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《实验12薯蓣中薯蓣皂苷元的提取、精制和检识》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。
1、实验12薯锁中薯筋皂昔元的提取、精制和检识一、实验目的与要求1.掌握穿龙薯预（或山弟解）中薯预皂莒的提取和精制方法。2.熟悉薯祯皂昔及皂昔元的性质和检识方法。二、基本原理穿山龙（DioscoreanipponicaMak.）根中含翳撷皂井[dioscinC45H72O16；Mp.288°C,[甸厂95°]等多种笛体皂背。根中还含有少量25-D-界螺當-3,5-二烯（25-Dspirosta-3,5-diene,即去氧-A3,5-替告皂背元）。薯损皂昔元的理化性质:白色结晶,Mp.204-207°C（丙酮）或202-204
2、°C,[a]o25-129°（c1.4,CHCL）;不溶于水,可溶于一般有机溶剂和醋酸。UV（H2SO4）九334（3.86）,412（4.11）,512（3.52）。薯预皂背元在植物体内与衙萄糖、鼠李糖结合成多种薯领皂芹，经酸水解成薯预皂芹元[diosgenin,CT仏0訂和单糖。因薯预皂昔元不溶于水，保留于植物残渣中，故可用冇机溶剂直接从植物残渣中提取。本实验是以穿龙蒋菽为原料，加入硫酸进行煮沸，以水解薯预皂昔为蒋菽皂苜元，将水解原料加以干燥后，再用石汕醸，连续回流提取轉撷皂卄元。glc^^^lc—2344rharh
3、arhaglc—rha三*仪器与试剂L仪器研钵，烧杯，硅胶薄层板，滤纸，抽滤装置，紫外灯，层析缸等2样品与试剂穿龙薯锁（粗粉或饮片），硫酸，石汕瞇（60-90°C）,氯仿，甲醇，冰醋酸,醋酹,苯,乙酸乙酯,乙醇,活性炭,2%血红细胞悬浮液四、实验内容与步骤L薯领皂昔元的提取制备方法一取穿山龙25g,切成碎片，置500讥圆底烧瓶屮，加8%酸水（水：浓硫酸230/20,V/V）,然后于石棉网上加热回流6h（开始时用小火，防泡沫冲出）倒去酸水，用水洗涤两次,然后将药渣倒在研钵内,加固体N&CCh粉研磨,调pH至中性,水洗,过滤
4、,滤渣研碎,低温十燥（不超过80°C）。将该十燥滤渣装入滤纸筒后置索氏提取器中，丿IJ石油醛（沸程60-90°C）300niL,在水浴上回流提取3h,提取液经常压回收（水浴上）石汕瞇至约10〜15niL吋停止，用吸管转入50niL锥形瓶中，冷却，析出结晶，抽滤，固体用少量石油瞇洗涤二次，抽滤即得蒋预皂卄元粗品，粗品用20-30mL95%乙醇加热溶解（色深时可加1-2%活性炭脱色）。抽滤，滤液放直，析出结晶。滤集结晶。烘T，测定熔点204-207七。方法二称取穿龙薯预粗粉或饮片50g,加水250mL,水浴上保温35°C放置
5、过夜，次FI加浓硫酸201血混合均匀，室温放迸过夜浸泡，再于直火卜-煮沸，控制微沸状态4-6小时,随时补充损失的水分，直到瓶内药材变为暗褐色后停止加热，倾泻除去酸水，再用清水漂洗至水洗液呈屮性⑴，用纱布（双层）包好水解药材，尽量挤出多余的水分，然后将药渣摊于櫥瓷盘中，置于100°C烘箱中鼓风十燥，待完全烘干后取出，压碎成粗粉；装于特制的滤纸筒内，以精棉封堵筒口。将滤纸筒置于脂肪提取器屮，连接蒸懈瓶和冷凝管，由上端加入石油醛(30-60°C)150-200mLo在沸水浴⑵上连续回流提取6-8小时。将连续回流得到的石油瞇提取
6、液，蒸僻回收石油瞇至剩余约20mL,倒入小烧杯中，密盖，置于冰箱中析品。待结晶全部析出后，滤集结晶，晾干，得白色粗制薯議皂昔元。2薯预皂廿元精制将上述所得翳锁皂昔元粗制品，置于小圆底烧瓶中，加约50mL甲醇后于沸水浴上加热回流至完全溶解，取下放冷，加活性炭约0.6g,继续回流半小时，乘热迅速抽滤，滤液冷至室温后再放冰箱中析晶，滤集，得白色精制薯祯皂苛元，干燥，称重，计算提取率。3检识反应a.泡沫试验収供试样5mL于1大试管中，紧塞试管口后猛力振摇，试管内液体则产生大量似肥皂样泡沫，长时间亦不消失。b.溶血试验取2%血细胞
7、悬浮液1mL,加生理盐水8mL,再加上述供试液1mL,混合均匀后放置，几分钟內则溶液由红色混浊变为红色透明(产生溶血现彖)。c.醋酎■硫酸反应取实验产品少许，置试管屮，加冰醋酸().5mL溶解，又加醋().5mL搅匀，再加浓硫酸1滴于溶液的边缘上，液体则出现紫红色，最后变成污绿色。d.氯仿■浓硫酸反应取实验产品少许，加氯仿1mL,浓硫酸1mL,混匀麻放置，氯仿层显红色或青色，硫酸层显绿色荧光。e.薄层检识层析材料：硅胶-CMC薄层板展开剂：苯:乙酸乙酯:(8：2)显色剂：1%磷钳酸溶液(喷泗后加热)显紫蓝色斑点。对照品：
8、1%薯殒皂廿元乙醇溶液供试1%实验产站乙醇溶液4薯濒皂廿元的红外光谱鉴别以薯预皂苻元为原料，作其红外光谱，并与标准图谱作对照。薯预皂芹元的红外光谱见图5-lo注释1.水解后的原料，应川水充分漂洗以除去余酸，直到水洗液呈中性为止。烘干水解原料时最好同时鼓风,以加快烘干速度，否则可因洗酸不彻底，烘干时间太久及受热不均而造
