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《LC-MS-MS测定牛奶中三聚氰胺残留量的归档1》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。
1、LC-MS-MS测定牛奶中三聚氰胺残留量的不确定度评定制定审核批准LC-MS-MS测定牛奶中三聚氰胺残留量的不确定度评定文件编号WJKF-P-Ⅱ-062版本编号A制定时间修改时间1.概述本试验采用《原料乳与乳制品中三聚氰胺检测方法》(GB/T22388-2008)测定牛奶中三聚氰胺残留量。通过对影响测定结果的不确定度分量的分析和量化，求出被测定的标准不确定度和扩展不确定度，给出各分量对测定结果不确定度的相对贡献，对测定结果进行了表述。2.实验部分2.1.仪器2.1.1.检测仪器：液相色谱质谱联用仪——
2、岛津UFLC/ABIQTRAP3200色谱柱：WatersAtlantisHilic（50mm×0.25mm×0.25µm）离子源：ESI源2.1.2.天平：电子分析天平（AR1140）可精确到0.01mg,用于称量标准品。电子天平（SE202F），可精确到0.01g,用于称量样品。2.2.测试过程称取1g（精确至0.01g）试样于50mL具塞塑料离心管中，加入8mL1％三氯乙酸溶液和2mL乙腈，超声提取10min，再振荡提取10min后，以6000r/min离心10min。上清液备用。将上述上清液转
3、移至阳离子交换固相萃取柱中。依次用3mL水和3mL甲醇洗涤，抽至近干后，用6mL氨化甲醇溶液（5mL氨水：95mL甲醇）洗脱；流速不超过1mL/min。收集洗脱液，于50℃下用氮气吹干，残留物用1mL流动相定容，涡旋后过0.2μm微孔滤膜，供LC-MS/MS测定。称量三聚氰胺标准品配成甲醇溶液，稀释成适当浓度范围的标准品工作液；分别取2μL注入LC-MS-MS,以峰面积法制作标准曲线。根据5点标准曲线法，求得三聚氰胺的残留含量。测定程序见图1：本测试采用(1000.0±0.0051)μg/mL的农药标
4、准储备液配制成五种浓度的标准品工作液,每种溶液均用LC-MS-MS测定两次,得到相应的峰面积,用最小二乘法拟合浓度-峰面积曲线进行校准。3.数学模型根据上述测定方法,可知与牛奶中三聚氰胺残留量有关的量值分别为,样品称样量,样品初分散体积,提取液分取净化体积,最终样液体积及方法的回收率。分析各影响因素与牛奶中三聚氰胺残留量的乘除关系,可得其测量数学模型为:LC-MS-MS测定牛奶中三聚氰胺残留量的不确定度评定文件编号WJKF-P-Ⅱ-062版本编号A制定时间修改时间式中：W为试样中三聚氰胺的残留量,μg
5、/g;C为定容液中三聚氰胺的浓度,μg/mL;V为定容体积，mL;frec为回收率校正因子,等于回收率的倒数。fhom为均匀性因子;frep为重复性因子;m为样品质量,g.1.不确定度分量的主要来源4.1校准过程引入的不确定度包括由5点标准品工作液的浓度-峰面积拟合的直线求得定容液浓度C时所引入的不确定度和标准储备液稀释成标准品工作液所引入的不确定度。4.2样品质量引入的不确定度由天平的最大允许误差（MPE）构成。4.3体积引入的不确定度由体积量取器具的校准不确定度和其校准温度和使用温度不同导致的不确
6、定度组成。4.4制样过程引入的不确定度测试样品的制备过程非常复杂,需经过提取、净化、浓缩等步骤,每一步操作都会引入不确定度,要逐步确定每一步骤对测量结果不确定度的贡献是相当困难的,可采用检测方法确认中的有关数据(如回收率),对制样过程引入的不确定度进行评定。4.5测试过程随机效应导致的不确定度包括样品的均匀性和代表性,天平的重复性,体积刻度充满的重复性,制样过程中净化、浓缩等各步骤的重复性,进样的重复性等因素引入的不确定度。不确定度分量来源见图2。LC-MS-MS测定牛奶中三聚氰胺残留量的文件编号WJ
7、KF-P-Ⅱ-062不确定度评定版本编号A制定时间修改时间1.不确定度分量的评定5.1校准过程引入的不确定度5.1.1标准物质引入的不确定度（1）标准储备液的不确定度本方法中使用的是三聚氰胺标准品。标准储备液的配制是称取10mg标准品溶解于10mL容量瓶中，浓度为1000μg/mL.①标准品纯度的不确定度。购自xStandard的三聚氰胺纯度为99.5%，可以认为其允许误差为0.5%，，按照均匀分布处理，其标准不确定度和相对标准不确定度分别为：②标准品称量的不确定度。用精确至0.1mg的电子天平称取1
8、0.0mg三聚氰胺标准品，不确定度主要由天平校准、环境、称量的变动性（随机性）所产生。通常情况下忽略环境因素的影响，而称量变动性（随机性）所带来的不确定度以在方法重复性中予以评定，故在此不予重复评定。评定过程中所引入的独立不确定度分量来自于天平的校准。所用天平的最大允许误差为0.05mg，两次称量（减重法）引入的标准不确定度属B类不确定度，按均匀分布处理为：其相对标准不确定度为：③标准储备液的不确定度：（2）标准品工作液配制过程所引入的不确定度 此不确定
