微生物的纯培养和显微技术(I)

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1、第二章微生物的纯培养和显微技术本章重点：微生物纯培养的分离方法。微生物的保藏方法显微镜下的微生物的形态第一节微生物的分离和纯培养一、无菌技术1、概念：在分离、转接及培养纯培养物时防止其被其他微生物污染，其自身也不污染环境的技术。2、方法：培养基、器具等需灭菌接种操作---无菌操作纯培养物、菌落、菌苔、平板二.用固体培养基分离纯培养1、涂布平板法2、稀释倒平板法3、平板划线法4、稀释摇管法（厌氧菌）三.用液体培养基分离纯培养四.单细胞分离五.选择培养分离选择平板培养（如产酶微生物筛选)富集培养抑制性选择培养基（取其所抗）加富性选择培养基（投其所好）六，微生物的保藏技术1.保

2、藏的目的2.保藏的原理3.保藏的方法传代培养4℃冷冻保藏-196℃，-70℃，-20~-30℃干燥保藏沙土管，安瓿管其他方法第三节显微镜下的微生物一，细菌细菌的定义：以二分裂为主要繁殖方式的单细胞原核微生物。1.细菌的形态和排列三种基本形态：球状一个分裂面二个分裂面三个分裂面无定向分裂面杆状，单杆，链杆，栅状，八字螺旋状弧菌，螺旋菌显微镜下示意图单球菌细胞分裂沿一个平面进行，新个体分散而单独存在.如尿素微球菌双球菌细胞沿一个平面分裂，新个体成对排列.如肺炎双球菌显微镜效果电镜照片四联球菌细胞分裂是沿两个相垂直的平面进行，分裂后每四个细胞特征性地连在一起，呈田字形.如四联微球

3、菌显微镜下示意图链球菌细胞沿一个平面进行分裂，新个体不但可保持成对的样子，并可连成链状.如：乳链球菌、无乳链球菌、溶血链球菌八叠球菌细胞按三个互相垂直的平面进行分裂后，每八个球菌特征性地连在一起成立方体形.如藤黄八叠球菌葡萄球菌细胞无定向分裂，多个新个体形成一个不规则的群体，犹如一串葡萄。如：金黄色葡萄球菌白色葡萄球菌杆菌短杆状、长杆状、棒杆状、梭状杆状、月亮状、竹节状等；按杆菌细胞繁殖后的排列方式则有链状、栅状、“八”字状等杆菌的基本形态杆菌细胞的排列方式链杆、栅状、八字状、鞘衣包裹的丝状等短杆菌长杆菌梭状芽孢杆菌Scanningelectronmicrographsil

4、lustratingexternalfeaturesoftherod-shapedbacteriumE.coli.螺旋菌螺旋状细菌：根据螺旋环的数目弧菌：螺菌：2～6环的小型坚硬的螺旋状细菌有鞭毛，靠鞭毛运动。螺旋体：高于6环，体长而柔软的螺旋状细菌无鞭毛，靠周质间轴丝伸缩运动。其他形态：柄细菌球衣菌支原体星型细菌细菌的菌落特征：表面湿润，小而突起或大而平坦、易挑起放线菌形态附：其他原核微生物放线菌生活史放线菌孢子丝2、古细菌3.原核生物的细胞大小细菌大小量度单位：微米（um10－6m）亚细胞构造的量度单位：纳米（nm10－9m）细胞大小的形象比较大肠杆菌：0.5×2um芝

5、麻：3mm常见细菌的大小球菌：直径0.5×2um杆菌：宽×长0.5～1×1～5um螺形菌：宽×长0.5～1×1～50um细菌大小举例菌名直径或宽×长/（um×um）乳链球菌金黄色葡萄球菌大肠杆菌枯草芽孢杆菌霍乱弧菌0.5~10.8~10.5×1~30.8~1.2×1.2~30.2~0.6×1~3二，真菌概述1.霉菌霉菌是丝状真菌的一个俗称，即引起物品霉变的真菌通常指那些菌丝体较发达又不产生大型肉质子实体结构的真菌。菌丝---无隔膜菌丝，有隔膜菌丝营养菌丝菌丝体形态气生菌丝繁殖菌丝2.酵母菌概念-----酵母菌是一类以芽殖和裂殖进行无性繁殖的单细胞真菌的总称。酵母菌超过600

6、种，分属于39个属形态与大小-------球形,卵圆形,柱形,香肠形等大小：2.5-10×4.5-21μm霉菌菌落形态：大，疏松，絮状，蜘蛛网状酵母菌菌落形态：湿润，大而突起，易挑起小结细菌放线菌酵母菌霉菌个体形态单细胞，球、杆、螺旋状等无隔菌丝体单细胞，圆球、柱状等无隔菌丝体、有隔菌丝体主要繁殖方式二分裂菌丝片段、孢子芽殖、裂殖菌丝片段、孢子菌落特征湿润，小而突起，大而平坦干燥，小而致密，粉、绒状湿润，大而突起大而疏松絮状，蜘蛛网状思考题：1、几个概念：纯培养、无菌技术、菌落、菌苔、选择培养基、富集培养2、试述微生物保藏的目的、原理和方法。3、列表叙述四大类微生物的个体形

7、态、繁殖方式、菌落特征。