(实验六)果蝇双因子

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1、实验五实验六果蝇的双因子实验（2学时）一、教学基本要求1、掌握实验果蝇的杂交技术，并学会记录交配结果和掌握统计处理方法。2、正确理解分离定律的实质。二、教学内容〖目的和要求〗通过这一实验要求学生正确理解分离定律的实质，掌握果蝇的杂交技术，并学会记录交配结果和掌握统计处理方法。〖实验原理〗自由组合定律的实质是基因的分离是独立的，而在配子中非等位基因自由组合，产生四种比例相同的配子。因此在杂种二代会出现四种表型，比例为9：3：3：1。这一实验是利用果蝇的两对相对性状：长翅与残翅、黑檀体与灰体且分别位于不同染色体上这一特征进行的长翅灰体×残翅黑檀体的双因子杂

2、交实验，旨在验证自由组合定律〖材料和方法〗黑腹果蝇（Drosophilamelanogaster）的突变品系黑檀体突变型，ebony（e）位于第三染色体残翅突变型，vestigial（vg）位于第二染色体双筒解剖镜，大指管，麻醉瓶，磁板，海绵板，解剖针，毛笔，镊子。红糖，麸皮，琼脂，干酵母等。〖实验说明〗1.性状特征：黑檀体果蝇（e）的体色乌黑，与黑体（b）相似，但是它们是不同染色体上基因所决定。与（e）相对应的野生型性状是灰体。（e）的座位是第3染色体70.7。残翅果蝇（vg）的双翅几乎没有，只有少量残痕，与（vg）相对应的野生型是长翅。（vg）的座

3、位是第二染色体67.0。2.交配方式：由于（e）和（vg）是在不同对的染色体上，两对因子杂种在形成生殖细胞时会产生四种不同类型配子，比例为1∶1∶1∶1，如子一代个体相互交配，则通过♀、♂配子相互结合，在子二代可得到16种组合，其中9种灰长，3种黑长，3种灰残，1种黑残。如下图所示:整理后：1++++，2+e++,2+++vg,4+e+vg,共9种[+][+]1++vgvg,2+evgvg,共3种[+][vg]1ee++,2ee+vg,共3种[e][+]1eevgvg,共1[e][vg]所以表型比例是9∶3∶3∶1。若用反交：即♀vgvg++×++ee

4、♂其结果应该与前面正交相同，但因残翅果蝇不能飞，只能爬行，所以作雌体亲本比较好，若作雄亲本，得到的子代将减少很多，因而在本例中反交比正交好〖实验步骤〗1．收集雌果蝇品系的处女蝇。2.准备好培养基，把已麻醉的残翅♀、♂果蝇和黑檀体♀、♂果蝇，按正、反交方式，分别放入不同培养瓶内，进行杂交，贴好标签，标签形式如下：3．6-7天后，见到有F1幼虫出现，可除去亲本（除干净！）。4．再过3-4天，检查F1成蝇的性状，应该是灰体、长翅（正、反交相同）。若性状不符，表明实验有差错，不能再进行下去。发生差错的原因可能是亲本雌果蝇不是处女蝇：F1幼虫出现后亲本未倒干净；

5、杂交时雄蝇选择有误；以及亲本原种不线纯等等。5．按原来的正、反交各选5-6对F1成蝇（♀、♂），换新的培养瓶，继续饲养（此时不需要处女蝇）6．6-7天，F2代成蝇出现，麻醉后（可以深度麻醉）倒在白瓷板上，进行统计，每隔两天统计一次，连续统计6-7天（当F3出现就失去意义了）。实验结果自由度=4-1=3若P＞0.05，说明实验符合二对因子自由组合的假说。若P＜0.05，说明这个实验数据不能用二对因子的自由组合解释，也就是否定了原来的假设，即不能认为是自由组合。〖作业〗根据统计结果做χ2检验，并对检验结果做解释。实验原理实验仪器麻醉瓶实验操作倒亲本实验操作

6、麻醉实验操作记数