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时间:2019-08-29
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1、第+—单元生物技术实践•复习讲义•第40讲微生物的利用[考纲要求]1.微生物的分离和培养。2.培养基对微生物的选择作用。3.某种微生物数量的测定。4.微生物在其他方而的应用。考点一微生物的实验室培养梳理知识要点(1)概念:人们按照微生物对营养物质的不同盂求,配制出供其牛长繁殖的营养基质。(2)营养组成:一般都含有水、碳源、氮源和无机盐。此外,还需要满足微生物生长对止、氧气以及特殊营养物质的要求。⑶种类①按照物理性质可分为邂培养基、固体培养基、半固体培养基。②按照成分的来源可分为天然培养基和龛成培养基。③按照功能用途
2、可分为选择培养基、鉴别培养基等。2.无菌技术(1)含义:在培养微生物的操作屮,所有防止杂菌污染的方法。(2)常用方法区别:能否杀死(2)纯化大肠杆菌的方法①平板划线法:通过接种环在琼脂固体培养基表而连续划线的操作,将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表而。特别提醒a.操作第一步即取菌种之前及每次划线之前都需要进行火焰灼烧灭菌,划线操作结束时,仍需灼烧接种环,每次灼烧目的如下表:第一次操作每次划线之前划线结束目的杀死接种环上原有的微生物杀死上次划线后接种环上残留的菌种,使下次划线的菌种直接来源于上次划线的末端,使每次划
3、线菌种数目减少杀死接种环上残存的菌种,避免细菌污染环境和感染操作者b.灼烧接种环,待其冷却后才能伸入菌液,以免温度太高杀死菌种。c.第二次及其以后的划线操作总是从上一次划线末端开始,能使细菌的数目随着划线次数的增加而逐渐减少,最终得到由单个细菌繁殖而来的菌落。d.划线时最后一区不要与第一区相连。e.划线用力大小要适当,防止用力过大将培养基划破。①稀释涂布平板法:将菌液进行一系列的梯度稀释,然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面,进行培养。稀标液稀肆液稀释液稀释液稀释液稀释液取少虽窗液(不超过O・lmL
4、)•滴加到培养基衣面将涂布器浸的烧杯中<用涂布器将悄液均匀地涂布在培养蘋农面涂布时町转动培养皿.便苗液分布均匀。将沾有少叶酒精的涂布器住火焰上引燃•待酒梢燃尽后•冷^18-10so⑶菌种的保存方法①对于频繁使用的菌种,可以采用临时保藏的方法。②对于需要长期保存的菌种,可以釆用甘油管藏的方法。♦诊断与思考1.判断常考语句,澄清易混易错(1)培养基一般都含有水、碳源、氮源和无机盐,有时还需要加入一些特殊的物质(V)(2)倒平板吋,应将打开的皿盖放到一边,以免培养基溅到皿盖上(X)(3)消毒的原则是既杀死材料表而的微生物
5、,乂减少消毒剂对细胞的伤害(V)(4)为了防止污染,接种环经火焰灭菌后应趁热快速挑取菌落(X)(5)用稀释涂布平板法纯化大肠杆菌时,只要稀释度足够高,就能在培养基表而形成单个菌落(V)2.分析命题热图,明确答题要点如图是采用纯化微牛•物培养的两种接种方法接种后培养的效果图,请思考:AB(1)获得图A效果和图B效果的接种方法分别是什么?提示获得效果A的接种方法为稀释涂布平板法,获得效果B的接种方法为平板划线法。(2)某同学在纯化土壤中的细菌时,发现培养基上的菌落连成了一片,最可能的原因是什么?应当怎样操作才可避免此种
6、现象?提示最可能的原因是菌液浓度过高或划线时在划下一区域前未将接种环灼烧灭菌;采取的措施是增大稀释倍数或每次划新区域前先将接种环灼烧灭菌。(3)接种操作为什么一定要在火焰附近进行?提示火焰附近存在着无菌区域。探究命题方向命题点一培养基及其制备方法分析1.下表为某培养基的配方,下列叙述正确的是()成分蛋白腺葡萄糖K2HPO
7、伊红美蓝蒸憎水含量log10g2g0.4g0.065g1OOOmLA.从物理性质看该培养基属于液体培养基,从用途看该培养基属于选择培养基B.该培养基中属于碳源的物质主要是葡萄糖,属于氮源的物质是蛋
8、白腺c.该培养基缺少提供生长因子的物质D.该培养基调节合适的pH后就对以接种使用答案B解析分析表中成分可知,该培养基中没有凝固剂,为液体培养基,该培养基的营养成分齐全,但存在伊红、美蓝等鉴别物质,属于鉴别培养基,A项错误;该培养基中的蛋白陈既是唯一的氮源,也是碳源,而葡萄糖是绝大多数生物最常利用的碳源,B项正确;该培养基中存在的无机盐和蛋白陈中的某些物质可以看作是生长因子,C项错误;培养基调节完pH还要进行灭菌等操作后才能使用,D项错误。1.高温淀粉酶在大规模工业生产中有很大的实用性。研究者从热泉中筛选出了能高效生
9、产高温淀粉酶的嗜热菌,其筛选过程如下图所示。请据图回答:/挑出苗落、JdI号培养基n号培养基酶活性鉴定9CQB8(1)I号培养基从物理状态来看,属于固体培养基,配制时耍加入作为凝固剂,从用途來看屈于选择培养基,应以作为唯一碳源。(2)配置固体培养基的基本步骤是()A.计算、称量、倒平板、溶化、灭菌B.计算、称量、溶化、倒平板、灭菌C.计算、称量、溶化、灭菌、
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