实验六果蝇的单因子杂交实验

实验六果蝇的单因子杂交实验

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时间:2019-07-24

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1、实验六果蝇的单因子杂交实验湖州师范学院生命科学学院生物系《遗传学》校级精品课程一、实验目的1、通过实验深刻理解孟德尔分离定律2、学习遗传学实验结果记录及统计处理方法二、实验材料野生型:长翅(+/+)突变型:残翅(vg/vg)长翅果蝇:长翅座位是Ⅱ67.0,翅长超过尾部。长翅对残翅完全显性。残翅果蝇:双翅几乎没有,只有少量残痕,不能飞翔。三、实验仪器设备※体视显微镜、恒温培养箱、培养瓶、麻醉瓶、毛笔、滤纸、培养皿。※乙醚、玉米粉、琼脂、红塘、酵母粉、丙酸等。正交反交P:长翅(♀)×残翅(♂)残翅(♀)×长翅(♂)(+/+)(vg/vg)(vg/vg

2、)(+/+)↓↓F1:长翅长翅(+/vg)(+/vg)↓↓F2:长翅残翅长翅残翅(+/++/vg)(vg/vg)(+/++/vg)(vg/vg)1:2:11:2:1单因子杂交是指一对等位基因间的杂交。四、实验原理※一对杂合状态的等位基因,在遗传上保持相对的独立性,在配子形成时按原样分离到不同的配子中去,配子分离比为1:1,其自交后代中基因型分离比为1:2:1,表型分离比为3:1。五、实验步骤1.选处女蝇:将旧瓶中的果蝇麻醉处死,在8h内收集处女蝇,雌、雄分开培养,可提前2-3天收集。2.杂交:一组做正交、一组做反交各1瓶,麻醉、选取果蝇,每瓶放5

3、对,确保杂交瓶中每只果蝇完全苏醒,没有死蝇。贴好标签,于25℃恒温箱培养。3.处死亲本:7d后,处死杂交亲本。4.观察F1:再过4-5天,F1成蝇出现,连续观察2—3天,或集中观察记录F1表型。4.F1互交:选取正交、反交各5对F1果蝇,分别转入一新培养瓶(不需处女蝇),贴好标签,于25℃培养。5.处死亲本:7d后,杀死F1代亲本果蝇。6.观察F2:再过5d,F2成蝇出现,开始观察记录F2,连续统计7-8d。注意:(统计过的果蝇放入酒精瓶中,杀死)五、实验步骤六、实验结果1、观察并统计正、反交F1代表型及个体数,比较正、反交结果,分析基因间的显、

4、隐性关系。2、观察并统计正、反交F2代表型及个体数,计算不同表型个体数的比例,比较正、反交实验结果。3、根据你的结果,对该实验F2代的统计结果作X2测验,填入表格。观察结果统计日期长翅(♀)×残翅(♂)残翅(♀)×长翅(♂)长翅数残翅数长翅数残翅数F1代:观察结果统计日期长翅(♀)×残翅(♂)残翅(♀)×长翅(♂)长翅数残翅数长翅数残翅数合计F2代:六、实验结果对F2代的统计结果做x2测验:野生型(正、反交合并)突变型(正、反交合并)总计实际观察数(O)预期数(E)偏差(O-E)(O-E)2/E自由度=n-1=x2=∑(O-E)2/E=六、实验结

5、果查x2表,进行差异显著水平检验Pn0.990.950.500.100.050.020.0110.000160.00390.152.713.845.416.6420.02010.1031.394.615.997.829.2130.1150.3522.376.257.829.8411.3540.2970.7113.367.789.4911.6713.2850.5541.1454.359.2411.0713.3915.09102.5583.9409.3415.9918.3121.1623.21六、实验结果七、思考题1.杂交实验中为什么亲本雌蝇要选用处

6、女蝇?2.在进行杂交和F1代自交后一定时间为什么要释放杂交亲本?3.分析你的实验结果是否符合孟德尔分离定律。

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