11DNA重组技术的基本工具

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1、1.1《DNA重组技术的基本工具》导学案【学习冃标】1、简述DNA重组技术所需三种基木T具的作用。2、认同基I大IT程的诞生和发展离不开理论研究和技术创新。【学习重点】DNA重组技术所需的三种基木工具的作用。【学习难点】基因T程载体需要具备的条件。一.基因工程的概念：操作环境操作对象操作水平基本过程结果例1.以下有关基因工程的叙述，正确的是（）A、基因工程是细胞水平上的生物工程B、基因工程的产物对人类都是有益的C、基因工程产生的变异属于人工诱变I）、基因工程育种的优点之一是目的性强二.基因工程的三个基本工具：1•限制性核酸内切酶一-“分子手术刀”来源：1）功能：2）切割方式

2、：2.DNA连接酶——“分子缝合针”1）分类:和2）作用及作用部位：3.基因进入受体细胞的载体一一“分子运输车”1）分子运载车的分类：常用的是具他载体2）运载体使用的目的：3）作为运载体必须具备的条件【讨论与研究】注意：你知道DNA水解酶、DMA解旋酶、DNA连接酶、DNA聚合酶的区别吗？（1）DNA水解酶：能够将DNA水解成四种脱氧核廿酸，彻底水解成磷酸、脱氧核糖和含氮碱基（2）DNA解旋酶：能够将DNA或DNA的某一段解成两条长链，作用的部位是碱基和碱基之间的氢键。注意：使DNA解成两条长链的方法除用解旋酶以外，在适当的高温（如9JC）、重金属盐的作用下，也可使DMA解

3、旋。（3）DNA聚合酶：能将单个的核甘酸通过磷酸二酯键连接成DNA长链。（4）DNA连接酶：是通过磷酸二酯键连接双链DNA的缺口。注意比较DNA聚合酶和DNA连接酶的界同点。例2.在基因工程中用来完成基因的剪接的工具是（A.限制酶和连接酶B.限制酶和水解酶C.限制酶和运载体D连接酶和运载体例3.不属于质粒被选为基因运载体的理由是（）A.能复制B.有多个限制酶切点C.具有标记基因D.它是环状DNAcIGTIATIAAITAITGIcA.CTTAAG,切点在C和T之间C.GAATTC,切点在G和A之间B.CTTAAG,切点在G和A之间D.CTTAAC,切点在C和T之间例4.右图

4、表示限制酶切割某DNA的过程，从图屮可知，该限制酶能识别的碱基序列及切点是（当堂检测:1.基因工程是在DNA分了水平上进行设计施工的。在基因操作的基本步骤中，不进行碱基互补配对的步骤是A、人工合成H的基因B、H的基因与运载体结合C、将H的基因导入受体细胞D、H的基因的检测和表达2•现有一长度为1000碱基对（bp）的DNA分子，用限制性核酸内切酶EcoRl酶切后得到的DNA分子仍是1000bp,用Kpnl单独酶切得到400bp和600bp两种长度的DNA分子，用EcoRKKpnl同时酶切后得到200bp和600bp两种长度的DNA分子。该DNA分子的酶切图谱正确的是（）£<

5、oRIKpnlKpnlDEcoRlKpnlEcoMKpnlA・（60012001200

6、600[2001200]c.D.3.下列四条DNA分子，彼此间间具有粘性末端的一组是TAGG①GGTA②③④A.①②B.②③C.③④D.②④4.质粒是基因工程中最常用的运载体，它的主要特点是①能自主复制②不能自主复制③结构很小④蛋口质⑤环状RNA⑥环状DNA⑦能“友好”地“借居”A.①③⑤⑦B.①④⑥C.①③⑥⑦D.②③⑥⑦5・有关基因工程的叙述中，错误的是（）A.DNA连接酗将黏性未端的碱基对连接起来E.限制性内切酶用于H的基因的获得C.冃的基因须由载体导入受体细胞D.人工合成冃的基因

7、不用限制性内切酶6.基因T程屮，需使用特定限制酶切割冃的基因和质粒，便于重组和筛选。已知限制酶I的识别序列③④A.①②B.②③C.③④D.②④3.质粒是基因工程中最常用的运载体，它的主要特点是①能自主复制②不能自主复制③结构很小④蛋口质⑤环状RNA⑥环状DNA⑦能“友好”地“借居”A.①③⑤⑦B.①④⑥C.①③⑥⑦D.②③⑥⑦5・有关基因工程的叙述中，错误的是（）A.DNA连接酗将黏性未端的碱基对连接起来E.限制性内切酶用于H的基因的获得C.冃的基因须由载体导入受体细胞D.人工合成冃的基因不用限制性内切酶6.基因T程屮，需使用特定限制酶切割冃的基因和质粒，便于重组和筛选。已

8、知限制酶I的识别序列和切点是一GIGATCC-;,限制酶II的识别序列和切点是一IGATC-o根据图示判断下列操作正确的是：A.Fl的基因和质粒均用限制酶I切割B.H的基因和质粒均用限制酶II切割C.质粒用限制酶I切割，H的基因用限制酶II切割D.质粒用限制酶11切割，□的基因用限制酶1切割6.实施基因T程第一步的一种方法是把所需的基住心赫■板翻NIIIIIIIIIIIIIIIIGGATCCRWIWCATC因从供体细胞内分离出來，这要利用限制性内切酶。一•种限制性内切酶能识别DNA子屮的GAATTC顺序,切点在G和