临床样品基因组DNA提取试剂盒

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1、Bi/^w舵金傅疲糾&丈冷糾孜勺酿公司BeijingBLKWBiotechnologyCo,Ltd.Tel:010-57158602/52872342/80773165(Faz)Http:/7wivw.blkwbic.comiE-mailblkwbtakwbio.com♦微量/临床样品基因组DMA快速提取试剂盒♦目录号1425♦使用手•册实验室使用，仅用于体外微量临床样品妹因组DNA快速提取试剂盒目录号：1425目录编号包装单位14250150次适合于从微量血液.法医材料.干血点.药签等微量样品中分离纯化基因mDNAo

2、❖试剂盒组成、储存、稳定性：试剂盒纽•成保存50次裂解液ML室温11ml结合液CB室温15ml抑制物去除液1R室温25ml漂洗液WB室温10mlCarrierRNA-2CTC第一次使用前按说明加指定量乙醉310帕洗脱缓冲液EB室温10ml蛋口酶K粉（可选）20mg/rnl-2o°c20nig吸附柱AC和收集管室温50套本试剂盒在室温储存12个月不影响使用效果储存事项:1.结合液CB或者抑制物去除液IR低温时可能出现析出和沉淀，可以在37°C水浴儿分钟帮助重新溶解，恢复澄清透明后冷却到室温即可使用。2.为避免降低活性，方

3、便运输，提供蛋白酶K为冻干粉状，收到后，可短暂离心后，加入1毫升灭菌水溶解。因为反复冻融可能会降低酶活性，因此溶解后立即按照毎次使用量（20微升）分装冻存，一20°C保存。3.CarrierRNA收到时为冻T•粉状，使用前按照注意事项4配制和储存。4.避免试剂长时间暴霽于空气中发生挥发、氧化、pH值变化，各溶液使用后应及时盖紧盖子。仔细阅读注意事项4。❖产品介绍：木试剂盒采用特制的进口DNA吸附柱和独特的缓冲液系统，特別适仑于从微最血液、法医材料、干血点、约签、口香糖、尿液等微量样品中分离纯化基因组DNA。各种来源样品

4、裂解消化处理后DNA在岛离序盐状态下选择性吸附于离心柱内硅基质膜（特别配备了CarrierRNA可以从体系中轻松捕获微量核酸），再通过系列快速的漂洗一离心的步骤，将盐、细胞代谢物、蛋白等杂质去除，最后低盐的洗脱缓冲液将纯净的基因组DNA从硅基质膜上洗脱。纯化后的DNA无杂质和PCR抑制剂，可15接适用于PCR分析。❖产品特点：1.不需要使用有毒的苯酚等试剂，也不需要乙醇沉淀等步骤。2.节省时间，简捷，单个样品操作一般可在20分钟内完成。3.配备了CarrierRNA用于充分收集特別微量DNA。4.多次柱漂洗确保高纯度，

5、提取的DNA纯度高，质量稳定可靠，可适用于各种常规操作，包括PCR、酶切、测序、Southern杂交等。・:・注意事项：1.所有的离心步骤均在室温完成，使用转速可以达到13,000rpm的传统台式离心机，如Eppendorf5415C或者类似离心机。2.开始实验前将需要的水浴先预热到所需温度备川。部分样品需要准备lMDTTo3.结合液CB和抑制物去除液IR屮含冇刺激性化合物，操作时戴乳胶手套，避免沾染皮肤、眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时，耍用大量淸水或者生理盐水冲洗。4.CarrierRNA:1）CarrierRNA收

6、到时为冻T•状，使用时加入310plRNasefree水充分溶解，配制成lpg/pl溶液。CarrierRNA溶液应避免反复冻融，冻融次数不能超过3次。所以建议在第一次使用时按自己毎次的用量分装在RNase-free的离心管中后置于一20°C储存。2）CarrierRNA使用方法：如果起始处理量很少（例如小T10pl全血和法页样品），我们推荐使用CarrierRNA,如果预期冇较人量DNA产量，用户叮以根据需要选择是否加入CarrierRNAo使用时在每个样品捉取所需结介液CB屮加入lplCarrierRNA储存溶液，

7、将结介液CB与CarrierRNA溶液充分颠倒混匀即町（结介液CB容易起泡沫，请勿使用涡旋振荡混匀）。也可根据样品数量，在总共需要的结合液CB中加入总共需要的CarrierRNA混匀备用。混合液在室温24小时内稳定。3）CarrierRNA加入过多造成DNA洗脱液中CarrierRNA浓度过髙，下游PCR反应可能受干扰，加入过少可能并不能帮助提高DNA产量和PCR敏感度，因此加入量应该在具体试验中调整以得到最佳效果。4）由于CarrierRNA本身是小核酸，所以得到的基因组测定OD260值会比真实值偏人，建议将得到的基

8、因组直接用PCR进行检测。❖操作步骤：(实验前请先阅读注意事项)提示：第一次使用前请先在15ml漂洗液WB中加入60ml无水乙醇，充分混匀，加入厉请及时在方框打钩标记已加入乙醇，以免多次加入！1.血液样品a.取1-100^1血液到1.5ml的离心管中。b.如果不足100^1,加入裂解液ML补足到100pLc.加入10pl的蛋白酶K