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时间：2019-07-24
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1、实验六线粒体和液泡系的超活染色与观察一、实验目的１、观察动植物活细胞内线粒体、液泡系的形态数量与分布；２、学习一些细胞器的超活染色技术。二、实验原理细胞的各项活动所需要的能量，主要通过线粒体呼吸作用来提供。活体染色是应用无毒或毒性较小的染色剂真实地显示活细胞内某些结构而又很少影响细胞生命活动的一种染色方法。詹纳斯绿B是线粒体的专一性活体染色剂，线粒体中细胞色素氧化酶使染料保持氧化状态（即有色状态）呈蓝绿色，而在周围的细胞质中染料被还原，成为无色状态。中性红为弱碱性染料，3-氨基-6甲氨基-2-甲基吩嗪盐酸盐。对液泡系（即高尔基体）的染色有专一性，只将活细胞中的液泡系染成红色，
2、细胞核与细胞质完全不着色，这可能是与液泡中某些蛋白质有关。三、实验用品1、器材显微镜、恒温水浴锅、剪刀、镊子、刀片、载玻片、盖玻片、吸管、牙签、吸水纸.2、试剂（1）Ringer溶液（2）10%，1/3000中性红溶液（3）1%，1/5000詹纳斯绿B溶液四、实验材料人口腔上皮细胞洋葱鳞茎内表皮绿豆幼根根尖五、实验步骤1、人口腔粘膜上皮细胞线粒体的超活染色与观察清洁载玻片放在37℃恒温水浴锅的金属板上 ↓ 滴2滴1/5000詹纳斯绿B染液 ↓ 用牙签口腔颊粘膜处稍用力刮取上皮细胞 ↓ 刮下的粘液状物放到载玻片的染液滴中 ↓ 染色10~l5min（注意不可使染液干燥，必要时可再
3、加滴染液）↓ 盖上盖玻片，显微镜下观察２、洋葱鳞茎内表皮细胞线粒体的 超活染色与观察载玻片于37℃恒温水浴：1/5000詹纳斯绿Ｂ溶液 １滴洋葱鳞茎内表皮 镊子撕取染色10－15min，吸去染液，加Ringer溶液１滴，盖上盖玻片，显微镜下观察。染过色但没有染上的细胞染色的细胞未染色细胞线粒体洋葱鳞茎细胞线粒体死亡的染色细胞3、植物细胞液泡系的超活染色与观察取豆芽的根尖 ↓用刀片纵切根尖放入中性红染液滴中，染色5~10min↓吸去染液，滴一滴Ringer液↓盖上盖玻片进行镜检（镊子轻轻地下压盖玻片，使根尖压扁利于观察）结果：在高倍镜下，先观察根尖部分的生长点的细胞，可见细
4、胞质中散在很多大小不等的染成玫瑰红色的圆形小泡，这是初生的幼小液泡；然后，由生长点向延长区观察，在一些已分化长大的细胞内,液泡的染色较浅，体积增大,数目变少；在成熟区细胞中，一般只有一个淡红色的巨大液泡，占据细胞的绝大部分，将细胞核挤到细胞一侧贴近细胞壁处。作业1.绘口腔上皮细胞示线粒体的形态与分布，并简要分析2.绘示绿豆根尖液泡系的形态与分布
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