海蜇酶解多肽抗前列腺癌作用研究 【开题报告+文献综述+毕业论文】

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1、本科毕业论文开题报告药学海蜇酶解多肽抗前列腺癌作用研究一、综述本课题国内外研究动态，说明选题的依据和意义海洋是地球上潜力最大的资源库，它不仅能提供人类所需的优质蛋白质，还含有丰富的生物活性物质，是解决人类所面临的食物、资源和环境三大难题的最佳出处。海洋生物技术通过遗传操作和克隆技术不仅可以为水产养殖创造和提供优质、高产、抗逆新品种，而且还可以提供有机体用来生产天然产物或者用于生物修复改良海洋环境。海洋生物技术涉及到海洋生物的分子生物学、细胞生物学、发育生物学、生殖生物学、遗传学、生物化学、微生物学，以及生物多样性和海洋生态学等知识和内容。海洋生

2、物技术的发展对推动海洋生物资源的开发和利用，为人类的生存和发展提供更广阔的空间和美好的前景。生物活性肽是具有优化机体代谢环境、有益于机体健康的一类活性多肽。这类多肽的活性功能依赖于其分子量大小和氨基酸组成成份及排列顺序，它们通常作用于机体的消化系统、心血管系统、免疫系统和神经系统等多种生命代谢系统，最终起到提高机体免疫力、减少慢性疾病发生的作用。饮食当中的生物活性肽常常以非活性状态存在于蛋白质的氨基酸序列中，通常以3种方式从宿主蛋白质中释放出来发挥活性功能，即肠道消化酶的消化作用、微生物的蛋白水解作用和外源性动植物以及微生物蛋白酶的水解作用。根

3、据文献报道，生物活性肽一般由2到20个氨基酸残基组成，一种活性肽可以同时表现出多种活性功能。如今酶解蛋白来源正从陆地生物向海洋生物转变，多种海洋生物蛋白被酶解，提取出了具有抗氧化、抗肿瘤、降血压、抗凝血等多种生物活性功能的多肽。目前，从海洋中获得的抗肿瘤活性肽大多以天然存在于生物体内的活性肽为主，其宿主来源主要集中在海绵、海鞘、海藻、海兔、芋螺、海葵等生物中。前列腺癌是欧美男性泌尿系统最常见的恶性肿瘤,占男性癌症死亡率的第2位,仅次于肺癌。据估计,2006年美国将新增234460例前列腺癌患者,而2005年就有27350例死于该病。我国前列腺癌

4、发病率虽低于欧美国家,但呈显著增长的趋势。我国PCa发病率较低，但近年来随着人口老龄化，PCa的发病率正呈现逐年增长态势，越来越受到医学界的重视。目前，我国PCa在男性泌尿、生殖系统恶性肿瘤中发病率跃居第三位。由于PCa癌症患者长期化疗损害重要脏器，且会产生肿瘤耐药性，影响化疗效果，在预防和治疗上还没有更好的方法和手段。因此，PCa正影响着我国50岁以上男性的生活质量和寿命，已成为泌尿外科领域一个越来越重要的研究课题。所以能找到一种特定靶位的高效、低毒、特异性强的新型抗肿瘤药尤为重要。海蜇(Rhopilemaesculentum)俗称“鮓鱼”，

5、隶属于腔肠动物门(Coelentera)、钵水母纲(Scyphozoa)、根口水母目(Rhizostomeae)、根口水母科(Rhizostomatidae)，海蜇属(Rhopilema)的无缘膜动物。海蜇的蛋白占其干重的50％，其氨基酸成分种类齐全，必须氨基酸含量丰富。海蜇等海洋生物为了适应高盐、高压、低温、缺氧等极端的海洋生境，其蛋白质的氨基酸组成或序列都与陆地生物蛋白有很大的不同，在种类和数量上也远远超过陆地蛋白资源。在种类繁多的海洋蛋白氨基酸序列中，潜在着许多具有生物活性的氨基酸序列，用特异的蛋白酶水解，就能释放出有活性的肽段。目前已从

6、海绵、海鞘、海兔、海藻、海苔虫、鲨鱼、珊瑚以及海洋微生物中分离出2万余种天然产物,其中不少化合物显示出明显的抗肿瘤活性,一些化合物已被作为抗肿瘤候选药物进入了临床前或临床研究阶段。但海蜇抗肿瘤活性肽的研究尚处于空白，对其深加工技术与理论也甚少有研究。因此，本项目拟利用浙江沿海丰富的水产品资源，运用蛋白质提取及纯化工艺，对海蜇蛋白进行深度开发和利用，生产出具有特殊功能的活性肽产品，不仅可以满足人们强身健体的需要，而且可以产生巨大的经济效益，对于浙江海洋经济发展将起到积极的推动作用，也会对海蜇的高值化加工起到示范作用。因此，研究海蛰多肽的提取纯化工

7、艺以及抗前列腺癌的活性功能，对海洋药物的开发利用具有重大意义，对新型的高效、低毒的抗癌药物的开发也具有很大的意义。二、研究的基本内容，拟解决的主要问题：1研究的主要内容分离纯化部分：通过超滤法、SephadexG-15凝胶层析等技术分离纯化酶解多肽。酶解多肽抗肿瘤作用：选用MTT法和双标记流式细胞术，研究酶解多肽不同作用浓度对PCa细胞增殖率及凋亡率的（IR）影响。IR=[(对照组A值-加药组A值)/对照组A值]×100%2研究解决的主要问题2.1海蛰酶解最佳条件的确定。2.2抗前列腺酶解多肽的分离纯化。2.3对前列腺癌细胞作用活性的研究三、研

8、究步骤、方法及措施：1海蜇多肽的提取及纯化适量海蜇，捣碎机捣碎，用最佳酶解酶碱性蛋白酶水解，酶解条件为温度为55℃，料水比为1:2，加酶量为1000U