高中生物选修3专题复习

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1、1、基因工程又叫做_______或__________。基因工程基因拼接技术DNA重组技术2、基本工具：“分子手术刀”:“分子缝合针”:基因进入受体细胞的载体:3、基本操作步骤：运载体DNA连接酶限制性核酸内切酶1、目的基因的获取2、基因表达载体的构建（核心）3、将目的基因导入受体细胞4、目的基因的检测与鉴定黏性末端黏性末端1.限制性核酸内切酶一种限制性内切酶只能识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开（切割DNA分子）来源：主要从原核细胞分离作用：作用结果：EcoRI重难点剖析:基因工程的“专用工具”形成平未

2、端（SmaI）及黏性未端（EcoRI）1)、种类：2)、作用部位：E·coliDNA连接酶（黏性末端）T4DNA连接酶（黏性末端和平末端）磷酸二酯键DNA连接酶可把平未端或黏性末端之间的缝隙“缝合”起来，即相当于把梯子两边的扶手的断口连接起来，这样一个重组DNA分子就形成了。2.DNA连接酶——“分子缝合针”3.分子运载车——运载体（1）作用：将目的基因送入受体细胞（2）具备的条件：a.能自我复制.b.具有一个或多个酶切位点.c.有标记基因.d.对受体细胞无害.质粒、噬菌体、动植物病毒（3）种类：质粒——细菌拟核DNA之外结构简单、能自主复制的很小的环状DNA分子。（

3、一）目的基因的提取目的基因：主要是指___________________。获取方法：1、____________中获取目的基因2、人工合成法：化学方法合成DNA片段（反转录法、直接合成法）3、PCR反应扩增DNA基本操作步骤从基因文库编码蛋白质的结构基因原理：DNA复制过程：加热DNA解链冷却引物结合到互补DNA链互补链合成条件：耐高温DNA聚合酶（二）基因表达载体构建1、基因表达载体由________、________________、_____四部分组成。目的基因启动子标记基因终止子2、启动子作用：3、标记基因的作用：RNA聚合酶识别和结合的位点，启动转录的“开

4、关”。鉴别受体细胞中是否含有目的基因，从普通细胞中筛选出含目的基因的受体细胞（1）用一定的_________切割质粒，使其出现一个切口，露出____________。（2）用_______________切断目的基因，使其产生____________。（3）将切下的目的基因片段插入质粒的______处，再加入适量___________，形成了一个重组DNA分子（重组质粒）限制酶黏性末端同一种限制酶相同的黏性末端切口DNA连接酶重组质粒形成过程:导入植物细胞：（三）将目的基因导入受体细胞导入动物细胞：导入微生物细胞：受体细胞导入方法体细胞受精卵受精卵显微注射法Ca2＋处

5、理法农杆菌转化法基因枪法花粉管通道法将目的基因导入微生物细胞原核生物繁殖快、多为单细胞、遗传物质相对较少，故早期常作为受体细胞。大肠杆菌细胞用Ca2+处理感受态细胞重组表达载体DNA溶于缓冲液混合导入目的基因是否插入转基因生物染色体的DNA上（四）目的基因的检测与鉴定目的基因是否表达：目的基因是否转录：方法:DNA分子杂交方法:核酸分子杂交方法:抗原抗体杂交个体水平鉴定——抗虫性鉴定、抗病性鉴定、生物活性鉴定等（生理、性状水平的检测）检测转基因生物转基因生物是指利用技术导入培育出的能够将新性状稳定地给后代的基因工程生物。基因工程外源基因遗传优点：打破了常规育种难以突破

6、的的改变了生物的遗传性状.物种之间的界限(生殖隔离)定向1.抗虫转基因植物（一）植物基因工程2.抗病转基因生物3.抗逆转基因作物基因工程的应用4.利用转基因改良植物的品质方法:利用转基因动物生产药物--动物乳腺生物反应器获取目的基因（药用蛋白基因）构建基因表达载体（在药用蛋白基因前加乳腺蛋白基因的启动子）显微注射导入哺乳动物受精卵中形成早期胚胎将胚胎送入母体动物发育成转基因动物（只有在产下的雌性动物个体中，转入的基因才能表达）（二）动物基因工程用转基因动物作器官移植的供体供体动物：存在的难题：解决方法：猪免疫排斥将供体基因组导入某种基因调节因子，以抑制抗原决定基因的表

7、达，或设法除去抗原决定基因，再结合克隆技术，培育出没有免疫排斥反应的转基因克隆猪器官。（三）、基因工程药品:工程菌：用基因工程的方法，使外源基因得到高效率表达的菌类细胞株系。我国已生产的产品：白细胞介素-2、干扰素、乙肝疫苗等（四）基因诊断与基因治疗:基因诊断：用放射性同位素等标记的“DNA探针”检测肝炎病毒等病毒感染及遗传缺陷，不但准确而且迅速。基因治疗：把健康的外源基因导入有基因缺陷的细胞中，达到治疗疾病的目的。体外基因治疗体内基因治疗基因治疗的类型比较：基因工程和蛋白质工程基因工程蛋白质工程相同点都要改造基因，都属于分子水平产生新的基因型，无