分析方法概述1

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1、分析方法概述（第一部分）廖林川四川大学华西基础医学与法医学院定性分析与定量分析定性分析目的确定检材是不是某种药毒物，或确定检材中是否含有某种或某几种药毒物。过程探查方向初步判断确证方法要求Ø灵敏Ø具有一定的选择性定量分析目的确定某种药毒物在检材中的含量和浓度，或确定某几种药毒物分别在检材中的含量和浓度。需定量的情况Ø医疗中正常用药Ø饮食或人体中常有的成分Ø需根据量界定犯罪性质或法律责任的方法要求灵敏度不一定很高（能测出即可），但需具有良好的计量关系。R/S=f（x）定性与定量的关系定性是定量的基础界限有些定性方法在定性的同时就有定量关系。有些定

2、量方法在一定条件下，本身也具有不同程度的定性意义。随着分析科学和技术的迅速发展，能应用于法医毒物分析并完成毒物的定性鉴别和定量检测任务的分析方法很多，将主要对以下分析方法，尤其是仪器分析方法进行重点介绍。分析方法类别方法类别常用毒物分析方法方法类别方法原理方法特点形态学方法利用检材外观形态或显微形态特征进行辨认、比对简便、快速，能在一定程度上起到筛选和鉴别的作用，为侦查或检验提供线索动物试验法利用毒物的毒性及毒理作用机制，通过观察染毒试验动物是否死亡或其中毒表现，初步判断检材中是否含有剧毒物质或可能含有哪种毒物简便易行，结果直观，可初步筛查、判

3、断毒物类别免疫分析法利用标记毒物与非标记毒物竞争结合抗体的原理检测毒物操作简便，检测省时，灵敏度高，选择性强，耗材少，但需专用试剂盒，且试剂都有一定的时效理化分析法利用毒（药）物的各种理化性质进行鉴别检测，如理化常数的测定，显色反应，沉淀反应等操作简单，对设备要求不高，结果直观，但选择性差，准确度低，往往用作筛查试验或预试验形态学方法——外观性状鉴别通过感观对天然药毒物的外观性状进行鉴别形状：根、茎、叶、花、果实、种子等大小：大小、长短、粗细等颜色：表面和内部的色泽表面特征：光滑还是粗糙，皱褶、槽沟、皮孔、毛茸等质地：软硬、脆韧、轻重、粘性、粉

4、性等折断面：平整－粗糙、致密－疏松、断面纹路及颜色。形态学方法——显微形态鉴别利用显微镜观察药毒物的组织结构、细胞种类和形态以及细胞后含物的种类及形态等，通过与已知物核对进行。细胞种类:纤维细胞、石细胞、栅栏细胞、薄壁细胞等。后含物:如淀粉粒、菊糖、草酸钙结晶、钟乳体、油珠等。动物试验(animaltest)大多毒性大，且具有较强的生理活性和特殊的中毒症状。体外检材充裕、新鲜时，可用动物作急性毒性试验或毒效试验，以预试是否有剧毒或有某类毒物存在。青蛙毒性试验动物试验(animaltest)免疫分析法机理：抗原－抗体特异性结合方法酶免疫法（enz

5、ymeimmunoassay,EIA)放射免疫法（radioimmunoassay,RIA)荧光免疫法（luoroimmunoassay,FIA)薄层免疫法（thinlayerimmunoassay,TIA)特点：简便、快速、灵敏，种类有限，试剂较贵。应用：吸毒者和运动员尿液中毒品或兴奋剂的筛查。尿样滴入S孔内，样品在毛细效应作用下向前迁移。尿样中无吗啡存在或吗啡浓度低于阈值浓度时，因胶体金抗体全部或部分与被固定在板上的吗啡偶联物结合，使测试区（T）内出现一条紫红色的条带。当吗啡高于阈值浓度时，胶体金抗体全部与样品中的吗啡结合，未与吗啡偶联物结

6、合，因此，在测试区不出现紫红色条带。质控区未出现红色线条，说明操作有误或试剂盒失效，结果无效。尿样中吗啡检测阈值浓度为300ng/ml。测试区（T）吗啡偶联物和被胶体金标记的抗吗啡单克隆抗体质控区（C）加样孔（S）颜色和沉淀反应机理大多为生物碱，能与具有氧化性质的酸性试剂反应生成有色物质；或与某些试剂生成沉淀，甚至特殊晶体。方法颜色反应:点滴板沉淀或结晶反应：载玻片显微镜选用原则选择性和实用性鸦片生物碱的颜色和结晶反应吗啡＋碘－碘化镉钾马尾松状结晶用于可疑毒品的预试。理化方法常用毒物分析方法方法类别方法原理方法特点仪器分析法主要包括利用毒物光学

7、性质的光谱分析法（spectralanalysis）利用毒物色谱行为差别的色谱分析法（chromatography）根据物质分子量、断裂碎片质量大小及结构特征信息的质谱分析法（massspectrographicanalysis）常用的有紫外分光光度法（ultravioletspectrophotometry）原子吸收分光光度法（atomicabsorptionspectrophotometry）气相色谱法（gaschromatography）高效液相色谱法（highperformancechromatography）薄层色谱法（thinlay

8、erchromatography）毛细管电泳法（capillaryelectrophoresis）各类质谱法及多级色质联用法灵敏，准确，自动化程度高，