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时间:2019-09-17
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1、实验六(红薯/马玲薯/黄地瓜等淀粉块茎类植物)中淀粉含量测定(酸水解法)综合设计(4学时)一、实验原理1、淀粉提取,也称为浆渣分离或分离,是淀粉加工中的关键环节,直接影响到淀粉提取率和淀粉质量。粉碎后的物料是细小的纤维,体积大于淀粉颗粒,膨胀系数也大于淀粉颗粒,比重又轻于淀粉颗粒,将粉碎后的物料,以水为介质,使淀粉和纤维分离开来。2、淀粉是食品中主要的组成部分,也是植物种子中重要的贮藏性多糖。淀粉跟稀硫酸在加热的条件下能够完全水解成葡萄糖、麦芽糖等还原糖。还原糖的测定是糖定量测定的基本方法。还原糖在碱性条件下被氧化成糖酸及其他产物,3,5-二硝基水杨酸则被还原成棕红色的
2、3-氨基-5硝基水杨酸。在一定范围内,还原糖的量与棕红色物质的深浅成正比关系,利用分光光度计,在540nm波长下测定光密度值,查对标准曲线。由于淀粉完全水解成还原糖的量是成正比的,所以,也与棕红色物质的深浅成正比关系。二、材料、仪器与试剂(一)材料:五指山红薯。(二)仪器:分光光度计722、小台秤、分析天平、烧杯(100mL)、研钵、容量瓶(100mL)、洗瓶、漏斗、滤纸、具塞刻度试管(15mL)、恒温水浴、移液管(1mL,2mL)。(三)试剂12mol/LNaOH溶液准确称取4gNaOH固体,溶于15mL蒸馏水中,并倒入50ml容量瓶中,用蒸馏水分几次清洗烧杯并将清洗
3、的溶液倒入容量瓶中,用蒸馏水定容至刻度线。23,5-二硝基水杨酸试剂准确称取3,5-二硝基水杨酸1g,溶于2mol/LNaOH溶液20mL,加入50mL蒸馏水,再加入30g酒石酸钾钠,待溶解后用蒸馏水定容至100mL。盖紧瓶塞,勿让CO2进入。若溶液浑浊,可过滤后使用。30.1mol/L柠檬酸缓冲液(pH5.6)A液(0.1mol/L柠檬酸):称取C6H8O7٠H2O21.01g,用蒸馏水溶解并定容至1000mL。B液(0.1mol/L柠檬酸钠):称取Na3C6H5O7٠2H2O29.41g,用蒸馏水溶解并定容至1000mLA液110mL与B液290mL混匀,即为0.1
4、mol/L柠檬酸缓冲液(pH5.6)。41mg/mL淀粉溶液称取0.1g淀粉溶于0.1mol/L柠檬酸缓冲液(pH5.6)100mL中。520%硫酸用50mL的量筒量取50mL的水,倒入100mL烧杯中;再用20mL的量筒量取12.6mL98%的浓硫酸,沿内壁缓缓倒入烧杯内的水中,边倒边用玻璃棒搅拌。等冷至室温后,倒入100ml容量瓶中,用蒸馏水分几次清洗烧杯并将清洗的溶液倒入容量瓶中,用蒸馏水定容至刻度线。4三、操作步骤a)淀粉的制备1.操作步骤取一定量马铃薯洗涤→磨碎→加水纱布过滤(滤渣继续粉碎加水过滤)→滤液→白布过滤→静置→倒掉上层液体→加水搅拌静置→布氏漏斗抽
5、滤→烘干2.操作要点:1)洗涤:对生产淀粉的原料进行清洗,是保证淀粉质量的基础,清洗的越干净,淀粉的质量就越好。2)磨碎:经过洗涤后,送至磨碎机处理。磨碎的目的就是破坏物料的组织结构,使微小的淀粉颗粒能够顺利地从块根中解体分离出来。尽可能的使物料的细胞破裂,释放出更多的游离淀粉颗粒。3)筛分:经过磨碎后的马铃薯糊用纱布过滤筛分,在过滤过程中要加水洗涤,滤液为淀粉乳,滤渣再进行2次粉碎过滤。4)过滤后的淀粉乳放在水桶中静置数小时,倒掉上层液体,加水搅拌继续静置数小时。5)脱水干燥:淀粉清洗后,含水分很高,必须脱水,用布氏漏斗抽滤得到含水分为45%的湿淀粉,把湿淀粉放入60
6、℃烘箱烘干即得淀粉成品。3.淀粉得率计算称量干燥获得的淀粉重量,按照以下公式计算得率。b)淀粉含量的测定(一)样品淀粉溶液的制备4准确称取0.1g样品,溶于于100ml的容量瓶中,即配成1mg/ml样品淀粉溶液,并在相应的容量瓶上贴上标签。(二)淀粉标准曲线的制作取7支洁净的具塞比色管,编号,按表1内容进行操作:表1淀粉标准曲线制作操作项目操作项目12345671mg/mL标准淀粉溶液/mL01.01.41.82.22.63.020%硫酸/mL2.02.02.02.02.02.02.0蒸馏水/mL4.03.02.62.21.81.41混匀,置于80℃水中水浴反应3~4m
7、in,冷却一段时间后2mol/LNaOH溶液/mL1.0+21.01.01.01.01.01.03,5-二硝基水杨酸/mL4.04.04.04.04.04.04.0混匀,置沸水浴煮沸5min,取出,冷至室温后,以1号为参比溶液,各试管淀粉含量/mg01.01.41.82.22.63.0A540将测定结果记录于表1中,以淀粉含量(mg)为横坐标,吸光度A540为纵坐标,绘制标准曲线。(三)样品淀粉的测定取6支洁净的具塞比色管,编号,按表2内容进行操作。显色反应后,以0为参比溶液,于540nm处测定吸光度A540,将测定结果记录于表2中。操作
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