实验十标本中未知细菌的分离和鉴定.ppt

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1、实验十标本中未知细菌的分离和鉴定致病菌的检验程序和常用项目药物敏感试验标本直接涂片染色镜检分离培养形态特征生化试验血清学试验动物实验明确诊断初步诊断血清学诊断细菌的快速鉴定形态学检查（常规培养或特殊培养）（沉淀反应、凝集试验、免疫标记技术等）(微生物数字编码分类鉴定法、血培养自动化检测系统、核酸杂交技术、PCR技术、DNA芯片技术等）一、标本中未知病原性球菌的分离和鉴定（一）实验目的1、掌握脓汁标本中常见病原菌分离和鉴定方法2、掌握药物敏感试验（二）实验器材1、待检的脓汁标本；2、培养基：血琼脂平板，生化反应管；普通琼脂平板；3、试剂：革兰染色液，

2、生理盐水；药敏纸片，3%过氧化氢；4、其它：接种环、接种针、酒精灯、培养箱、显微镜、载玻片等直接涂片染色镜检：观察细菌形态、排列、染色性观察菌落性状、溶血性、色素血琼脂平板涂片、染色、镜检挑取可疑菌落生化反应测定纯培养致病性测定（凝固酶、耐热核酸酶）标本血液脑脊液肉汤增菌培养涂片染色镜检（三）实验方法与检验流程脓拭子分离培养（血平板）直接涂片革兰染色革兰染色触酶试验甘露醇试验药敏试验纯培养（三）实验方法与检验流程生化反应革兰染色的操作步骤涂片制作染色镜检革兰染色的操作步骤初染媒染脱色复染结晶紫1分钟卢戈氏碘液1分钟95%酒精30秒稀释复红30秒（+）

3、（—）甘露醇发酵试验1.触酶试验：区别葡萄球菌与链球菌；2.甘露醇分解试验：区别葡萄球菌的致病菌株与非致病菌，致病菌分解甘露醇产酸,使培养基由紫色变黄色.(-)(+)脓汁标本的生化反应二、标本中未知肠道感染细菌的分离和鉴定（一）实验目的1、掌握肠道杆菌分离和鉴定的一般步骤2、熟悉肠道杆菌鉴定生化反应和血清学反应（二）实验器材1、待检的粪便标本；2、培养基：SS平板，生化反应管；普通琼脂平板；3、试剂：革兰染色液，生理盐水；药敏纸片；沙门菌、志贺菌多价诊断血清；4、其它：接种环、接种针、酒精灯、培养箱、显微镜、载玻片等。药敏试验粪便标本SS平板克氏双

4、糖铁斜面培养基生化反应管观察结果玻片凝集试验（三）实验方法与检验流程纯培养革兰染色肠道杆菌五管糖试验菌名葡萄糖乳糖麦芽糖甘乳糖蔗糖大肠埃希菌⊕⊕＋＋＋/－志贺菌＋－＋/－＋－沙门菌＋－＋＋－变形杆菌⊕－＋/－－＋/－肠道杆菌的血清学试验（玻片凝集试验）材料1.菌种：伤寒杆菌培养物、痢疾杆菌培养物2.伤寒杆菌的诊断血清，志贺菌诊断血清、载玻片、生理盐水方法血清生理盐水肠道杆菌生化反应的结果葡萄糖乳糖动力H2S尿素⊕⊕±－－埃希菌属非致病菌⊕＋－－－克雷伯菌属⊕±＋＋＋变形杆菌⊕－＋＋－乙型副伤寒致病菌⊕－＋±－甲型副伤寒＋－＋＋－伤寒杆菌＋－－－－痢疾

5、杆菌