水生生物急性毒性试验一般程序.doc

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1、水生生物急性毒性试验一般程序1、试验准备1）实验容器准备、清洁和消毒处理——容器：大小合适、材料无毒、不易吸附、对生物不造成损伤2）受试生物的采集与驯化3）稀释水（试验关键）——来源：无污染自然水、去氯自来水、配置标准水（OECDASTM推荐配方）——质量控制：pH、温度、溶解氧、盐度、硬度、无其它污染物，有参比4）环境条件：控制系统2、实验设计1）测试方式选择——可选用静止、更新式和直流式。——挥发性高、降解速率大化合物不能用静止式，选用更新式，最好用直流式——BOD高的废水不能用静止式，选用更新式，最好用直流式——生长速率快、

2、代谢快的生物不能用静止式，选用更新式，最好用直流式2）试验生物选择3）被测毒物的配置——配成高浓度储备液——不溶或溶解度小用助溶试剂，如丙酮等，并设置溶剂对照，助溶试剂的毒性要小、溶解度高、实验系统用量要少，关键是要了解被测毒物的溶解度4）生物指标确定及试验重点5）试验浓度的设置（获得毒性数据的关键）——文献资料——预备试验——浓度确定方式：等对数浓度3、正式试验1）实验浓度的配置2）试验动物的数量——数量分配：5~10——生物量：＜0.8g/L；个体小的热带种＜0.1g/L3）实验组数——5个浓度+对照（稀释水）——5个浓度+对

3、照（稀释水）+溶剂对照——对照组死亡率＜10%——3~5个平行（不少于30个受试生物）4）实验周期（暴露时间）——根据试验目的和生物不同而不同——标准方法：藻类生长抑制试验，72h                  枝角类急性毒性试验，48h             鱼类急性毒性试验，96h5）试验终点观察：不同生物不同，同一实验相同6）理化指标测定：温度、溶解氧、pH、硬度等7）受试毒物浓度确定（计算得的数值VS实测）8）实验记录P.S.急性毒性试验期间不喂食物4、LC50的求法1）直线内插法——图解计算LC50、EC50的一种

4、简便方法。在半对数纸上作图，即可求解。2）概率单位法依据：浓度对数与概率单位呈直线关系方法一：查死亡率——概率单位换算表，然后作图（浓度对数——概率单位图）方法二：直接用对数——概率纸作图——求直线回归方程——求LC50的置信区间（范围）推荐软件：TrimmedSpearman-KarberSoftware/Excel/SPSS