8个株系为转基因株系。PT-PCR的结果显示在2个转基因株系中KcBURP得到过表达。150mMNaCl处理后,野生型明显萎蔫,过表达转基因植株长势良好。进一步对野生型和转基因烟草
3、...【英文摘要】Kandeliacandelisoneofsalt-tolerantmangrovespeciesandhabitatsinseasidearea.PreliminarystudieshaveshownthatKcBURPandKcC2H2zincfingergeneofKandeliacandelseedlingsweresignificantlyup-regulatedundersaltstress,suggestingthattheycontributedtosalttoleranceofKandeliacande
4、l.Inthepresentedstudy,thecDNAcodingfortheopenreadingframes(ORF)ofKcBURPandKcC2H2zincfingergenesofKandeliacandelwereobtainedbyaPCRapproachusingtheprimersdesignedfromthe...【关键词】秋茄KcBURP基因KcC2H2型锌指蛋白基因转基因抗盐性【英文关键词】KandeliacandelKcBURPgeneKcC2H2zincfingergeneTobaccoSalttolera
5、nce【索购全文】联系Q1：138113721Q2：139938848【目录】秋茄KcBURP基因及KcC2H2型锌指蛋白基因的克隆及功能分析摘要3-4ABSTRACT4目录5-8引言8-91文献综述9-161.1红树的抗盐分子机制研究进展9-101.1.1红树抗盐基因研究进展9-101.2BURP蛋白家族研究进展10-121.2.1BURP蛋白家族及其结构特征10-111.2.1.1BURP蛋白种类101.2.1.2BURP蛋白结构特征10-111.2.2BURP家族蛋白功能11-121.2.2.1BURP与植物生长发育111.2.2.
6、2BURP与植物生长及抗逆11-121.3植物C2H2型锌指蛋白研究进展12-151.3.1植物C2H2型锌指蛋白的结构及对靶DNA的识别12-131.3.1.1植物C2H2型锌指蛋白的结构12-131.3.1.2植物C2H2型锌指蛋白对靶DNA的识别131.3.2植物C2H2型锌指蛋白功能13-151.3.2.1C2H2型锌指蛋白与植物生长发育13-141.3.2.2C2H2型锌指蛋白与植物抗逆14-151.4本研究目的及意义151.5本研究的主要内容15-162秋茄KcBURP蛋白基因的克隆及功能分析16-352.1实验材料16-17
7、2.1.1植物材料162.1.2质粒162.1.3菌株162.1.4所用引物162.1.5主要仪器及软件162.1.6主要工具酶及生物试剂162.1.7主要溶液与培养基的配置16-172.2实验方法17-242.2.1KcBURP蛋白基因的克隆17-182.2.1.1引物设计与合成172.2.1.2改进的热硼砂法提取秋茄叶片总RNA172.2.1.3cDNA的合成17-182.2.1.4基因ORF区扩增182.2.2KcBURP基因的表达载体的构建18-212.2.2.1中间载体的构建19-202.2.2.2表达载体的构建20-212.2
8、.2.3重组质粒的鉴定及保存212.2.3农杆菌的转化21-222.2.3.1感受态细胞的制备212.2.3.2植物表达载体向农杆菌感受态细胞的转化212.2.3.3阳性克隆的鉴定21-222
