7未知病原菌的分离鉴定

《7未知病原菌的分离鉴定》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。

1、未知病原菌的分离鉴定病原菌检测程序药物敏感试验标本直接涂片、染色、镜检分离、鉴定生化试验(书p17-18)血清学试验(玻片凝集法)动物试验(产毒性、分离)初步诊断分子生物学技术(核酸杂交、PCR、基因芯片核酸)其他检测技术观察培养特征、形态特征病原菌抗原检测形态结构临床标本中未知病原性球菌的分离鉴定程序临床标本直接涂片、革兰染色、镜检(形态,排列,染色性)血琼脂平板/巧克力血琼脂平板(菌落性状,溶血性,色素)可疑菌落涂片,染色,镜检纯培养生化反应致病性测定药敏试验思考：如何从脓拭子、咽拭子中分离并鉴定病原性球菌？查病原标本脓血便、肛拭子选择/鉴别培基生化反应血清学鉴定双糖发酵,橘橼酸盐利用试验

2、,尿素,靛基质试验……玻片凝集试验SS平板,中国兰,EMB未知肠道杆菌的分离鉴定程序伊红美蓝平板---EMBEosin-methyleneblueagar,EMB克氏双糖铁试验Doublesugarironslant枸橼酸盐利用试验Citrateslant吲哚试验Indolebroth玻片凝集一、材料：5人/组1.待检标本：脓拭子、咽拭子、尿液标本、肛拭子1#、肛拭子2#2.培养基：血平板3块/组EMB平板3块/组克氏双糖铁斜面3支/组动力-靛基质-尿素半固体3支/组3.其他：革兰染液、玻片、10%胆盐、靛基质试剂、NS、兔血浆、3%H2O2、沙门氏菌多价血清、志贺氏菌多价血清二、方法(实验程

3、序)三、结果四、讨论设计性实验临床标本中病原菌的分离与鉴定实验目的熟悉临床标本中常见病原菌的分离鉴定程序学习脓汁、痰、粪便、尿液等临床标本的检查方法实验要求针对病例，对临床标本中的病原菌进行分离和鉴定实验前制定方案，实验后写出实验报告实验分组5人/组1套标本/组（脓汁、痰、尿液、粪便）进程安排实验分3次进行实验材料脓汁标本：脓拭子培养基：血琼脂平板其他：3%H2O2、兔血浆、生理盐水、革兰染液、玻片等脓拭子分离培养（血平板）革兰染色革兰染色触酶实验血浆凝固酶实验实验方案第1次课第2次课实验操作与观察触酶实验+-触酶实验：挑取菌落置玻片上；滴加1～2滴3%H2O2，观察结果；实验操作与结果血浆凝

4、固酶实验+-凝固酶实验：取生理盐水于玻片上，挑取待检菌置于生理盐水中，制成菌悬液，观察有无自凝现象。向菌悬液中加1滴兔血浆并混合，观察结果。实验材料痰标本：咽拭子培养基：血琼脂平板其他：生理盐水、10%胆盐、Optochin纸片、革兰染液、玻片等咽拭子革兰染色革兰染色荚膜染色胆汁溶菌实验奥普托辛实验分离培养（血平板）实验方案第1次第2次第3次观察奥普托辛实验结果实验操作奥普托辛实验：挑取菌落涂于血平板上，将optochin纸片贴于接种处；37℃培养18～24小时，观察结果。胆汁溶菌实验（平板法）：在血平板上标记单个菌落直接在菌落上加一接种环去氧胆酸纳溶液将平板37℃孵育20～30分钟，观察结果

5、实验操作荚膜染色：石炭酸复红单染1.涂片、自然干燥、火焰固定；2.1滴石炭酸复红，立即冲去，镜下观察。实验操作实验材料尿标本：尿液培养基：EMB平板克氏双糖铁斜面培养基动力-靛基质-尿素半固体琼脂培养基其他：革兰染液、靛基质试剂、玻片等尿液离心沉淀1500转，10分钟分离培养（EMB平板）革兰染色革兰染色克氏双糖铁斜面培养基动力-靛基质-尿素半固体琼脂培养基观察结果观察结果完成靛基质试验实验方案第1次第2次第3次实验材料粪便标本：肛拭子（1#、2#）培养基：EMB平板克氏双糖铁斜面培养基动力-靛基质-尿素半固体琼脂培养基其他：生理盐水、靛基质试剂、沙门菌多价血清、志贺菌多价血清、玻片等肛门拭子

6、1、2EMB平板克氏双糖铁斜面培养基动力-靛基质-尿素半固体琼脂培养基观察结果观察结果完成靛基质试验玻片凝集试验实验方案第1次第2次第3次讨论内容针对实验步骤的讨论；对结果的分析；还需要进一步做哪些实验；此次实验成功或需要改进的地方；其他预习：肥达反应实验报告临床标本中病原菌的分离与鉴定班级________组别_________姓名_________学号_________日期________材料1.待检标本：2.培养基：3.其他：方法结果讨论（包括对结果的分析、结论以及尚需追加实验等）肥达试验(Widaltest)用已知的伤寒沙门菌O、H抗原、甲型副伤寒沙门菌、肖氏、希氏沙门菌H抗原的诊断菌液

7、，与患者血清作定量凝集试验，检测患者血清中的相应抗体，辅助诊断伤寒、副伤寒。GeorgesWidalin1896(French)Widaltest正常值：诊断伤寒：O凝集效价>1:80,H凝集效价>1:160;诊断副伤寒：O凝集效价>1:80,H凝集效价>1:80才有诊断价值.动态观察：抗体效价随病程延长而上升；双份血清升高4倍或以上；O与H抗体的诊断意义：O↑，H↑---肠热症(伤寒或副伤寒)的