生化实验-蛋白质的变性、凝固及沉淀反应性质

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1、蛋白质的变性、凝固及沉淀反应生物化学与分子生物学教研室实验一实验目的和意义验证关于蛋白质的相关理论学会分析蛋白质的基本实验方法讨论蛋白质分析在科研和临床工作中的意义血清、尿液中蛋白质分析与疾病诊断蛋白质的变性在某些物理和化学因素作用下，蛋白质理化性质的改变和生物学活性的丧失。基本概念蛋白质的变性现象本质一级结构不变二硫键和非共价键被破坏蛋白质的变性引起蛋白质变性的理化因素加热乙醇等有机溶剂强酸、强碱重金属盐生物碱试剂蛋白质的变性学习蛋白质变性的意义利用消灭病原微生物蛋白质制剂的保存保护体内蛋白质避免变性的可逆性可逆变性：除去变性因素

2、，蛋白质空间结构可以恢复原状。不可逆变性：除去变性因素，蛋白质空间结构不能恢复原状。一般轻度变性是可逆，过度变性是不可逆。蛋白质的变性蛋白质的沉淀破坏蛋白质的水化层和电荷，使蛋白质从溶液中析出的现象基本概念蛋白质沉淀是一种现象维持蛋白溶液稳定的因素：疏水领域颗粒表面水化膜胶粒表面同种电荷蛋白质的沉淀可逆沉淀不可逆沉淀结构和性质都不变适当条件下可重新溶解是分离和纯化的基本方法结构和性质都发生变化沉淀不再溶解于水蛋白质的沉淀与变性变性蛋白易于沉淀沉淀蛋白不一定变性蛋白质的凝固接近于等电点附近的蛋白质溶液加热，可使蛋白质发生凝固基本概念不

3、可逆变性状态蛋白质的凝固临床应用实例水/无机盐/尿素水/无机盐/尿素/蛋白质蛋白质变性凝固加热醋酸法变性、沉淀、凝固之间关系变性属于蛋白质本质的变化，沉淀和凝固属于一种现象变性不一定沉淀，变性蛋白质只在等电点附近才沉淀，沉淀的变性蛋白质也不一定凝固注意事项逐滴加入，仔细观察酒精灯使用前注意酒精量的多少，加热时试管口不可对人，不用时熄灭酒精灯加热时，要进行晃动,避免局部高温,引起试管炸裂用过的枪头、滤纸放于污物缸苦味酸属危险试剂用过的试管仔细清洗老年痴呆者脑血管中产生大量难溶性蛋白的诱因讨论：蛋白变性与疾病思考题蛋白质变性、沉淀和凝固

4、可在细胞、组织的哪些生命过程中出现？试举例与哪些疾病（或病变）的发生相关？