植物生理实验总结

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1、福建农林大学生命科学学院综合性实验总结《植物生理生化实验》综合性实验总结(2014－2015学年第一学期)课程：《植物生理生化实验》--生化实验21学时成绩：学院：植物保护学院专业：农林生科类创新实验班3班年级：2013级学号：3135406015姓名：陈乃馨综合性实验项目吸胀与萌发水稻种子若干生化指标的差异分析面向专业13级农学、植保、农资、园艺、设施、茶学、林学、水保、制药、生安等本项目学时21学时实验内容介绍种子萌发是种子植物生长发育过程中的早期阶段，是个体发育中最为关键的时期，直接影响到后期的出苗、生长和结实等。本综合性实验要求学生测定吸胀和萌发水稻种子的若干生化指标，利用植物生

2、理生化理论知识综合分析两组种子之间可溶性蛋白质含量、游离氨基酸总量、差异蛋白质相对分子量以及淀粉酶的活性等生化指标的差异。福建农林大学生命科学学院综合性实验总结吸胀与萌发水稻种子若干生化指标的差异分析摘要：以吸胀与萌发的水稻种子为材料，采用茚三酮试剂显色法、Folin-酚试剂法、SDS-PAGE法、DNS比色法测定了不同处理水稻种子的游离氨基酸含量、淀粉酶活性、可溶性蛋白质含量及其差异蛋白质相对分子量。结果表明：与吸胀水稻种子相比，萌发水稻种子的游离氨基酸含量为0.0537mg/g鲜重、可溶性蛋白质含量为7.63微克每管；α—淀粉酶活性为8.55mg/g·min，β—淀粉酶活性为4.83

3、mg/g·min分别高8.53、4.47mg/g·min；出现4条差异蛋白质条带，差异蛋白质相对分子量10.97KDa，说明在种子萌发过程中，与种子萌发相关的各种酶活性提高，氨基酸含量升高，从而有利于促进种子的萌发。关键词：水稻种子；萌发；生理生化；游离氨基酸；可溶性蛋白质；淀粉酶活性；差异蛋白质；与吸胀水稻种子相比，萌发水稻种子的游离氨基酸含量更高；可溶性蛋白质含量更高；淀粉酶活性更高；过氧化物同工酶含量更高；种子中各种酶活性提高，各种氨基酸含量升高，明显有利于促进种子的萌发。引言写研究种子萌发过程中生理生化变化的意义1材料与方法1.1试验材料采用水稻种子为试验材料，设置2种处理：浸泡

4、2天的吸胀水稻种子和浸泡催芽后的萌发水稻种子。1.2试验方法1.2.1游离氨基酸含量测定：采用茚三酮试剂显色法1.2.2可溶性蛋白质含量测定：采用Folin-酚试剂法1.2.3淀粉酶活性测定：采用3,5-二硝基水杨酸显色法1.2.4差异蛋白质测定：采用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法2结果与分析（对数据进行显著性分析）2.1吸胀与萌发水稻种子游离氨基酸含量比较处理游离氨基酸含量（单位）吸胀0.0429（mg/g鲜重）萌发0.0537（mg/g鲜重）当氨基酸的游离氨基与水合茚三酮共热后，能产生二酮茚胺的取代盐等蓝紫色化合物。且在一定范围内，其分光光度值与游离氨基酸的含量成正比。根据游离氨基酸在

5、种子萌发中的作用，对2个处理的数据进行分析可以看到，发芽种子的氨基态氮含量高于未发芽中的，分别为0.0537（mg/g鲜重）、0.0429（mg/g鲜重）。则说明了萌发种子的氮代谢等生理活动强于未发芽种子。误差分析：实验过程中存在一些操作误差可能导致结果变化，同时样品加热冷却放置的时间不同也可能导致一定的误差。福建农林大学生命科学学院综合性实验总结2.2吸胀与萌发水稻种子可溶性蛋白含量比较处理游离氨基酸含量（单位）吸胀5.75（ug/g鲜重）萌发7.73（ug/g鲜重）在碱性条件下，蛋白质中的肽键与铜结合生成紫红色的蛋白质即铜络合物；此络合物以及蛋白质中络氨酸和苯丙氨酸等芳香族氨基酸的残

6、基使磷钼酸-磷钨酸试剂还原，产生磷钼蓝的深蓝色混合物。在一定范围内，颜色深浅与蛋白质含量成正相关。根据可溶性蛋白含量在种子萌发中的作用，对2个处理的数据进行分析可以看到与吸胀水稻种子相比，萌发水稻种子的可溶性蛋白质含量更高，为7.73（ug/g鲜重）。说明了发芽种子的总代谢能力强于未发芽种子，且发芽种子的酶活性也强于未发芽种子。因为植物体内的蛋白质含量是研究酶活性的一个重要项目。且植物体内的可溶性蛋白大多是参与生理代谢的酶类，且可溶性蛋白含量是了解植物总代谢的重要指标。2.3吸胀与萌发水稻种子淀粉酶活性比较处理总酶活（单位）α淀粉酶活性（单位）β淀粉酶活性（单位）萌发13.38（mg/g

7、·min）8.55（mg/g·min）4.83（mg/g·min）吸胀0.88（mg/g·min）0.52（mg/g·min）0.36（mg/g·min）淀粉酶产生的还原糖能使3,5-二硝基水杨酸还原，生成棕红色的3-氨基-5-硝基水杨酸，淀粉酶活力的大小与产生的还原糖的量成正比，可以用麦芽糖制作标准曲线，用比色法测定淀粉生成的还原糖的量，以单位重置样品在一定时间内生成的还原糖的量表示酶活力。本实验采用加热钝化β-淀粉酶测出α-淀粉