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时间:2017-11-29
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1、考马斯亮蓝(Bradford)法蛋白浓度测定试剂盒M2031产品说明书考马斯亮蓝(Bradford)法蛋白浓度测定试剂盒Coomassie(Bradford)ProteinAssayKit产品简介:Bradford法(考马斯亮蓝法),是目前灵敏度最高的蛋白质测定法之一。当Bradford染色液(考马斯亮蓝G250)和蛋白在酸性条件下结合时,溶液颜色由棕黑色转为蓝色,最大吸光值波长由456nm转至595nm,吸光值与蛋白质的含量在一定浓度范围内有较好的线性关系,通过测定吸光值大小并对照标准蛋白的吸光值,推算出蛋白浓
2、度,实现了蛋白浓度测定的快速,稳定和高灵敏度。Bradford染色液为2倍浓缩母液,便于储存。产品特点:快速,10-20个样品只需要10分钟即可完成测定。稳定,加样混匀后2分钟既可测定,1小时内吸光度变化不超过10%。最小测量体积为1-20uL,最低测量蛋白量为0.5ug。有常规和微量两种检测模式。不受绝大部分样品中的化学物质的影响。巯基乙醇的浓度可高达1M,二硫苏糖醇的浓度可高达5mM。但受略高浓度的表面活性剂影响,各种蛋白质与染料的结合效率可能有差异。经济实用:在微孔板中进行测定,可大大节约样品
3、和试剂用量。产品组成:产品组成M2031-1M2031-2规格250次微孔板法或50次比色皿法1000次微孔板法或200次比色皿法Albumin(BSA)蛋白标准0.5ml1.5ml(5mg/ml)Bradford2x染色液25ml100ml上海美季生物技术有限公司上海市中山南二路777号2号搂2303www.mbchemic.comMbchem™品牌为上海美季生物技术有限公司所有电话:86-021-51873168传真:86-021-51875086-800本产品仅供科学研究使用Thisproductisfor
4、researchuseonly.Notforhumanordiagnosticuse.考马斯亮蓝(Bradford)法蛋白浓度测定试剂盒M2031产品说明书保存温度:Bradford染色液2-8℃保存,BSA蛋白标准-20℃保存。有效期一年。操作步骤:一、常规测定A.96孔酶标板测定:1.根据需要从冰箱取出适量Bradford2x染色液,平衡至室温并混匀;预热酶标仪20分钟。2.根据需要取适量标准品,加入去离子水稀释至1mg/ml(原液5mg/ml),并混匀。注意:原则上蛋白样品在什么溶液中,标准品也宜用什么溶液
5、稀释。但是为了简便起见,也可以用去离子水、0.9%NaCl或PBS稀释标准品。稀释后的蛋白标准品也可以-20℃长期保存。以下步骤中均默认采用去离子水,可以根据条件选择使用稀释液。3.标准曲线绘制。取一块酶标板,按以下表格数据加入试剂:(此方案工作线性范围为100-1000ug/ml。)孔号ABCDEFGH蛋白标准(l)012346810去离子水(l)10099989796949290Bradford2x染色液(l)100100100100100100100100对应的蛋白含量(g)012346810最终体
6、积200ul4.振荡混匀后,室温放置5-10分钟。5.用酶标仪测定595nm处的吸光值,以不含BSA的光吸收值为空白对照。6.以蛋白含量(μg)为横坐标,吸光值为纵坐标,绘出标准曲线。7.样品测定:将待测蛋白样品用去离子水稀释至适当浓度,取10μl样品,加入100μl2xBradford染色液和90μl的去离子水,混匀后放置5-10分钟,然后以A号孔为对照,测定样品吸收值A595。上海美季生物技术有限公司上海市中山南二路777号2号搂2303www.mbchemic.comMbchem™品牌为上海美季生物技术有限
7、公司所有电话:86-021-51873168传真:86-021-51875086-800本产品仅供科学研究使用Thisproductisforresearchuseonly.Notforhumanordiagnosticuse.考马斯亮蓝(Bradford)法蛋白浓度测定试剂盒M2031产品说明书8.根据测得的吸收值,在标准曲线上即可查得样品的蛋白含量。9.计算蛋白浓度:以查得的蛋白含量除以样品体积10μl,再乘以相应的稀释倍数即可得到待测样品的实际浓度。B.比色皿测定:1.根据需要从冰箱取出适量Bradford
8、2x染色液,平衡至室温并混匀;预热酶标仪20分钟。2.根据需要取适量标准品,加入去离子水稀释至1mg/ml(原液5mg/ml),并混匀。注意:原则上蛋白样品在什么溶液中,标准品也宜用什么溶液稀释。但是为了简便起见,也可以用去离子水、0.9%NaCl或PBS稀释标准品。稀释后的蛋白标准品也可以-20℃长期保存。以下步骤中均默认采用去离子水,可以根据条件选择使用稀释液。10.
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