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1、万方数据学位论文马甲子的提取纯化工艺及其特性研究StudyontheextractionandpurificationtechnologyandCharacteristicsofPaliurusramosissimus谢莹指导教师姓名：徐超群研究员申请学位级别：硕士专业名称：药剂学论文提交时间：2017年4月论文答辩时间：2017年5月二〇一七年五月万方数据中文摘要马甲子（Paliurusramosissimus（Lour.）Poir）为鼠李科马甲子属植物，主含三萜类，总黄酮和香豆素类成分，用于
2、治疗疮痈溃疡，解毒消肿等。经课题组前期研究发现，白桦脂酸和马甲子素为马甲子中具有较好抗肿瘤活性的化学成分。以该两种成分为指标，首先对半仿生法提取马甲子的各工艺参数进行单因素考察，进一步采用L9（34）正交试验进行优化，最终确定提取工艺为：鲜叶粉碎，经5倍量95%乙醇，在pH为2条件下回流提取80min，药渣继续在pH为8条件下回流提取40min，合并两次提取液，放冷过滤，浓缩并冷冻干燥成浸膏，结果表明，该工艺稳定可行。经工艺对比，半仿生法优于冷浸法，优于超声法。通过比较不同大孔树脂对白桦脂酸和马
3、甲子素的静态吸附及动态吸附试验，选用AB-8型大孔树脂，并得出最佳纯化工艺参数为：马甲子素浓度16.07μg/mL，白桦脂酸浓度为1023μg/mL，以3mL/min的速度上样，上样量为0.4g醇提物/g干树脂，马甲子素和白桦脂酸的吸附率分别为87.1%和82.03%；用900mL85%乙醇以3mL/min的速度洗脱，马甲子素和白桦脂酸的洗脱率分别为88.23%和73.52%。相比于醇提物，该有效部位中马甲子素的含量提高了8倍，白桦脂酸的含量提高了5倍，同时，纯化过程除去了大量的色素类成分，使其
4、有效部位的性状也得到改善。现分别对马甲子醇提物、乙酸乙酯部位和有效部位进行体外抗肿瘤活性检测，并对马甲子进一步分离纯化，得到8个单体成分，MTT法检测抗肿瘤活性。结果显示，以白桦脂酸为母核的五环三萜类衍生物马甲子素、马甲子素A、马甲子素B和messagenicacidB均表出较好的抑制肿瘤增殖作用，且存在双取代强于单取代，单取代强于母核的特性。初步建立了马甲子有效部位的质量标准，拟定马甲子有效部位中马甲子素和白桦脂酸的含量分别不少于0.7%和40%，并对3批马甲子有效部位同时进行加速试验及长期稳
5、定性试验考察，结果表明，各项检查均符合规定。关键词：马甲子素；白桦脂酸；提取工艺；大孔吸附树脂纯化；抗肿瘤活性检测。I万方数据成都中医药大学硕士研究生学位论文ABSTRACTPaliurusramosissimus(Lour.)Poir,themainchemicalcompositionistriterpenes,totalflavonoidsandcoumarinsandsoon,thepharmacologicaleffectsofthetreatmentofsorecarbuncleul
6、cers,detoxificationswelling.Inthisstudy,thechemicalcompositionofbetulinicacidandpaliurusenewereexcellentantitumoractivity.Takingthetwocompoundsastheindexcomponents,Firststudythesinglefactorexperiment,andthentheL9(34)orthogonalexperimentwasusedtooptim
7、izetheextractionprocess.Finally,theoptimumextractionprocesswasasfollows:Afterthefreshleaves,5timestheamountof95%ethanol,atpH2underrefluxconditionsfor80min,theresiduewascontinuouslyrefluxedatpH8for40min,combinedtheextract,cooledandfiltered,anddriedtot
8、hedryness.Theresultsshowthattheprocesshasgoodstabilityandhighreproducibility.Bycomparingtheotherextractionmethods,thesemi-bionicmethodissuperiortothecold-maceration,whichissuperiortotheUltrasonicExtraction.Bycomparingthestaticadsorptionanddynamicadso
