学习微生物培养的基本技术

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1、学习微生物培养的基本技术实验原理1.配制培养基时要注意原料的选择和调节适宜的PH2.配制好的培养基必须经过灭菌，灭菌是指杀死一定环境中的所有微生物细胞、芽孢和孢子。3.对不同的材料，应当采取不同的灭菌方法：培养基一般采用高压蒸汽灭菌法，而接种环则用火焰灼烧法方法步骤：一、细菌的培养技术：1、培养基的配制：1、称量2、溶化3、调PH4、培养基的分装5、加棉塞6、包扎加入材料（蛋白胨、牛肉膏、琼脂等）加热溶化1mol/L的NaOH溶液，PH试纸，7．4～7．6棉塞能防止杂菌污染，保证通气良好。不能太松、不难太紧，2/

2、3在管内1正确2、灭菌开锅加水放入待灭菌的材料：管口向上，竖放，不能太挤加盖排出锅内冷空气：达49Kpa时，排气两次维持：98Kpa，20min排气：锅内压力降为0时，才能排气3、搁置斜面将锅内试管等取出，在冷却至50℃时，搁置斜面，斜面长度不能超过试管总长度的1/24、接种洗净双手，用酒精擦拭等手上酒精挥发以后，点燃酒精灯接种①左手夹住菌种试管和接种斜面试管，拧松棉塞②接种环灼烧灭菌③右手无名指和小指夹住棉塞（不能放下），灼烧管口一周④接种环伸入试管内，在末长菌的部位冷却，后挑取少量菌体，立即抽出⑤在火焰旁迅速将

3、接种环由斜面底部向外轻轻画蛇形细线⑥抽出接种环，再用火焰灼烧管口，并在火焰上方将棉塞塞上⑦熄灭酒精灯⑧填写标签5、培养25◦C5——7天37◦C24小时1．不同微生物生长所要求的最适温度不同。请就测定大肠杆菌生长最适温度的实验回答下列问题：(1)配制的相应培养基可属于。A．天然培养基B．半固体培养基C．液体培养基D．伊红一美蓝选择培养基课堂练习AC(2)依次按称量、溶化、调pH、分装(每管5ml)、、包扎的顺序，完成培养基的配制，再用（方法）灭菌后，取8支试管，分别标明20℃、28℃、37℃、45℃四种温度，每种温

4、度2管。加棉塞高压蒸气灭菌法(3)向每管中接人处于期的大肠杆菌菌液0．lml，混匀。在相应温度下培养24h。对数(4)测定结果显示，45℃下的菌体最少，因为细胞内的等发生了不可逆的破坏。蛋白质和核酸（2008理综天津卷）31、（16分）莠去津是一种含氮的有机化合物，它是广泛使用的除草剂之一。⑴莠去津的作用机理之一是阻断光反应中的电子传递过程，影响NADP＋形成，进而影响在中进行光合作用的暗反应过程，最终抑制杂草生长。NADPH叶绿体基质⑵从使用莠去津农田中，选到了能遗传的耐莠去津杂草，将它与敏感莠去津植株杂交，结坚

5、果见下表：杂交亲本后代中耐药型植株比例（%）后代中敏感型植株比例（%）耐药型♀×敏感型♂1000敏感型♀×耐药型♂0100由表推断，控制该耐药性状的基因位于。细胞质中某小组同学为了调查湖水中细菌的污染情况而进行了实验。实验包括制备培养基、灭菌、接种及培养、菌落观察计数。请回答与此实验相关的问题。（1）培养基中含有的蛋白胨、淀粉分别为细菌培养提供了____和______。除此之外，培养基还必须含有的基本成分是_____和______。（2）对培养基进行灭菌，应该采用的方法是_______。氮源碳源无机盐水高压蒸汽灭菌

6、（3）为了尽快观察到细菌培养的实验结果，应将接种了湖水样品的平板置于______中培养，培养的温度设定在37℃。要使该实验所得结果可靠，还应该同时在另一平板上接种______作为对照进行实验。（4）培养20小时后，观察到平板上有形态和颜色不同的菌落，这说明湖水样品中有_____种细菌。一般说来，菌落总数越多，湖水遭受细菌污染的程度越_______。恒温培养箱无菌水多高（5）如果提高培养基中NaCl的浓度，可以用于筛选耐_______细菌，这种培养基被称为____。盐选择性培养基16．在光亮处用一种培养液分别培养绿藻

7、和酵母菌，其结果如右图，造成这种结果的原因是培养液中A．缺少无机盐B．含氧量太高C．缺少有机养分D．不含二氧化碳C17．右图是细菌的生长速度曲线，根据曲线回答下列问题：(1)活细菌数量最多时对应的是曲线中的段。总菌数目(包括死菌和活菌)最多的时期对应曲线中的段。(2)3段中生长速度下降的原因是。34营养物质的消耗；有害代谢产物的积累，Ph值变化(3)调整期出现的原因是细菌接种到新的培养基上后，需要重新合成必需的酶，辅酶或某些必需中间代谢产物，以适应新环境，这种调节方式属。酶合成的调节(4)处于对数期的微生物，代谢旺

8、盛，生长迅速，如果用作菌种，可在短时间内得到大量微生物，以缩短发酵周期，曲线中属于这一时期的是段。23（重庆）下列有关大肠杆菌的叙述，正确的是A大肠杆菌以复制方式进行繁殖，其拟核是一个环状DNA分子B在含葡萄糖和乳糖的培养基上，大肠杆菌首先利用乳糖作碳源C用大肠杆菌工程菌生产干扰素时．应及时添加核酸等生长因子D处于对数期的大肠杆菌．常作为生产用的菌种和科研的