第八章革兰阴性需氧和兼性厌氧杆菌鉴定

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1、微生物学检验第八章革兰阴性需氧和兼性厌氧杆菌鉴定返回总目录本章内容第一节肠杆菌科1第二节非发酵革兰阴性杆菌2第三节弧菌科3第四节其他革兰阴性苛养菌4学习目标及重点学习目标：1．掌握：肠杆菌科的共性及常见细菌的微生物检验；非发酵菌革兰阴性杆菌的共同特性；铜绿假单胞菌生物学性状、微生物学检查及临床意义;霍乱弧菌主要生物学特性；临床常见革兰阴性苛养菌的微生物学检验方法2．熟悉：肠杆菌科细菌的临床意义；不动杆菌属和产碱杆菌属生物学性状、微生物学检查及临床意义；霍乱弧菌微生物常规检验程序和方法3．了解：莫拉菌属等

2、其他非发酵革兰阴性杆菌生物学性状、微生物学检查及临床意义；副溶血性弧菌的主要生物学特性，微生物学常规检验方法；临床常见革兰阴性苛养菌的生物学特性1.肠杆菌科常见菌属的鉴定、血清学诊断，与非发酵菌、弧菌科的鉴别2.铜绿假单胞菌、霍乱弧菌鉴定要点本章重点：第一节肠杆菌科概述是栖居在人和动物的肠道内的一大群形态、生物学性状相似的革兰阴性杆菌通过粪—口途径进行传播，引起肠道感染或肠外感染广泛分布在自然界中，包括植物、土壤、水以及人和动物的肠道中，多数是正常人肠道菌群的正常菌群，可引起医院感染。条件致病菌临床可查

3、到四十种以上肠杆菌科细菌包括：——埃希菌属——志贺菌属——沙门菌属——耶尔森菌属——变形杆菌属——克雷伯菌属——摩根菌属——枸橼酸菌属——肠杆菌属——沙雷菌属等致病菌肠道正常菌群条件致病菌医院感染第一节肠杆菌科肠杆菌科共同特点形态结构G-小杆菌，无芽孢，多数有鞭毛及菌毛培养特性需氧或兼性厌氧营养要求不高，普通培养基可生长，菌落相似，形成灰白色中等大小,S型菌落，常用肠道选择培养基培养氧化酶阴性，发酵葡萄糖，硝酸盐还原实验阳性第一节肠杆菌科肠杆菌科细菌鞭毛染色及电镜下形态第一节肠杆菌科EMB（伊红——美兰

4、培养基）选择作用（弱选）大肠埃希菌（非致病菌）乳糖发酵产酸伊红结合美兰形成紫蓝色金属光泽化合物有色的乳糖发酵菌落伤寒沙门菌等（致病菌）乳糖不发酵伊红美兰不能结合无色的乳糖不发酵菌落第一节肠杆菌科SS培养基（沙门志贺培养基）（含营养物、鉴别乳糖、中性红指示剂、胆盐、煌绿等抑制剂）伤寒沙门菌无色乳糖不发酵菌落选择抑制作用（强选）大肠埃希菌产酸桃红色乳糖发酵菌落胆盐、煌绿：抑制大肠埃希菌及G+菌，提高肠道致病菌检出率乳糖发酵中性红呈红色乳糖不发酵第一节肠杆菌科生化反应:活跃，常用于鉴别肠道杆菌。发酵葡萄糖产酸

5、或产酸产气，氧化酶（-），触媒（+），还原硝酸盐抵抗力：不强。耐受胆盐，抵抗多种染料的抑菌作用抗原结构:菌体（O）抗原鞭毛（H）抗原表面（K、Vi）抗原易出现各种变异：耐药性（重要）第一节肠杆菌科初步鉴定到科的特征葡萄糖发酵（+）硝酸盐还原（+）氧化酶（-）触酶（+）痢疾志贺菌除外结合血清学鉴定到属、种（型）硝酸盐还原试验阳性：红色阴性：淡黄色氧化酶试验阳性：紫红色阴性：无色第一节肠杆菌科一、埃希菌属（Escherichia）大肠埃希菌镜下形态（上—革兰染色、鞭毛染色，下—电镜观察）(一）生物学特性形态

6、染色：符合肠杆菌特点，周鞭毛菌，有菌毛培养特性：符合肠杆菌特点EMB——紫黑色有金属光泽S-S——桃红色生化反应：IMViC（++--）,见教材表格。抗原O抗原（O1---O173）H抗原（H1---H56）K抗原（K1---K100）血清型表示法：O：K：H20大肠埃希菌菌落特征（MAC）EMB平板上的E.coli(一）生物学特性大肠埃希菌KIA（AA＋－）MIU（＋＋－）(一）生物学特性大肠埃希菌IMViC试验（＋＋－－）右侧为对照（－－＋＋）(一）生物学特性埃希菌属鉴定特征靛基质（+）甲基红（+

7、）枸橼酸盐（-）尿素（-）发酵多种糖产酸产气氧化型发酵型产碱型肠杆菌科与其它革兰阴性杆菌区别（二）临床意义1.致病物质除内毒素、荚膜肠杆菌科共有的毒力因子外，大肠埃希菌具有独特的毒力因子有：黏附素——具有高度特异性吸附、定植、致病外毒素（由ETEC产生的肠毒素）不耐热肠毒素（heatlabiletoxin，LT），加热65℃、30分钟即被破坏；耐热肠毒素（heatstabletoxin，ST），100℃、20分钟仍不被破坏，LT和ST均可使肠道细胞中cAMP的水平升高，引起肠液大量分泌而导致腹泻2.所致

8、疾病：肠道外感染（内源性感染）1.化脓性感染——定位转移腹膜炎、阑尾炎、创伤感染、手术刀口感染、肺炎、败血症、新生儿脑膜炎等2.泌尿道感染——病原菌来自病人肠道（上行性）占泌尿道感染首位、女性多见（尿道炎、膀胱炎、肾盂肾炎等）（二）临床意义引起肠道感染的大肠埃希菌的主要致病特征菌株致病机制感染类型主要临床表现发病年龄危险因素ETECLT和ST腹泻，旅行者腹泻大量水样便，腹痛、恶心、脱水成人、儿童旅行EPEC黏附因子急性腹泻水样便、发热、呕吐