TLC跑经验总结

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1、看了MERK兄的帖子，很受启发，想起发这个帖子，希望大家把在过柱子过程中的获得的成功的或不成功的，成熟的或不成熟的经验或想法，留在这块，我们大家可以互相学习，互相交流，期待着共同的进步，共同的提高，希望大家跟帖。谢谢！先把板子爬好其实也不是这么简单。有时候板上很好，柱子差远了。有同感！我感觉过柱子跟爬板，不太一样，板爬的好，过柱子时，可就没有那么幸运了。板子爬不好，柱子一定爬不好还是先把板子爬好，板子比柱子好把握，有个参考好多了。还是先把板子爬好，掌握好各个Rf值对，过柱是一个很好的参考，我一般在开

2、始时选用2、3个展开剂过柱，开始用极性小的展开剂，将极性小的杂质先除名，再用极性大的。如果我想要的那个东东的Rf值约0.7左右（展开剂是氯仿／甲醇：10／1），那么我能否单用氯仿过柱？柱子和板有差异的话，想看的清楚一点，最好把板90度爬两次，如果不是会洗脱液中分解的话，应该会比较容易重复的！柱子情况与TLC基本上一样的，但是装柱和上样一定要搞好不然很容易跑得一塌糊涂无论干柱还是湿柱，把柱子压实分离效果才会好过柱的关键有几点:1是选择好硅胶,装柱的时候要压紧,压平,使柱子中间没有气泡;2是要选择好展开

3、剂;最好先查查文献，看看有没有类似的色谱条件，这样做起来就事半功倍了回9楼：可以单一用氯仿做洗脱剂！效果还不错！感觉冬天过柱效果较差9楼兄弟这个不好说,因为我们大家过柱的方法不一定相同,学校一般使用常压或加压,而我们这里使用的确实减压间歇法.好的板子很重要只要你的化合物有极性区别，理论上没有分不开的柱子。所以一定要耐心，有几分象钓鱼。过柱子是一个经验活，主要凭感觉，因为它和您的待分离物的个数、各点间的间距、Rf值...均有关系，柱子过多了，就会感觉出一个合适的洗脱液以及极性。但也并非无规律可循，过柱

4、前爬板是必不可少的，试不同极性，找一个各点分离较开的极性，内径一厘米的柱子一般极性放大10倍左右，柱子越粗，极性放达越大。爬板时，如果待分点离开基线，而其下一点未动时的极性一般适于过柱。板子的分离效果一般好于柱子，因为板子的粒度较细高效板有差异的，用高效板跑的，在实际过柱时要再降低溶剂极性，一般板Rf在0.2～0.3适宜过柱各位大侠:请问氯仿:甲醇=10:1做洗脱剂时可以用二氯甲烷:甲醇=10:1或?:?来代替吗?因为考虑到氯仿太毒了,请帮忙分析一下.另外:有没有大侠知道过柱用的硅胶怎么选择比较合理

5、?硅胶柱层析下面介绍我现在惯用的方法：匀浆法。1。称量。200-300目硅胶，称30-70倍于上样量；如果极难分，也可以用100倍量的硅胶H。干硅胶的视密度在0.4左右，所以要称40g硅胶，用烧杯量100ml也可以。2。搅成匀浆。加入干硅胶体积一倍的溶剂用玻璃棒充分搅拌。如果洗脱剂是石油醚/乙酸乙酯/丙酮体系，就用石油醚拌；如果洗脱剂是氯仿/醇体系，就用氯仿拌。如果不能搅成匀浆，说明溶剂中含水量太大，尤其是乙酸乙酯/丙酮，如果不与水配伍走分配色谱的话，必须预先用无水硫酸钠久置干燥。氯仿用无水氯化钙干

6、燥，以除去1%的醇。如果样品对酸敏感，不能用氯仿体系过柱。3。装柱。将柱底用棉花塞紧，不必用海沙，加入约1/3体积石油醚（氯仿），装上蓄液球，打开柱下活塞，将匀浆一次倾入蓄液球内。随着沉降，会有一些硅胶沾在蓄液球内，用石油醚（氯仿）将其冲入柱中。4。压实。沉降完成后，加入更多的石油醚，用双联球或气泵加压，直至流速恒定。柱床约被压缩至9/10体积。无论走常压柱或加压柱，都应进行这一步，可使分离度提高很多，且可以避免过柱时由于柱床萎缩产生开裂。5。上样。干法湿法都可以。海沙是没必要的。上样后，加入一些洗

7、脱剂，再将一团脱脂棉塞至接近硅胶表面。然后就可以放心地加入大量洗脱剂，而不会冲坏硅胶表面。6。过柱和收集。柱层析实际上是在扩散和分离之间的权衡。太低的洗脱强度并不好，推荐用梯度洗脱。收集的例子：10mg上样量，1g硅胶H，0.5ml收一馏分；1-2g上样量，50g硅胶（200-300目），20-50ml收一馏分。7。检测。要更多地使用专用喷显剂，如果仅用紫外灯，会损失较多产品，紫外的灵敏度一般比喷显剂底1-2个数量级。8。送谱。收集的产品旋干，在送谱前通常需要重结晶。如果样品太少或为液体，可过一小凝

8、胶柱，作为送谱前的最后纯化手段。可除去氢谱1.5ppm左右所谓的“硅胶”峰。呵呵，写得手好累呀，欢迎大家指正或提出更好的建议！对了，欢迎制备薄层层析法（ptlc）的高手发言！关键是装柱和展开剂的选择各位能否介绍一些工业上用的填料？比如要分离磷酸酯类的化合物。谢谢！爬板子是为了过柱子作准备，要过好柱子还得对样品的特性有了解，才能遭到找到合适的柱子，也才有可能过好柱子。复28楼，工业用填料也不过是琼脂糖类、硅胶类和聚苯乙烯类，但粒径要比分析用的填料大，而且粒径越均匀分离效