11DNA重组技术的基本工具(人教版选修3)

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1、课后巩固•提能（30分钟50分）一、选择题（本大题共7小题，每小题3分，共21分）1.基因工程技术也称DNA重组技术，其实施必须具备的四个必要条件是（）A・目的基因限制酶载体受体细胞B.重组DNARNA聚合酶限制酶C.工具酶目的基因载体受体细胞D.模板DNAmRNA质粒受体细胞2.（2011-荷泽咼二检测）如图,有关基因工程的工具酶功能的叙述，不正确的是（）B.限制酶和DNA水解酶的作用相同D.有的质粒是单链DNAA•切断a处的酶为限制性核酸内切酶B・连接a处的酶为DNA连接酶C・切断b处的酶为解旋酶D.切断b处的酶

2、为限制性核酸内切酶3.关于基因工程的工具的下列说法正确的是（A.DNA连接酶最初是从人体细胞中发现的C.不同限制酶切割DNA的位点不同4・下列关于质粒的叙述，正确的是（）A.质粒是广泛存在于细菌细胞中的一种颗粒状细胞器B.质粒是细菌细胞质中能够自主复制的小型环状DNA分子C.所有细菌的质粒上均含有抗生素抗性基因D.细菌质粒的遗传遵循孟德尔定律目的基因EcoRID含目的基因的DMA片段Mun1BCTTAAGGAA11CCTTAAG」（jAI（MunIA5・（2011-黄冈高二检测）限制酶Muni和限制酶EcoRI的识别

3、序列及切割位点分别是・CJAATTG■和-G）AATTC・。如图表示四种质粒和目的基因，其中，箭头所指部位为酶的识别位点，质粒的阴影部分表示标记基因。适于作为图示目的基因载体的质粒是（）6・（2011•绍兴高二检测）现有一长度为3000碱基对（bp）的线性DNA分子，用限制性核酸内切酶酶切后，进行凝胶电泳，使降解产物分开。用酶H和酶B同时酶切，用酶H单独酶切，结果如图1。用酶B单独酶切，结果如图厶结果如图3。下列相关叙述正确的是（）2000bpIOOObp2OOObp600bp400bp^™A・酶H有2个识别位点和切

4、割位点S2I4

5、共同点，如①②(写出两条即可)。⑵若质粒DNA分子的切割末端为则与之连接的目的基因的切割末端应为；可使用把质粒和目的基因连接在一起。(3)氨节青霉素抗性基因在质粒DNA上被称为__其作用是O(4)下列常在基因工程中用作载体的是()A.苏云金芽泡杆菌抗虫基因书B.土壤农杆菌环状RNA分子C.大肠杆菌的质粒D.动物细胞的染色体9・(15分)苏云金芽孑包杆菌(Bt)能产生具有杀虫能力的毒素蛋白。下图是转Bt毒素蛋白基因植物的培育过程示意图(amp「为抗氨节青霉素基因)，据图回答下列问题。(1)将图中①的DNA用HindlH

6、.BamHI完全酶切后，反应管中有__种DNA片段。(2)图中②表示HindLI与BamHI酶切、DNA连接酶连接的过程，此过程可获得种重组质粒；如果换用BstI与BamHI酶切，目的基因与质粒连接后可获得种重组质粒。G)目的基因插入质粒后，不能影响质粒的o(4)图中③的Ti质粒调控合成的vir蛋白，可以协助带有目的基因的T-DNA导入植物细胞，并防止植物细胞中对T-DNA的降解。(5)已知转基因植物中毒素蛋白只结合某些昆虫肠上皮细胞表面的特异受体，使细胞膜穿孔，肠细胞裂解，昆虫死亡。而该毒素蛋白对人类的风险相对较小

7、，原因是人类肠上皮细胞。3种喂制酵识别序列与脚切位点半"川和1[[前苏云金牙兔仟战rfn-fcp朋严辰“牡.ItiILENA并接瓯大肠杆芮涂布春选择平扳上-目饥；tt因因的/植物DMA1目旳卒図旳下遊世j答案解析1•【解析】选C。基因工程过程中需用限制性核酸内切酶将目的基因和载体切出相同的黏性末端，然后利用DNA连接酶将两个相同的黏性末端连接起来；载体的作用是将目的基因导入受体细胞，并在受体细胞内表达产生需要的蛋白质。2•【解析】选D。限制性核酸内切酶可切断a处的磷酸二酯键，两个DNA片段相邻两个核苜酸之间的磷酸二酯

8、键的连接需要DNA连接酶的作用；位于b处的是氢键，断裂时需要DNA解旋酶的作用,而合成时不需要酶的作用。独具【规律方法F中心法则"及〃基因工程〃中相关酶的总结(1)解旋醜：在DNA复制及转录时，打开的是DNA双链碱基对间的氢键，解开双螺旋。(2)RNA聚合酶：在转录时，与基因编码区上游的RNA聚合酶结合位点结合，启动RNA转录，并将核糖核昔酸连