RNA干扰沉默雄激素受体基因对前列腺癌细胞生长的抑制作用研究

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1、•论著.RNA干扰沉默雄激素受体基因对前列腺癌细胞生长的抑制作用研究’王洛夫，张尧，兰卫华•靳风烁△，江军(第三军医大学大坪医院歼战外科研究所泌原外科，重庆400042〉摘要：目的设计、合成针对雄激索受体(AR)基因的几有高干扰效半的siRNA.观察其対■關列腺癌细胞的生长抑制作用。方法设计、合成多个什对AR的siRNA,转嫩前列腺癌细胞【.ZCaP・拜选出对AR思用千扰效率敢离的ARsiRNA•用RT-PCR检测ARmRNA水平，并计耳细胞生式抑制丰。结果采用SilencersiKNAConstr

2、uctionKiizX.功合成了ARsiRNA,转染I“N・CaP细胞，拜选出一个对其生长抑制作用最来的siRNA•并证实ARmRNA水平显箸下降.LNCaP细胞的生长抑制舉为78.2%.结论针对越漱索受体的siRNA可沉默4激素受体恳因•并抑轲林列腺癌细胞的生长.关键词：林列腺癌；RNA干扰；傩激索受体&恳因治疗中图分类号:R737.25,R730.54文猷标识码：A文章编号：1671-8348(2010)01-0028-03Suppressiveeffectofandrogenreceptors

3、iRNAonprostatecancercellproliferationbyRNAinlcrference'WANGLutrfu.ZHANGYao.l.ANWei-hua,etal.(DepartmentofUrology.DapingHospital.ResearchInctituteofFieldSurgery,ThirdMilitaryMedicalUfti-uersity400012,China)Abstract：ObjectiveTodesignandsynthesizeARsiRNAs

4、andtoobservetheireffectontheproliferationofprostatecancercells.MethodssiRNAsweredesignedandsynthesizedandtransfectLNCaPprostatecancercells.OneoflhemosteffectiveARsiRNAswasselectedbyobservingthesuppressiveeffect.The/RmRNAlevelwasdetectedbyRT-PCRandthes

5、uppressiverateofcellgrowthwascalculated.ResultsARsiRNAsweresuccessfullysynthesizedhyusingSilencersiRNAConstructionKit.WcconfirmedthatAKsiRNA

6、

7、waslhemosteffectivesiRNA.ThelevelofARmRNAofl-N('aPceilswassignificantlyreducedbyARsiRNA(I・Thesuppressiverateof

8、ARsiRNA"onLNCaPcellgrowthwas7&2%.ConclusionARsiRNAcansilencetheandrogenreceptorgeneandsuppresstheproliferationoftheprostatecancercells.Keywords：prostatecancer；genetherapy；RNAinterference；androgenreceptor前列腺癌具有雄激素依赖性，抗雄激素治疗至少对80%的晚期前列腺癌有效•但绝大多数患者会在短期内发展

9、为準激素非依赖性前列腺癌，缺乏有效的治疗方法,2目前有研究认为，前列腺癌的雄激素依赖性主要是雄激素受体(androgenreceptor.AR)依赖性，AR不但在雄激素依赖性前列腺癌中具有重要作用•在雄激素非依赖性前列腺癌中也起着关键作用因此，可针对AR基因进行前列腺癌的基因治疗。RNA干扰(RNAi)具有高效、高度基因特异性的特点•能沉默所有已知序列的基因，采用RNA干扰技术沉默AR基因，将可能有效地抑制AR的表达•从而抑制前列腺细胞的生长。因此•本研究拟设计合成针对AR荃因的小「扰RNA(si

10、RNA)并转染前列腺癌细胞•观测其对AR基因的沉默作用及对前列腺癌细胞的生氏抑制作用。I材料与方法II材料实验选用人前列腺癌细胞LNCaPC购白美国ATCC),该细胞表达AR•兵有雄激素依赖性•同时该细胞対雌激素、孕激索甚至抗雄激索药物敏感•具有雄激素莎依赖性前列腺癌的特性。siRNA合成试剂盒SilencersiRNA(instructionKit.siRNA转染试剂siPORT™LipidTransfectionAgent购自类国Ambion公i