第九章 酶的发酵生产1

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1、第九章酶的发酵生产产酶微生物及其选育固定化细胞发酵产酶动、植物细胞发酵产酶抗体酶选择菌种时应考虑的因素1、酶的产量高2、容易培养和管理3、产酶稳定性好4、利于酶的分离纯化5、安全可靠，无毒性第一节产酶微生物及其选育一、生产酶制剂的微生物1、细菌大肠杆菌一般属于胞内酶，如谷氨酸脱羧酶、天冬酰胺酶、DNA连接酶等。枯草杆菌胞外酶，如α-淀粉酶、蛋白酶等。产酶微生物及其选育2、放线菌链霉菌：主要生产葡萄糖异构酶3、霉菌黑曲霉有胞外酶和胞内酶，如糖化酶、α－淀粉酶等米曲霉糖化酶和蛋白酶活力较强。产酶微生物及其选育4、酵母啤酒酵母主要用于啤酒、酒类生

2、产。假丝酵母脂肪酶、尿酸酶等产酶微生物及其选育二、高产酶制剂菌株的选育胞外酶产生菌：加酸碱指示剂合成酶作用的特定底物胞内酶产生菌：直接加菌体或磨碎的细胞还可通过自然选育和诱变育种选育产酶微生物及其选育加酶作用的底物底物分子量较小的直接加底物淀粉酶水解圈产酶微生物及其选育蛋白酶水解圈三、菌种的保藏方法常用琼脂斜面、半固体琼脂柱及液体培养等。斜面保藏：1-4个月不等穿刺保藏：6-12月因菌种不同需选择合适的培养基并定期移种。可用橡皮塞封口或在培养基上覆盖液体石蜡；或制备菌悬液保藏。易污染，易衰退。产酶微生物及其选育1、传代培养保藏－基本方法将微

3、生物处于冷冻状态，使其代谢作用停止达到保藏。细胞体积大者比小者对低温更敏感，无细胞壁者比有细胞壁者敏感。一般加入各种保护剂提高培养物的存活率。例：甘油或二甲砜——降低脱水作用保护细胞大分子物质——与细胞表面结合防止细胞膜受冻伤产酶微生物及其选育2、冷冻保藏法一般来说，温度越低保藏效果越好。液氮——－190℃，较理想的一种；普通冷藏冰箱——-30－-20℃，温度微小变化会对菌体造成损伤。产酶微生物及其选育砂土管保藏——适用于产孢子的微生物，如芽孢杆菌、放线菌、霉菌等。冷冻真空干燥保藏——菌种保藏机构主要采用的方法。产酶微生物及其选育3、干燥保

4、藏法四、提高酶产量的措施1、添加诱导物诱导分为三类酶的作用底物酶的反应产物酶的底物类似物产酶微生物及其选育2、控制阻遏物浓度阻遏作用有产物阻遏和分解代谢物阻遏。3、添加表面活性剂例：吐温、Triton4、添加产酶促进剂例：植酸钙镁提高蛋白酶和橘青霉磷酸二酯的产量产酶微生物及其选育小结掌握高产酶制剂菌株的选育和菌种保藏了解提高酶产量的措施