3种方法检测孕妇体内免疫性抗体的对比研究

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1、3种方法检测孕妇体内免疫性抗体的对比研究作者：李永乾,龙志芳,姚瑶,郝建英单位：石家庄市，河北医科大学第三医院输血科(李永乾、姚瑶、郝建英);河北省曲周县医院检验科(龙志芳)【关键词】微柱凝胶技术;母婴血型不合;IgG抗A(B);HDN　　检测孕妇体内免疫性抗体效价是协助早期诊断新生儿溶血病(HDN)的可靠指标之一。以往均采用经典试管法测定孕妇体内免疫性抗体。但在实际工作中，经典试管法检测孕妇体内的免疫性抗体程序繁琐且稳定性差。微柱凝胶试验技术(MGT)是一种新的改良抗球蛋白试验技术，在国外输血

2、领域已逐渐作为常规应用[1]，国内也有报道[2-4]。笔者自2006年以来在血液免疫学诊断方面进行了MGT、凝聚胺法(MPT)和试管法抗人球蛋白试验技术(tubeantipersonglobulinexperimenttechnique,TAT)的研究，将微柱凝胶技术和凝聚胺技术应用到夫妇免疫性抗体的检测工作中，三种方法进行了对比研究，探讨了3种方法的可靠性。　　1材料与方法　　1.1标本来源1152例2006年6月至2009年6月夫妇ABO血型不合的标本。孕妇为O型，丈夫为A、B、或AB型。

3、　　1.2试剂微柱凝胶抗体筛查卡由长春博讯生物技术有限责任公司提供，试管法抗人球蛋白、2巯基乙醇等试剂由上海血液生物医药有限公司提供，凝聚胺试剂有台湾Baso试剂公司提供。　　1.3方法微柱凝胶技术按产品的说明书，严格控制红细胞的浓度、加样量、孵育温度和时间。传统试管法试验按《全国临床检验操作规程》操作。同时设阴阳性对照。　　1.4统计学分析应用SPSS13.0统计软件，计数资料采用χ2检验，P<0.05为差异有统计学意义。　　2结果　　2.1O型孕妇免疫性抗A或抗B效价对我

4、院门诊和住院孕妇检测的1152份O型孕妇免疫性抗A或抗B效价进行统计学处理，以1∶128为界值，配偶为A型阳性检出率为29.63%(168/567),配偶B型者阳性检出率为29.74%(174/585)，组间检出率差异无统计学意义(P>0.05)。　　2.2Rh免疫性抗D抗体检出率在1152例孕妇中检出RhD阴性18例，在18例RhD阴性孕妇中检出抗D抗体12例(66.7%)，抗D效价≥1∶32孕妇5例(41.7%)，抗D效价≥1∶64孕妇5例(41.7%)，抗D效价&ge

5、;1∶128孕妇2例(16.7%)。　　2.3MGT法与MPT、TAT对IgG抗A(B)抗体的捡出率在1152例夫妇血型不合的孕妇血清中,MGT法检出抗A(B)抗体效价≥1∶64以上者643例(55.8%),MPT法捡出624例(54.2%),TAT法捡出615例(53.4%),三者比较差异无统计学意义(P>0.05)。见表2。表2MGT法与MPT法、TAT法检测IgG抗A(B)抗体效价的比较　　3讨论　　新生儿溶血病(母子血型不合溶血病)是由于孕妇与胎儿血型不符，母体的抗体与胎

6、儿的红细胞发生反应而引起的同种免疫溶血性疾病。研究表明，O型孕妇IgG抗A(B)效价≥1∶64的检出率远远高于A(B)型孕妇，这是因为几乎所有的O型个体血清中都含有IgG抗A(B)，而A(B)型人血清中主要是IgM抗A(B)，IgG抗体极少的缘故。因此，本研究选择的孕妇为O型，丈夫为A、B、AB型。ABO、RhD血型引起的HDN是由于母亲血液中存在与胎儿不相合的IgG性质血型抗体引起的同种被动免疫性疾病[5]。当孕妇血清中IgG抗A(B)抗体效价≥1∶64或RhD阴性孕妇血液

7、中产生针对胎儿RhD抗原的抗D抗体时,胎儿有受害的机会,可能发生HDN。因此通常以IgG抗A(B)抗体效价≥1∶64作为临界值,孕妇血清中IgG抗A(B)抗体效价≥1∶128时,提示婴儿很可能受害[6]。产前IgG抗A(B)效价测定一般在妊娠第16周进行第1次检测，以了解孕妇抗体基础水平，然后，于28～30周作第2次检查，结果高者，要定期检测孕妇血清中IgG抗A(B)抗体效价，并由妇科医师给予治疗。本组1152例IgG抗A(B)效价≥128的孕妇，经治疗有效率达到80

8、%以上，很少发现明显的ABO系统HDN，说明HDN只要产前积极预防治疗，完全可以降低其发病率。血清中的抗A、抗B往往是IgG和IgM的混和物，其具有相同的特异性，因此须除IgM抗A(B)的相互干扰。通常使用二疏基乙醇(2Me)处理血清，破坏IgM抗体，使IgG抗体保持与相应的红细胞致敏的血清学特性。TAT法测抗体的效价需作大批试验，孵育后需洗涤至少3次，再加抗人球离心观察结果。MPT法也是一种快速检测免疫性IgG血型抗体的方法,该方法缩短了抗原抗体的孵育时间,既不需反复洗涤红细胞,又不需