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《抗尿苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶2单克隆抗体制备及鉴定》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。
1、抗尿昔二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶2单克隆抗体制备及鉴定作者：王婉，高媛，杨金菊，柳晓兰，鞠艳芳，刘莉，陈志成刘蓉，毕业论文；迟俊，邢维贤，高建恩，安立国，孙启鸿毕业论文【摘要】；本研究制备抗人尿昔二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶2(UDP?glucosepyrophosphorylase2)的单克隆抗体(mAb)并进行初步鉴定。将正常成人肝组织匀浆离心并分离肝脏胞浆总蛋白，用肝脏胞浆总蛋白免疫BALB/c小鼠，采用杂交瘤技术制备单克隆抗体，通过间接ELISA法、Westernblot及免疫组织化学的方法对单克隆抗体进行特性鉴定，通过Uni?ZAPXR肝脏cDNA表达文库
2、筛选鉴定抗体特异性。结果表明：通过间接ELISA筛选获得1株可稳定分泌抗人UGP2mAb的杂交瘤细胞系BAD062,其分泌的单克隆抗体的Ig亚类(型)为IgG2b(k),Westernblot结果显示该抗体可以特异地识别分子量为56kD的蛋白；应用单克隆抗体BAD062对人肝脏cDNA表达文库(Uni?ZAPXR)进行筛选,阳性噬菌斑测序结果显示2个阳性克隆插入序列均为UGP2。结论：单克隆抗体BAD062特异地识别抗原UGP2,该抗体可用于ELISA检测.Westernblot.免疫组织化学实验，为UGP2的研究提供了有力的工具。毕业论文【关键词】；尿昔
3、二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶2单克隆抗体cDNA表达文库毕业论文PreparationandIdentificationofMonoclonalAntibodyAgainst毕业论文Abstract；Thestudywasaimedtogeneratemonoclonalantibodies(mAbs)againsthomosapiensUDP?glucosepyrophosphorylase2(UGP2).；Normalhumanlivertissues；homogenized,andcytosolicproteins；isolatedbycentrifuga
4、tionwereusedtoimmunizeBALB/cmicetogeneratemAbsbyhybridomatechnique・ThemAbswereidentifiedbyELISA,Westernblot,andimmunohistochemistry；assay.TheantibodyspecificitywasconfirmedbyUni?ZAPexpressionlibraryscreening.TheresuItsindica.tedthat；onehybridomaBAD062secretingspecificmAbagainstUGP
5、2wasestablished.TheIgsubclassofthismAbwasIgG2b(k),anditcouldbeusedinELISA,Westernblot,immunohistochemistryassay.TheantigenrecognizedbyBAD062mAbwaslocalizedinthehepatocytecytoplasm,withmolecularweightof56kDinthecytosolicproteinsofhumanlivertissue・TheBAD062mAbwasfurtherconfirmedbyim
6、munoscreeningofUni?ZAPXRlivercDNAexpressionlibrary.ItisconeludedthatahybridomacelllinestablysecretesspecificmAbagainstUGP2・ThismAbreactedwithUGP2inELISA,Westernblot,immunohistochemistryassay,andwouldbeveryusefulfortheUGP2studies・毕业论文；Keywords；UGP2；mAb；cDNAexpressionlibrary毕业论文；尿昔二
7、磷酸葡萄糖焦磷酸化酶2(UDP?glucosepyrophosphorylase2,UGP2)是糖原生物合成过程中的一种酶，由508个氨基酸组成，相对分子质量(Mr)约为56000,催化UTP与葡萄糖？1?P的反应，生成UDP?葡萄糖。UDP?葡萄糖是主要活化糖的形式，作为葡萄糖基供体参与蔗糖、纤维素、半纤维素、果胶质以及糖脂、糖蛋白的合成代谢［1］。摄入人体内的葡萄糖可在葡萄糖激酶、葡糖磷酸变位酶和尿昔二磷酸葡糖焦磷酸化酶(UGP2)的催化下形成尿昔二磷酸葡萄糖(UDPG)。此外，UGP2还与腺11票吟二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶(AGPase)相偶联，形成A
8、DPG,参与淀粉的合成［1,2］。在糖原合成和分解过程中该酶的缺陷
