GBT18932.9-2002 蜂蜜中青霉素残留量的测定方法 杯碟法.pdf

《GBT18932.9-2002 蜂蜜中青霉素残留量的测定方法 杯碟法.pdf》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。

1、67.180.10IXCS31中华人民共和国国家标准GB/T18932.9-2002蜂蜜中青霉素残留量的测定方法杯碟法Methodforthedeterminationofpenicillinresiduesinhoney-Cylinderplatemethod2002一12一30发布2003一06一01实施中华人民共和国发布国家质量监督检验检疫总局G13/T18932.9-2002前言GB/T18932-2002分为12个部分，本部分为第9部分。GB/T18932的本部分遵循GB/T20001.4-2001《标准编写规则第4

2、部分:化学分析方法》的编写规则本部分的附录A是规范性附录，附录B是资料性附录。本部分由中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局提出。本部分由中华全国供销合作总社归口。本部分起草单位:中华人民共和国秦皇岛出人境检验检疫局。本部分主要起草人:庞国芳、付宝莲、林忠。本部分系首次发布的国家标准。GB/T18932.9-2002蜂蜜中青霉素残留量的测定方法杯碟法范围GB/T18932的本部分规定了蜂蜜中青霉素残留量的杯碟测定方法。本部分适用于各种蜂蜜中青霉素残留量的测定。本部分青霉素的方法检出限为。.025mg/kg,2规范性引用文件下列

3、文件中的条款通过GB/T18932的本部分的引用而成为本部分的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本部分，然而，鼓励根据本部分达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本部分。GB/T6379-1986测试方法的精密度通过实验室间试验确定标准测试方法的重复性和再现性(neqISO5725:1981)GB/T6682-1992分析实验室用水规格和试验方法(neqISO3696:1987)原理试样中残留的青霉素经用磷酸盐缓冲液溶解、离心后

4、，取上清液作杯碟法测定，并用标准曲线进行定量。青霉素酶作确证试验试荆和材料除另有规定外，所用试剂均为分析纯，水为GB/T6682-1992中规定的三级水。4.1试验菌种藤黄微球菌(MicrococcusLuteus)。菌种号(ChinaMicrobialCultureCollection)CMCC(B)28001.4.2标准物质青霉素钠。1663IU/mg或相当者。4.3青霉素酶《卜内酸胺酶)4.4工作溶液的配制4.4.1磷酸盐缓冲溶液:pH6.0。称取8.0g无水磷酸二氢钾，2.0g无水磷酸氢二钾，溶解于水中并定容至1000

5、mL.4.4.2生理盐水:8.5g/L。称取8.5g抓化钠，溶解于1000mL水中，1210C高压灭菌20min4.5标准溶液的配制4.5.1青霉素标准储备溶液:准确称取(精确至0.1mg)青霉素标准物质(4.2)，用磷酸盐缓冲溶液(4.4.1)溶解并定容为1000pg/mL(按效价换算)的标准储备溶液。当天配制，当天使用。4.5.2青霉素标准工作溶液:取标准储备溶液(4.5.1)用磷酸盐缓冲溶液稀释，配制浓度为。.20,0.10,0.05,0.025和0.0125pg/mI的标准工作溶液。当天配制，当天使用。GB/T1893

6、2.9-20024.6培养基4.6.1培养基1:见第A.1章。4.6.2培养基2:见第A.2章。4.7菌悬液的制备将试验菌种(4.”接种于培养基2(4.6.2)内，经(35士1)℃培养18h-24h。取适量培养液转种于培养基1(4.6.1)斜面上，经(35士1)℃培养18h--24h用10mL生理盐水(4.4.2)洗下菌苔即为菌悬液。4℃保存，贮存期限2周5仪器51锐均质器:转速不低于5000r/min,离心机:转速不低于4000r/min5生化培养箱;(35士1)0C,5月，高压灭菌器。哎︺培养皿:内径90mm，底部平整光滑

7、的玻璃皿或塑料皿，具陶瓦盖。:六匕牛津杯:不锈钢小管，外径(8.0士0.1)mm，内径(6.010.1)mm，高度(10.0士0.1)mm,5.7游标卡尺:测量范围。mm--200mm，精度士。.02mm试样的制备与保存6.1样品的制备将样品搅拌均匀。分出。.5kg作为试样，制备好的试样置于样品瓶中，密封，并加以标识。6.2试样的保存将样品于常温下保存。测定步骤7.1提取称取10g试样，精确至。01g，置于50mL离心管中。加人20m工磷酸盐缓冲溶液(4.4.1)搅匀，静置10min。用均质器均质1min(4000r/min)

8、后离心30min(4000r/min)。移取全部上清液到20mL具塞试管中并用磷酸盐缓冲溶液定容至刻度。此溶液含试样量为。.5g/mL,7.2测定7.2.1菌悬液用摄的测定在实际测定前，将不同浓度的菌悬液(4.7)加人定量的培养基1(4.6.1)中培养，能使0.0125pg/