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《毒理学水生毒性试验设计》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在教育资源-天天文库。
1、某化合物A,在水中溶解度10%,在丙酮中的溶解度为100%,不挥发.在pH<6时易水解.(1)设计水生生物的急性毒性实验(2)如果测定含A物质的废水急性毒性,应该如何进行.毒理学设计性实验由于化合物A在生产和使用的过程中随着工业废水,农药径流流入水体,对水生生物的生长和繁殖有着潜在的危害.容易造成水质,土壤,植被的污染.如果人们不慎饮用或是食用含有残余化合物A的污染水体或鱼类,将严重威胁人体健康.因此,在水生生物急性毒性实验中,研究该类化合物A在水体中的毒性机理具有必要性.鱼是水生生态系统的重要组成部分,是人类主要的食
2、物来源,所以,鱼类的急性毒理资料是常用的评价有毒化学物质和工业废水对水生生物危害的资料.在我国鱼类毒性实验中经常使用的有白鲢(Hypophthalmichthysmolitrix,),金鱼(Goldfish)、鲤鱼Cyprinuscarpio、鲫鱼Carassiusauratus等。由于这些材料体型较大，饲养起来不是很方便，而且受到繁殖季节的限制难以常年获得。而斑马鱼是国际标准化组织(ISO)推荐的实验鱼种，其个体较小，性成熟期短，繁殖能力强，价格便宜。被广泛的应用于生命科学的研究，也是实验室标准毒理学检验最常用的实验
3、动物。1实验方法与材料1.1实验材料受试污染物：化合物A。1.2实验仪器气相色谱-质谱联用，pH计(PHS-3B),溶解氧测定仪(JYD-1A)，水硬度计，温度计，电子分析天平,烧杯（25，50ml）、移液管（1，10ml）、量筒等。1.3实验用水由于该化合物在水中的溶解度为10%，而在丙酮中的溶解度为100%，故采用丙酮作为助溶剂，丙酮助溶剂含量不超过0.1mg/L。再加入10%的吐温-80乳化剂配成母液，实验用水为经活性炭过滤后强制充氧48h以上的自来水，溶解氧>5.4mg/L,pH值为6.4-7.0，水温(22±
4、2)℃。总硬度125~250mg/L(以CaCO3计)。自然光照，实验周期96h，实验方式采用静水式，96h之内不更换试液。1.4实验生物受试斑马鱼购于上海市杨浦区花鸟虫鱼市场，体长为(30.00±0.75)mm，体重量为（0.20±0.01）g.行为活泼，反应灵敏，无畸形，逆水性强。鱼苗经w=5%食盐水消毒后进入实验室，用曝气48h的自然脱氮自来水在实验室经过驯养7~10d后方可实验，驯养期间死亡率应小于3%。实验前24h停止喂饲，实验期间不喂食，每天清除粪便及食物残渣,保证每天实验期间光照12h。2实验方法先做预实
5、验，以确定化合物A对斑马鱼24h100%致死的最低浓度和96h不引起死亡的最高浓度。实验在2L的烧杯中进行，设置间隔较大的浓度梯度，尽可能使LC50在设置的浓度范围内，每个浓度设平行。实验开始后每隔一段时间观察记录，整理24h、48h，72h，96h观察记录，需要统计各容器试验鱼的存活情况和行为特征，实验观察时发现死鱼需要及时捞出。浓度/(mg/l)014.55.07.010死亡率/%00080100100从预实验得到的无死亡浓度和100%死亡浓度之间，以实验配置好的母液以及稀释水，按照一定的间隔设置6个实验浓度组（4
6、.5mg/L,5.0mg/L,5.5mg/L,6.0mg/L,6.5mg/L,7.0mg/L）和一个空白对照组（曝气自来水）以及助溶剂（丙酮）对照组，每组设三个平行。每组10条斑马鱼，以96h为一个实验周期，采用静水流的方式，在24h，48h，72h，96h后分别观察斑马鱼存活状况，并记录溶解氧、pH、温度情况，鱼的死亡情况及行为变化等等，还要及时捞出死鱼。最终确定鱼死亡50%时受试物的浓度，半数致死浓度用24h-LC50、48h-LC50、72h-LC50、96h-LC50来表示，判断斑马鱼死亡需要用玻璃棒轻轻按压斑
7、马鱼的尾部，如果没有反应即认为斑马鱼已经死亡。死亡率浓度（mg/L）24h48h72h96hX1x2x3平均值x1x2x3平均值x1x2X3平均值x1x2x3平均值自来水空白丙酮空白4.55.05.56.06.57.0根据化合物A对斑马鱼的致死数据计算出其平均死亡率，再转化为概率单位，求出概率单位与化合物A浓度对数的回归方程，计算出化合物A的LC50，具体结果见表3.污染物实验时间/h相关系数LC50（mg/L）化合物A24487296根据鱼类毒性分级标准，LC50<1mg/l为剧毒，1~100mg/l为高毒；100~
8、1000mg/L为中等毒性；1000~10000mg/L为低毒，>10000mg/L为微毒或无毒。再以此判断含该化合物的废水的毒性.关于含化合物A的废水毒性实验,实验设计废水浓度100％、50％、40％、20％、10％、5％和0(CK)7个处理，3次重复。每组废水中均放入10尾斑马鱼,实验周期为96h,开始暴露前,试验鱼逐条测量全
