实验三：果蝇的双因子实验

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1、专业班级：12级生物技术02班姓名：杞正富实验三果蝇双子实验一：目的1：掌握实验果蝇的杂交技术并学习记录交配结果和掌握统计处理方法2：通过双因子杂交，验证和加深理解遗传学基本规律自由组合规律3:验证两对非等位基因间的自由组合现象和遗传规律二：原理自由组合定律的实质是基因的分离是独立的，而在配子中非等位基因的自由组合，产生四种比例相同的配子。因此在杂种二代会出现四种表型，比例为9:3:3:1。这一实验是利用果蝇的两对相对性状：长翅与残翅，黑檀体与灰体且分别位于不同染色体上这一特征进行的长翅灰体和残翅黑檀体的双因子杂交实验，旨在验证自由组合定律

2、。黑檀体果蝇（e）的体色乌黑，与黑色（b）相似，但是它们是不同染色体上基因所决定的，与（e）相对应的野生型性状是灰体，（e）的座位是第3条染色体70.7。残翅果蝇（vg）的双翅几乎没有，只有少量残痕，与（Vg）相对应的是野生型长翅，（Vg）的座位是第二条染色体67。交配方式：由于（e）和（vg）是在不同对的染色体上，两对因子杂种在形成生殖细胞时会产生四种不同的类型，比例为1:1:1：1.如H个体相互交配，则通过早i配子相互交配，在子二代可以得到16种组合，其中9种灰长，3种黑长，3种灰残，1种黑残，其表现型为9:3:3:1.若用反交，其结果

3、同前面正交相同，但因残翅果蝇不能飞，只能爬行，所以做雌体比较好，若作雄本，得到的子代将减少很多。三：材料与方法材料：黑腹果蝇（Drosophilamelanogaster）的突变品系，3.1方法3.1.1:配置培养基根据本实验的需要配制培养基（群体规模越大越好配置培养基的方法如下（每300ml的配方）A葡萄糖23.5g琼脂：2.45g蒸馏水：150mlB玉米粉30.9375g水：150ml加水搅拌均匀后加入酵母粉：2.625g将A和B混合后加热成糊状，加1.875ml丙酸，即可分装到培养瓶中3.1.2：收集雌果蝇的处女蝇3.1.3：装备好培

4、养基，把已麻醉的的残翅早S果蝇和黑檀体果蝇早各果蝇，按正反交方式放入不同的培养基内，进行杂交，贴好标签，标签形式如下vgvg++早日期姓名VgVg++X++ee早各円期姓名3.1.4：6一一7天后，见到有H幼虫出现，可除去亲本（除干净）3.1.5：再过3—一4天，检查F1成蝇的性状，应该是灰体长翅（正反交相同）。若性状不符，表明实验有差错，不能再进行下去。发生差错的原因可能是亲本雌果蝇不是处女蝇，F1幼虫出现后亲本未倒干净，杂交时雄果蝇选择有误：以及亲本原种不纯等等3.1.6：按原来的正反交各选5——6对F1成蝇（孚6）,换新的培养基，继续

5、饲养（此时不需要处女蝇）3.1.7:7天后，除去F1代亲本3.1.8：再过4天，F2代成蝇出现，麻醉以后（可深度麻醉），倒在白瓷板上，进行统计，每隔两天统计一次，连续统计8天（在F3代出现前统计完）四：结果与分析表1n代正交统计结果登记表观察曰正交：灰体残翅（¥）x黑檀体长翅（各）灰体长翅数灰体残翅数黑檀体长翅■■鼻■丨1g黑檀体残翅数4.2370004.26230004.28160005.129000合计75000表2F2代反交结果做x2测验灰体长翅数灰体残翅数黑檀体长翅数黑檀体残翅数合计实际值（0）219776815379理论值（C

6、）213.187571.062571.062523.6875偏差（0—C）5.81755.93753.06258.6875（0—C）2/c0.1584770.4961220.1319813.186181f3x23.972761p0.20

7、净，F1本身就需要自交产生性状分离比为9:3:3:1的F2代。那么就不要求F1是处女蝇了。处女蝇选取：与前人做的有所不同。我们将除尽老果蝇有大量卵的培养基单独存放，待果蝇孵化及羽化，雌果蝇自羽化开始10小时之内尚未成熟而无交配能力。收集10小时内新羽化出来的新果蝇。麻醉后在白瓷板上将果蝇雌雄分开，这是得到的雌果蝇应该全部为处女蝇。如果要验证选取的处女蝇是否正确，先不要放入雄蝇，单独培养雌果蝇3天，看有没有卵细胞，如果产卵就不是处女蝇，反之则一定是处女蝇。根据以上的结果及分析，可得到如下结论：果蝇的体色（灰体和黑檀体），翅形（长翅和残翅）都是

8、位于不同染色体上的一对等位基因控制的相对性状，且灰体对黑檀体为显性，长翅对残翅为显性，显性性状受显性基因控制，隐性性状受隐性基因控制。常染色体上的基因遗传，丼正反交结果一致，不能