SNT0538-2010进出口肉品中螺旋霉素残留量检测方法杯碟法.pdf

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1、中华人民共和国出入境检验检疫行业标准犛犖／犜０５３８—２０１０代替ＳＮ０５３８—１９９６进出口肉品中螺旋霉素残留量检测方法杯碟法犇犲狋犲狉犿犻狀犪狋犻狅狀狅犳狊狆犻狉犪犿狔犮犻狀狉犲狊犻犱狌犲狊犻狀犿犲犪狋犳狅狉犻犿狆狅狉狋犪狀犱犲狓狆狅狉狋—犆狔犾犻狀犱犲狉狆犾犪狋犲犿犲狋犺狅犱２０１００１１０发布２０１００７１６实施中华人民共和国发布国家质量监督检验检疫总局犛犖／犜０５３８—２０１０前言本标准代替ＳＮ０５３８—１９９６《出口肉品中螺旋霉素残留量检测方法杯碟法》。本标准与ＳＮ０５３８—１９９６相比，主要变化如下：———修改了标准名称；———对原标准的结构和文本

2、格式进行了修订；———规范了量、单位、符号的表述；———将溶液的配制方法放入附录Ａ；———删去了原标准中关于检验批和抽样数量的规定；———增加了对试验菌种传代和保存方面的规定；———将回收率试验数据改为范围值。本标准的附录Ａ为规范性附录。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准由中华人民共和国湖北出入境检验检疫局负责起草。本标准主要起草人：赵晖、王鹏、徐新生、王振华、徐家文、曾宪东、冯汉利、陈建军、吴卫良。本标准所代替标准的历次版本发布情况为：———ＳＮ０５３８—１９９６。Ⅰ标准分享网www.bzfxw.com免费下载犛犖／犜０５３８—２０１０进出口肉品中螺

3、旋霉素残留量检测方法杯碟法１范围本标准规定了进出口肉品中螺旋霉素残留量检验的制样和杯碟测定法。本标准适用于进出口猪分割肉中螺旋霉素残留量检验，其他肉类可参照使用。２规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。ＳＮ／Ｔ１７５０—２００６动物源性食品中抗生素类药物残留检测方法微生物抑制法３方法提要试样中的螺旋霉素残留经用缓冲液Ⅱ（ｐＨ９．２）提取，提取液

4、再用二氯乙烷抽取。二氯乙烷抽提液经蒸干后，残渣用缓冲液Ⅲ（ｐＨ８．０）溶解，制成样液。样液中残留的螺旋霉素抑制藤黄微球菌生长，产生抑菌圈，从抑菌圈的大小用标准曲线法定量地测定肉样液中螺旋霉素的残留量。４试剂和材料除另有规定外，所用试剂均为分析纯，水为蒸馏水。４．１甲醇。４．２氯化钠。４．３１，２二氯乙烷。４．４缓冲液Ⅰ（ｐＨ８．０）：见附录Ａ中第Ａ．１章。４．５缓冲液Ⅱ（ｐＨ９．２）：见附录Ａ中第Ａ．２章。４．６缓冲液Ⅲ（ｐＨ８．０）：见附录Ａ中第Ａ．３章。４．７螺旋霉素标准储备液：见附录Ａ中第Ａ．４章。４．８螺旋霉素标准工作液：见附录Ａ中第Ａ．５章。４．９增菌用培养

5、基：见附录Ａ中第Ａ．６章。４．１０保存用培养基：见附录Ａ中第Ａ．７章。４．１１检定培养基：见附录Ａ中第Ａ．８章。４．１２营养肉汤：见附录Ａ中第Ａ．９章。４．１３螺旋霉素标准品：残留分析用参考物质，ＣＡＳ编号８０２５８１８。密封避光，防潮，４℃冰箱保存。４．１４试验菌种：藤黄微球菌（犕犻犮狉狅犮狅犮犮狌狊犾狌狋犲狌狊），ＣＭＣＣ２８００１，或其他来源的经过验证合格的菌株。菌种的传代和保存可参照ＳＮ／Ｔ１７５０—２００６附录Ｂ进行。５仪器和设备５．１培养皿：内径９０ｍｍ，底部平整光滑，具陶瓦盖。５．２牛津杯：不锈钢，外径８ｍｍ±０．１ｍｍ，内径６ｍｍ±０．１ｍｍ，高度１

6、０ｍｍ±０．１ｍｍ。１犛犖／犜０５３８—２０１０５．３游标卡尺：测量范围０ｍｍ～１５０ｍｍ，精度０．０２ｍｍ；可采用抑菌圈测定仪或其他等效测量仪器。５．４均质器：转速不低于１００００ｒ／ｍｉｎ。５．５离心机：转速不低于４０００ｒ／ｍｉｎ。５．６恒温培养箱：０℃～５０℃，搁板应保持水平。５．７高压灭菌器。５．８恒温水浴锅。５．９绞碎机。５．１０旋转蒸发器。５．１１其他：移液管、滴管、试管、离心管、克氏瓶、锥形瓶等。６试样制备与保存６．１试样制备将代表性样品中的可食部分放入绞碎机中绞碎。充分混匀，用四分法缩分至不少于５００ｇ，作为试样。装入清洁容器内，加封后，标明标记。６．

7、２试样保存将试样于－１８℃以下冷冻保存。在抽样及制样的操作过程中，应防止样品受到污染或发生残留物含量的变化。７测定步骤７．１样液的制备称取２０ｇ试样（精确至０．１ｇ）于均质杯内，加入８０ｍＬ缓冲液Ⅱ，以１００００ｒ／ｍｉｎ均质３ｍｉｎ。移入离心管中，以４０００ｒwww.bzfxw.com／ｍｉｎ离心３０ｍｉｎ。取上清液５０ｍＬ，于４０℃旋转蒸发至约１５ｍＬ。转入分液漏斗中，分别用二氯乙烷２０ｍＬ、１５ｍＬ、１５ｍＬ三次提取。合并二氯乙烷提取液，于３０℃旋转蒸发至干。加入５ｍＬ缓冲液Ⅲ，摇匀，作为样液。７．２菌悬液的制备先将试验菌种（４．１