自体富血小板纤维蛋白促进兔耳创面愈合的研究

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1、自体富血小板纤维蛋白促进兔耳创面愈合的研究叶涛1翟志豪1崔冬2易成刚2（通讯作者）（1第四军医大学学员旅七队陕西西安710032）（2第四军医大学西京医院整形外科陕西西安710032）【摘要】目的观察自体富血小板纤维蛋白（PRF）促进兔耳皮肤创面愈合的效果。方法制备兔耳创面，随机分为实验组（创面敷PRF）和对照组（普通换药），术后通过大体观察，计算创面面积和组织学切片来观察伤口愈合情况。结果术后实验组创面的缩小速度明显高于对照组，更快愈合。结论自体富血小板纤维蛋白可以明显地促进兔耳皮肤创面的愈合。【关键词】自体富血小板纤维蛋白创面愈合【中图分类号

2、】R965【文献标识码】A【文章编号】2095-1752（2013）21-0190-02创面愈合一直是外科研究的重点内容，大量硏究证实，生长因子能促进创面愈合，临床上也有动物源性的牛长因子应用（如贝复济），但创面愈合需要多种牛长因子的参与，而且临床上缺乏更安全的人源性的牛长因子。最近发现富血小板纤维蛋白（PRF）能非常容易从自体血中提取，而且能释放多种牛长因子⑴，如果能促进创面的愈合，将有利的促进其临床应用。本实验拟以兔耳皮肤创面愈合模型，探讨PRF促进创面愈合的效果。1.材料与方法材料：清洁级健康成年大白兔16只，雌雄不限，由第四军医大学实验动

3、物中心提供。方法：PRF的制备：制作过程需全程无菌，大白兔麻醉后，套管针耳中动脉取血10毫升，快速放入离心管中，即刻以3000r/min离心10mino静置后，血液样木分为3层，上层淡黄色澄清液体为贫血小板血浆（plateletpoorplasma.PPP）,下层红色疏松胶冻状物为红细胞碎片，中层淡黄色凝胶即PRF凝胶。弃上清，去除凝胶状物底部的红细胞部分，获得初级PRF凝胶，用无菌纱布吸附初级PRF中的血清，同时经挤压塑性制备出具有一定形态、弹性及韧性的PRF膜。造模分组处理方法：以2.5%的戊巴比妥钠(20-30mg/Kg)进行耳缘静脉麻醉，

4、褪毛备皮后，常规消毒铺无菌巾，在兔子的两侧耳朵均别做4个直径为lcm的创面，上下左右相隔lcm,深达软骨层，保留软骨膜。随机选取一个耳朵为实验组，实验组创面数为64个，创面部位敷以富血小板纤维蛋白。另一只耳朵为对照组，对照组创面数为64个，只做普通消毒换药处理。各个创面均再覆盖一层油纱，做整只耳朵的包扎，防止PRF脱落和创面感染。大体观察：观察伤口愈合时间，皮肤性状。组织学观察：在第5,10,15,20天分别处死4只兔子，取兔耳全层组织，包括创面及周围0.5厘米的正常组织。所取标本经10%的中性甲醛溶液固定，在经苏木精•伊红染色，在镜下观察皮肤生

5、长情况。统计学分析：统计结果用SPSS13.0统计学软件进行t检验分析。2.结果大体形态观察：术后第5天，实验组的渗出物明显少于对照组。术后5-20天，各个创面逐渐缩小，实验组创面的缩小速度明显快于对照组，愈合吋间更短。实验组创面愈合时间为7.5±0.8天，对照组创面愈合时间为11.4±1.4天，两组有统计学意义(P<0.01)组织学观察：术后第5天，两组差异不明显，术后第15天和20天观察，实验组创面处的新生皮肤较对照组更成熟，毛细血管密度更高。3•讨论2001年，JChoukroun等首次提出了富血小板纤维蛋

6、白(platelet一richfibrin,PRF)的概念，被视为富血小板血浆后的第二代血小板浓缩物⑴。PRF是通过自体外周血一次离心获取的富含白细胞和血小板纤维蛋白的生物材料。其优点是完全为自体血，无须添加任何生物制剂，并且具有更优良的机械性能。Simonpieri等[2]认为，PRF不同于其他血小板浓缩物，其有逐步释放多种细胞因子的生物特性，这种浓缩血小板的新方法为生物技术的应用开辟了新的领域。Su等[3]对PRF释放的主要生长因子进行了量化。PRF所释放PDGF—AB、TGF—pl、VEGF和EGF几种生长因子在制备完成的60min内逐渐增

7、加在120—300min内迅速释放。与之相比，IGF・1的含量在整个试验过程中始终保持恒定，这与Zimmermann等⑷的研究结果相同，建议PRF最好在制备完成：lh内置于伤口，以最大限度地发挥作用。富血小板纤维蛋白的应用，在局部为创面提供了多种高浓度且持续的生长因子，刺激了细胞的增值与分化，收缩创面，促进愈合。在本实验中，实验组在第5,10,15天，皮肤愈合速度明显快于对照组，这些恰恰证明了PRF中的多种生长因子的促进愈合的作用。另外，通过组织学切片，在各个观察点分析后，PRF修复的创面，毛细血管增生较多，新生皮肤更加成熟。这-点也证明了源于自

8、身的PRF对于创面的愈合有明显的促进作用。总之，PRF的制备方法简单，成本低廉，来源自体，安全可靠，本实验已经证实其对于创面愈合有明显的