单克隆抗体多克隆抗体制备修改（终稿）

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1、单克隆抗体多克隆抗体制备班级：03生技6学号：032020821姓名：应尧指导师：郑蔚红摘要单克降抗体技术是现代生命科学研究的重要工具，在基因和蛋白质的结构和功能研究方而有着不可或缺的作用。木文全而综述了单克隆抗体研究最新进展。通过构建真核表达载体，采用DNA免疫、细胞免疫、消减免疫和多位点重复免疫等现代分子免疫学方法，快速制备高亲合力的单克隆抗体，改进常规方法制备单抗费时费力且亲合力低的弱点，对后基因吋代蛋白质组学等棊础研究领域的研究具有巨大的推动作用；同吋在生物芯片、临床供学和疾病的诊断与治疗以及空间牛命科学

2、等应用领域有着广阔的应用前景。关键词多克隆抗体，单克隆抗体单克降抗体指来自一个B淋巴细胞的单克隆杂交瘤细胞株所分泌的、针对同一抗原决定簇的抗体。1975年，英国科学家米尔斯坦和法国科学家柯勒开创了将产生抗体的单-个细胞（如B淋巴细胞）和瘤细胞（如骨髓瘤细胞）杂交的技术，形成杂交瘤细胞，成功地获得了化学性质单-、特界性强的单克隆抗体，并因此获得1984年的诺贝尔生理学及医学奖。⑷半抗原载体复合物有多种结合位点，免疫系统将会产生具有不同特异性的多种抗体（称为多克隆抗体）.多克隆抗体包含不同种类的抗体，所以在免疫检测使

3、用Z前抗体必须标准化。⑵单克隆抗体的化学本质是蛋口质，合成场所是核糖体，它是市基因控制合成的，合成过程包括转录和翻译两个重要步骤。B淋巴细胞中产生抗体的基因转移到了杂交瘤细胞的DNA中，抗体基因在杂交瘤细胞屮指挥抗体合成。杂交瘤细胞以有丝分裂的方式大量增殖，所以在杂交瘤细胞的培养过程中，需要定期地用胰蛋门酶处理，然后分装到更多的培养基中。单-克隆抗体具有免疫作用，它与血清抗体相比，优越之处在于特异性强、灵敬度高、产量高。单克隆抗体多克隆抗体制备班级：03生技6学号：032020821姓名：应尧指导师：郑蔚红摘要单

4、克降抗体技术是现代生命科学研究的重要工具，在基因和蛋白质的结构和功能研究方而有着不可或缺的作用。木文全而综述了单克隆抗体研究最新进展。通过构建真核表达载体，采用DNA免疫、细胞免疫、消减免疫和多位点重复免疫等现代分子免疫学方法，快速制备高亲合力的单克隆抗体，改进常规方法制备单抗费时费力且亲合力低的弱点，对后基因吋代蛋白质组学等棊础研究领域的研究具有巨大的推动作用；同吋在生物芯片、临床供学和疾病的诊断与治疗以及空间牛命科学等应用领域有着广阔的应用前景。关键词多克隆抗体，单克隆抗体单克降抗体指来自一个B淋巴细胞的单克

5、隆杂交瘤细胞株所分泌的、针对同一抗原决定簇的抗体。1975年，英国科学家米尔斯坦和法国科学家柯勒开创了将产生抗体的单-个细胞（如B淋巴细胞）和瘤细胞（如骨髓瘤细胞）杂交的技术，形成杂交瘤细胞，成功地获得了化学性质单-、特界性强的单克隆抗体，并因此获得1984年的诺贝尔生理学及医学奖。⑷半抗原载体复合物有多种结合位点，免疫系统将会产生具有不同特异性的多种抗体（称为多克隆抗体）.多克隆抗体包含不同种类的抗体，所以在免疫检测使用Z前抗体必须标准化。⑵单克隆抗体的化学本质是蛋口质，合成场所是核糖体，它是市基因控制合成的，

6、合成过程包括转录和翻译两个重要步骤。B淋巴细胞中产生抗体的基因转移到了杂交瘤细胞的DNA中，抗体基因在杂交瘤细胞屮指挥抗体合成。杂交瘤细胞以有丝分裂的方式大量增殖，所以在杂交瘤细胞的培养过程中，需要定期地用胰蛋门酶处理，然后分装到更多的培养基中。单-克隆抗体具有免疫作用，它与血清抗体相比，优越之处在于特异性强、灵敬度高、产量高。1单克隆抗体制备1.1单克隆抗体技术的基本原理小鼠骨髓瘤细胞能在体内外无限增殖和分泌无抗体活性的免疫球蛋白，而免疫小鼠脾细胞具有产生抗体的能力，但不能无限增殖。采川融合剂（PEG等）将这两

7、种细胞融合成杂交瘤细胞。这种朵交瘤细胞具有亲代细胞的主要特征。既能在人工培养下无限增殖，又能产生特异性抗体。可通过有限稀释法选育山单个细胞增殖而成的克隆。⑶1.2单克隆抗体技术的基本的过程包括给小鼠注射一种抗原，它可以被免疫系统识别，因此诱导小鼠的B淋巴细胞产牛相应抗体。然后，在培养基中融合小鼠的B淋巴细胞和小鼠骨髓瘤细胞，产生杂交瘤细胞,经过筛选分离出单个杂交瘤细胞，再使单个杂交瘤细胞扩增，最后分离、纯化抗体。但这种方法产主的是纯粹的小鼠单克隆抗体，它使患者产牛免疫排斥反应。为了克服鼠源性抗体的免疫排斥反应，科

8、学家研究各种各样的技术使小鼠的抗体人源化。一种方法是川人的纽分取代小鼠单克隆抗体抗原结合区以外的部分。另外一种方案称为抗体的人源化，即利用遗传工程的方法，用人源蛋白尽可能多地、有选择地取代小鼠抗体，包括大部分抗原结合区。经过长达25年的努力后，研究者最终把人类B细胞与忖髓瘤细胞融合，形成的杂交瘤细胞可以产牛完全人源化的抗体。它使单克隆抗体更接近商品化。也有一些公司转向研究