微生物的纯培养与显微技术

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1、微生物学洪龙62756091生物技术楼202hongl@pku.edu.cn微生物学的研究内容参考书（1）《微生物学教程》（第二版），周德庆，高等教育出版社，2002（2）《微生物生物学》，杨苏声、周俊初，科学出版社，2004（3）“Brock'sBiologyofMicroorganism11TH”，MichaelT.Madigan，JohnM.Martinko，JackParker，PrenticeHall，2006（4）“Microbiology”，LansingM.Prescott,DonaldKlein,JohnHarley，McGr

2、aw-HillHigherEducation，2005讲授内容第二章：微生物的纯培养和显微技术第三章：微生物细胞的结构与功能第四章：微生物的营养第七章：病毒(噬菌体)第十三章：微生物物种的多样性(节选)课件下载：北大教学网《微生物学》沈萍主编2006年高教出版社第二章微生物的纯培养与显微技术第二章微生物的纯培养与显微技术一、显微技术各种显微镜、决定显微镜的分辨率的因素、细菌的染色方法二、纯培养技术纯培养技术纯培养技术的局限微生物学发展与微生物学技术的关系：列文虎克、巴斯德、科赫微生物学的基础实验技术第二章微生物的纯培养与显微技术显微技术纯种分离

3、与培养技术无菌技术染色技术看做第二章微生物的纯培养与显微技术微生物基础实验课的教学思路第三个模块：四大类微生物的分离；涉及培养四大类微生物所需培养基的配制，灭菌、纯种分离、保藏等，巩固第一个模块的知识—探索性实验，注重广度；第四个模块：未名湖水质检测；大肠杆菌的形态、生理生化、鉴定以及实际应用(国标)—探索性实验，注重深度；分为4个模块：第一个模块：四大类微生物的形态学特征，基础知识—验证性实验；要求学生能认识四大类微生物；第二个模块：噬菌体效价测定—验证性实验；病毒特性；一、显微技术第二章微生物的纯培养与显微技术（一）借助显微镜观察肉眼分辨能

4、力：0.25mm小微生物的基本特点：与动物、植物细胞大小的差异；一般是单细胞或简单的多细胞。微生物生长快速与其大小相关。第二章微生物的纯培养与显微技术生长速度快与其大小相关比表面积大，有利于营养吸收、物质交换大肠杆菌代时是20分钟，48小时可产生2.2*1043个细胞，重量相当于地球的4000倍。我家里的几位女眷想要看醋里的线虫，可是看了以后，厌恶地发誓说再也不用醋了。要是我告诉她们在口腔里牙垢上生活的动物比全国的人口还多，她们将会怎样反应呢？Leeuwenhoek微生物的大小第二章微生物的纯培养与显微技术（一）细胞型—μm；非细胞型—nm设计

5、能自主生活的(微)生物？科学问题：生命的最小极限？第二章微生物的纯培养与显微技术（一）最少的基因数192，基因敲除与互补参考文献KobayashiK.etal,（2003）EssentialBacillussubtilisgenes,Proc.Natl.Acad.Sci.USA,100:4678-4683256，生物信息学参考文献Mushigian,A.R.etal，（1996）Aminimalgenesetforcellularlifederivedbycomparisonofcompletebacterialgenomes，Proc.Nat

6、l.Acad.Sci.USA，93:10268-10273流感嗜血菌生殖道支原体理论上最小的可独立生活的生命体应>140nm必需基因的类别第二章微生物的纯培养与显微技术（一）物质结构基础水是生命活动重要的、不可或缺的场所，“勇气”号和“机遇”号的一个重要使命(1)DNA复制(2)DNA复制的修复系统(3)RNA转录(4)蛋白质翻译(5)分子伴侣(6)能量代谢(7)辅酶(8)细胞膜系统已知最小的独立生活的生命体第二章微生物的纯培养与显微技术（一）骑火球纳米古生菌(Nanoarchaeumequitan)基因组500kb，直径400nm最小的基因组

7、P379最大的细菌第二章微生物的纯培养与显微技术（一）费氏刺骨鱼菌80*600μm纳米比亚硫珍珠菌Φ750μm决定显微镜观察效果的因素第二章微生物的纯培养与显微技术（一）分辨率：最小可分辨距离反差：样品区别于背景的程度波长振幅显微镜的种类第二章微生物的纯培养与显微技术（一）电子显微镜透射电子显微镜扫描电子显微镜扫描隧道显微镜光学显微镜普通光学显微镜暗视野显微镜相差显微镜荧光显微镜分辨率是决定观察效果最重要的指标第二章微生物的纯培养与显微技术（一）0.5lλ分辨率=————nsinθn∶玻片与物镜间介质的折射率空气(n=1.0)；水(n=1.33

8、)；香柏油(n=1.52)；玻璃(n=1.54)光学显微镜原理第二章微生物的纯培养与显微技术（一）θ:物镜镜口角的一半nsinθ：数值孔径（numer