腧穴“解郁方”对抑郁大鼠海马影响的观察

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1、中图分类号论文编号学科分类号密级ShanxiUniversityofChineseMedicine硕士学位论文腧穴“解郁方”对抑郁大鼠海马影响的观察Theobserveof“ShuXueJieYuFang”effectsondepressionrathippocampal研究生姓名:谢保弟导师姓名、职称:燕平教授学科、专业名称:针灸推拿学研究方向:腧穴处方规范化的基础与临床研究申请学位类型:科学学位二O一七年六月一日山西中医学院学位论文原创性声明本人郑重声明:所呈交的学位论文,是个人在导师的指导下,独立进行研究工作所取得的成果。除文中已经特别加以注明引用的内容外,本论文不含任何其

2、他个人或集体已经发表或撰写过的作品成果。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体,均已在文中以明确方式标明并致谢。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。论文作者签名:2017年6月1日关于学位论文使用授权的声明本人完全了解山西中医学院有关保留使用学位论文的规定,同意学校保留或向国家有关部门机构送交论文的复印件和电子版,允许被查阅和借阅。本人授权山西中医学院可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索,可以采用影印、缩印或其他复印手段保存和汇编本学位论文。(保密论文在解密后应遵守此规定)论文作者签名:论文导师签名:2017年6月1日中文摘要目的本研究通过腧穴“解郁方”治疗

3、抑郁症模型大鼠,对比模型组与针刺组大鼠海马重量的变化、ERK通路中Ras蛋白含量的变化、海马中神经细胞的变化,从宏观上研究腧穴“解郁方”对抑郁症模型大鼠海马重量的影响,从微观上研究腧穴“解郁方”对海马ERK通路中Ras蛋白和神经元的影响,探讨腧穴“解郁方”治疗抑郁症的机理,为临床上推广腧穴“解郁方”治疗抑郁症提供更多可靠的实验室依据。方法先通过旷场试验挑选出水平运动次数加垂直运动次数之和在30-120次的大鼠,其余的剔除,然后将30只SD大鼠随机分为3组,每组10只。A组:空白组;B组:模型组;C组:针刺组。A组作为空白组,不做任何处理;B组、C组开始接受三周不同的应激刺激:冷水

4、游泳(4℃,5min)、禁水(24h)、禁食(24h)、昼夜颠倒(24h)、热烘(45℃,5min)、束缚(3h),夹尾(3min)。上述应激刺激每天随机选择1种,每种应激方式平均使用3次。针刺组C组从造模开始后就进行治疗,穴位常规消毒后,用华佗牌0.25mm×25mm针灸针进行针刺,使用SDZ-II电针仪加强刺激。使用电针仪不可过度刺激大鼠导致其挣扎、嘶叫,总的来说以穴位周围皮肤轻微颤动为宜,电流宜保持在2mA以下,留针20min,1次/天,共治疗21d;A组不给予应激刺激和针刺治疗,B组只采取应激刺激而不给予针刺治疗。实验结束后,通过对海马形态的观察、重量的测定,得出抑郁大鼠

5、各项实验室数据比较结果;采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测各组大鼠RAS蛋白含量的变化;在光镜下观察各组大鼠海马内神经元细胞的变化。结果1.从各项行为学指标我们可以看到:实验前空白组、模型组、针刺组大鼠在体重、糖水消耗量、旷场试验方面显示无明显差异(p>0.05)。(1)21天后体重变化:与A组(空白组)比较,B组(模型组)大鼠的体重均明显下降(P<0.01);与B组(模型组)比较,C组(针刺组)大鼠体重均显著上升(p<0.01)。(2)21天后,糖水实验情况:与A组(空白组)相比,B组(模型组)大鼠的糖水消耗量明显降低(P<0.01);与B组(模型组)相比,C组(针刺组)大鼠

6、的糖水偏爱度显著升高(p<0.01)。(3)实验结束后,旷场试验情况:与A组(空白组)相比,B组(模型组)大鼠水平运动和竖直运动评分明显下降,结果有显著差异(P<0.01);与B组(模型组)比较,C组(针刺组)大鼠水平运动和竖直运动均显著增高(P<0.01)。2.针刺腧穴“解郁方”对应激模型大鼠海马影响情况如下:与空白组比较,模型I组海马重量减轻但无统计学意义(p>0.05),但Erk通路中ras蛋白含量降低,结果有显著性差异(P<0.01),组织学观察可见神经细胞减少;与模型组比较,腧穴“解郁方”组Erk通路中ras蛋白含量降低,结果有显著性差异(P<0.01),组织学观察可见

7、海马神经细胞减少相对较少。结论1.针刺腧穴“解郁方”能够明显改善大鼠的抑郁症状。2.就本实验而言针刺腧穴“解郁方”对大鼠海马重量有影响,但尚无统计学意义。3.应激刺激后模型组大鼠海马内神经细胞显著减少,而针刺组大鼠海马内神经细胞的减少相对较少,因此可推断针刺腧穴“解郁方”对大鼠海马内神经细胞具有保护作用。4.应激刺激后,大鼠海马内Ras蛋白含量明显增高、Ras-Erk通路过度激活,针刺腧穴“解郁方”可以降低抑郁大鼠海马内Ras蛋白含量、抑制Ras-Erk通路的过度激活。综上所述,

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