dn03-中量全血基因组dna提取试剂盒

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1、http://www.blkwbio.comhttp://www.blkwbio.com问题评论与建议*加入蛋白沉淀液前，裂解混合物没有冷却回室温-建议：冷却至室温北京博凌科为生物科技有限公司未见到蛋白沉或者冰上放置5分钟后再加入蛋白沉淀液。BeijingBolingKeweiBiotechnologyCo,Ltd淀*蛋白沉淀液没有和裂解混合物充分混匀-建议：应该连续高速涡旋振荡混匀25秒，涡旋并不会剪切断DNA。*污染有蛋白质-建议：看看上述“未见到蛋白沉淀”问题的评论与建议，确保蛋白通过沉淀去除。另外请参见步骤10，防止蛋白污染。A260/A280<1.6*测

2、定吸光值时用水稀释DNA会降低A260/A280-建议：使用TE缓冲液来稀释DNA,保证pH值大于8.0。◆中量全血基因组DNA提取试剂盒*晾干DNA沉淀时过度了-建议：晾干时密切观察，不要干燥过头，◆目录号DN03注意应该观察管底的DNA沉淀，有时候管壁上的残留乙醇已经挥DNA沉淀难以发，但留下一些水分还没有干，只要管底DNA干了就可以加入DNA◆使用手册重新溶解水化溶解液。可在65℃温育帮助重新溶解（不要超过一小时）然后室温◆实验室使用，仅用于体外或者4℃放置过夜，期间可以颠倒轻弹帮助溶解。下游酶切切不*DNA未干燥完全，残留乙醇太多-建议：敞开离心管口，在6

3、5℃温开育几分钟，让乙醇挥发。电话：010-5715860252872342传真：010-57158602网址：http://www.blkwbio.com【博凌科为】TEL：010-57158602;52872342E-mail：blkwbio@blkkwbio.com-7-http://www.blkwbio.comhttp://www.blkwbio.com中量全血基因组DNA提取试剂盒问题与解决方法问题评论与建议目录号：DN03标本中*不恰当的存放标本，未充分混匀，未使用合适的抗凝剂-建议：丢弃目录编号包装单位含有血凝块有血凝块的标本，重新用EDTA,肝

4、素，柠檬酸抗凝剂收集血液。DN030120次×3ml*血液标本裂解前没有回复到室温-建议：处理前先把血液标本回复到室温。DN030250次×3ml红细胞裂解*裂解时间不够-建议：可延长裂解时间至15分钟以上。不完全*没有充分混匀-建议：裂解过程中可以更多次颠倒混匀，或者轻弹管壁帮助裂解。适用范围：*血液标本中本身含有的白细胞数量低-建议：增加起始血液处理量。适用于快速提取各种动物全血基因组DNA*白细胞裂解不完全-建议：仔细阅读步骤6的操作要领。加入裂解液之前，必须剧烈涡旋振荡，打散重悬白细胞沉淀团块，否则很难裂试剂盒组成、储存、稳定性：解完全。如果是肝素抗凝

5、的血样，白细胞团块很难打散，加入裂解液后应该在65℃温育帮助裂解直到看不见细胞团块。白细胞数量太试剂盒组成保存20次×3ml50次×3mlDNA产量低大超出裂解能力，适当增加细胞核裂解液体积。10×红细胞裂解液室温20ml45ml*血液标本存放时间太长-建议：存放在4℃的血液标本超过5天的产量可能大大降低，因此不要存放太久。细胞核裂解液室温60ml150ml*DNA沉淀在洗涤的时候丢失了-建议：异丙醇沉淀后用乙醇洗涤的蛋白沉淀液室温20ml50ml过程中，倒弃上清的时候要格外小心，不要把DNA沉淀也倒掉了。DNA溶解液室温10ml20ml*血液样品太老或者不正确的

6、存放，造成DNA降解-建议：选用新鲜本试剂盒在室温储存18个月不影响使用效果。DNA长度的血液样品。。小于20kb*操作不当，造成对基因组DNA的剪切-建议：混匀轻柔，不可以用手剧烈振荡离心管，选用大口径的枪头转移或者混匀DNA。【博凌科为】TEL：010-57158602;52872342E-mail：blkwbio@blkkwbio.com【博凌科为】TEL：010-57158602;52872342E-mail：blkwbio@blkkwbio.com-1--6-http://www.blkwbio.comhttp://www.blkwbio.com12.2

7、,000xg离心3分钟，在管底可以见到白色的DNA沉淀块，倒弃上清。储存事项:13.加入3ml70％乙醇，颠倒几次漂洗DNA沉淀，2,000xg离心1分钟,倒去上清1.环境温度低时细胞核裂解液中某些去污剂成份会析出出现浑浊或者沉淀，可在（沉淀很松，注意不要把DNA沉淀倒掉了），倒置后在吸水纸上轻敲几下以控干37℃水浴加热几分钟，即可恢复澄清，不要剧烈摇晃，以免形成过量的泡沫。残留乙醇，还可以用枪头小心吸掉管底沉淀周围和管壁的残留乙醇，空气晾干沉淀几分钟。2.蛋白沉淀液可能出现析出和沉淀，可以在37℃水浴几分钟帮助重新溶解，如果不注意不要干燥过头，否则DNA极其难溶

8、；也不能残