实验七果蝇的双因子杂交实验.ppt

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1、实验七果蝇的双因子杂交实验湖州师范学院生命科学学院生物系《遗传学》校级精品课程一、实验目的1、学习果蝇两对因子杂交实验的原理和方法。2、验证两对非等位基因间的自由组合现象和遗传规律。3、掌握果蝇的杂交技术，并学会记录交配结果和数据统计处理的方法。二、实验材料黑腹果蝇（Drosophilamelanogaster）品系灰体残翅：EEvgvg黑檀体长翅：eeVgVg果蝇的灰体基因（E）与黑檀体基因（e）为一对相对性状，位于ⅢR70.7位置，而长翅（Vg）与残翅（vg）为另一对相对性状，位于ⅡR67.0位置。这两对基

2、因是没有连锁关系的，位于不同染色体上的非等位基因。三、实验仪器设备药品体视显微镜、恒温培养箱、培养瓶、麻醉瓶、毛笔、滤纸、培养皿等。乙醚、玉米粉、琼脂、红塘、酵母粉、丙酸等。四、实验原理自由组合规律：位于非同源染色体上的两对非等位基因，其杂合体在形成配子时，等位基因彼此分离，进入不同的配子中，非等位基因可自由组合进入同一配子，结果产生4种比例相等的配子。若显性完全，F1自交产生F2代表现出4种表型，比例为9：3：3：1。P：灰体残翅（♀）×黑檀体长翅（♂）F1：灰体长翅EeVgvgF2四、实验原理正交：灰残Ee

3、vgvg（♀）×黑长eeVgVg（♂）反交：黑长eeVgVg（♀）×灰残EEvgvg（♂）注意：双因子杂交也可做反交，但因残翅果蝇不能飞，只能爬行，用做母本比较好。正交自交EEvgvgeeVgVg四、实验原理EVg1/4Evg1/4eVg1/4Evg1/4EVg1/41/161/161/161/16Evg1/41/161/161/161/16eVg1/41/161/161/161/16Evg1/41/161/161/161/161EEVgVg1EEvgvg9E_Vg_2EEVgvg2Eevgvg2EeVgVg1

4、eeVgVg4EeVgvg2eevgvg1eevgvg3E_vgvg3eeVg_F2配子五、实验步骤1.选处女蝇：每组做正交1瓶，正交选灰体残翅为母本，黑檀体长翅为父本，将旧瓶中的果蝇麻醉全部处死，在8h内收集处女蝇至少5只，雌雄分开培养，可提前2-3天收集。2.杂交：将处女蝇5只和5只黑檀体雄蝇麻醉、转移到新的杂交瓶中，确保杂交瓶中各只果蝇完全苏醒，没有死蝇。贴好标签，于25℃培养；3.处死亲本：7d后，处死杂交亲本。4.观察F1：再过4-5天，F1成蝇出现，连续观察2—3天，或在处死亲本7天后，集中观察记录

5、F1表型。五、实验步骤4.F1互交：选取5对F1果蝇，分别转入一新培养瓶（不需处女蝇），贴好标签，于25℃培养。5.处死亲本：7d后，杀死F1代亲本果蝇6.观察F2：再过5d，F2成蝇出现，开始观察记录F2，连续统计7-8d。注意：（统计过的果蝇放入酒精瓶中，杀死）六、实验结果1.观察并统计F1代表型及个体数，分析相对性状间的显、隐性关系；把你的统计结果，填入表1。2.观察并统计F2代表型及各种表型的个体数，特别要注意新性状组合个体的出现。计算不同表型个体数的比例，确定这两队基因的遗传规律。把你的统计结果，填入

6、表2。3.根据你的结果，对该实验F2代的统计结果作X2测验，填入表3。观察结果统计日期灰体残翅（♀）×黑檀体长翅（♂）灰体长翅数灰体残翅数黑檀体长翅数黑檀体残翅数表1F1代表型数量统计表观察结果统计日期（♀）×（♂）灰体长翅数灰体残翅数黑檀体长翅数黑檀体残翅数合计六、实验结果表2F2代表型数量统计表灰体长翅数灰体残翅数黑檀体长翅数黑檀体残翅数实际观察数（O）预期数（E）偏差（O-E）(O-E)2/E自由度＝n－1＝表3F2代的统计结果做X2测验六、实验结果x2＝∑(O-E)2/E＝x2表Pn0.990.950.

7、500.100.050.020.0110.000160.00390.152.713.845.416.6420.02010.1031.394.615.997.829.2130.1150.3522.376.257.829.8411.3540.2970.7113.367.789.4911.6713.2850.5541.1454.359.2411.0713.3915.09102.5583.9409.3415.9918.3121.1623.21六、实验结果六作业1.交实验报告，完成各种统计表格内容。2.为什么要选择处女蝇

8、做杂交？七、思考题1.基因间发生自由组合的前提是什么？2、如何判断两个基因是连锁遗传还是自由组合？