常用培养基的配方

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1、伊红美蓝培养基原理　　一般用来鉴定大肠杆菌。　　伊红为酸性染料，美蓝为碱性染料。　　当大肠杆菌分解乳糖产酸时细菌带正电荷被染成红色，再与美蓝结合形成紫黑色菌落，并带有绿色金属光泽。　　在碱性环境中不分解乳糖产酸的细菌不着色，伊红和美蓝不能结合，故沙门氏菌等为无色或琥珀色半透明菌落。金葡菌在此培养基上不生长。　　常用的伊红美蓝乳糖培养基，可用来鉴别饮用水和乳制品中是否存在大肠杆菌等细菌。如果有大肠杆菌，因其强烈分解乳糖而产生大量的混合酸，菌体带H+，故菌落被染成深紫色，从菌落表面的反射光中还可以看到金属光泽。　　用伊红美蓝培

2、养基鉴定水中大肠杆菌　　步骤如下：　　①制作伊红美蓝培养基，趁热注入培养皿中，凝成平板，待用。　　②用灭过菌的锥形瓶盛取河水或沟水，按1：10稀释。　　③取0.1毫升稀释液接种于伊红美蓝培养基上。用平板划线分离法进行分离。　　④将划线后的培养皿倒置37℃温箱中培养18～24小时。培养基中会出现大肠杆菌菌落，菌落中心呈暗蓝黑色，发金属光泽。　　⑤将菌落接种于斜面培养基上（由营养琼脂培养基制成）。配置方法　　蛋白胨10g　　乳糖10g　　磷酸氢二钾2g　　琼脂20~30g　　蒸馏水1000ml　　2%伊红水溶液20ml　　0.

3、5%美蓝水溶液13ml　　储备培养基的制备　　先将琼脂加至900ml蒸馏水，加热溶解，然后加入磷酸氢二钾及蛋白胨，混匀使之溶解，再以蒸馏水补足至1000ml，调整PH为7.2~7.4。趁热用脱脂棉或绒布过滤，再加入乳糖，混匀后定量分装于烧瓶内，置高压蒸汽灭菌器内以115℃灭菌20min，贮存于冷暗处备用。　　制法将蛋白胨、磷酸盐和琼脂溶解于蒸馏水中，校正PH，分装于烧瓶内，121℃高压灭菌15min备用。临用时加入乳糖并加热溶化琼脂，冷至50～55℃，加入伊红和美蓝溶液，摇匀，倾注平板。麦康凯培养基原理1.全称麦康凯琼脂或

4、是麦康凯培养基2.一种用于分离鉴定细菌的培养基，大肠杆菌在其上呈红色或粉红色，有的菌落只是中间呈现红色。配置方法蛋白胨 17g脙胨3g猪胆盐(或牛、羊胆盐)  5g氯化钠 5g琼脂 17g蒸馏水1000mL乳糖10g0.01%结晶紫水溶液    10mL0.5%中性红水溶液     5mL麦康凯-制法 1将蛋白胨、胨、胆盐和氯化钠溶解于400mL蒸馏水中，校正pH7.2。将琼脂加入600mL加热溶解。将两液合并，分装于烧瓶内，121℃高压灭菌15min备用。2临用时加热溶化琼脂，趁热加入乳糖，冷至50～55℃时，加入结晶紫

5、和中性红水溶液，摇匀后  倾注平板。注：结晶紫及中性红水溶液配好后须经高压灭菌。吲哚试验吲哚（indol）试验有些细菌如大肠埃希菌、变形杆菌、霍乱弧菌等能分解培养基中的色氨酸生成吲哚（靛基质），经与试剂中的对二甲基氨基苯甲醛作用，生成玫瑰吲哚而呈红色，是为吲哚试验阳性。LB培养基配方胰化蛋白胨 1g      酵母提取物  0.5g      NaCl  1g      琼脂  1.5-2g     水 100mlLB培养基-LB培养基条件LB培养基-固态培养基LB固体培养基1L和液体一样，加15g琼脂粉，一定要在温度降下

6、之前加好抗生素，并且倒好板。LB固体培养基倒板1.配制：100mlLB培养基加入1.5g琼脂粉2.抗生素的加入：高压灭菌后，将融化的LB固体培养基置与55℃的水浴中，待培养基温度降到55℃时（手可触摸）加入抗生素，以免温度过高导致抗生素失效，并充分摇匀。3.倒板：一般10ml倒1个板子。培养基倒入培养皿后，打开盖子，在紫外下照10-15分钟。4.保存：用封口胶封边，并倒置放于4℃保存，一个月内使用。牛肉膏蛋白胨培养基（营养琼脂） 配方蛋白胨10g；牛肉膏3g；氯化钠5g；琼脂15～20g；蒸馏水1000mL；制法将除琼脂以

7、外的各成分溶解于蒸馏水内，加入15%氢氧化钠溶液约2mL，校正pH至7.2～7.4。加入琼脂，加热煮沸，使琼脂溶化。分装烧瓶，121℃高压灭菌15min。注：此培养基可供一般细菌培养之用，可倾注平板或制成斜面。如用于菌落计数，琼脂量为1.5%；如作成平板或斜面，则应为2%。甲基红试验甲基红试验-化学属性甲基红（MethylRed）试验肠杆菌科各菌属都能发酵葡萄糖，在分解葡萄糖过程中产生丙酮酸，进一步分解中，由于糖代谢的途径不同，可产生乳酸，琥珀酸、醋酸和甲酸等大量酸性产物，可使培养基PH值下降至pH4.5以下，使甲基红指示

8、剂变红。甲基红试验-试验方法挑取新的待试纯培养物少许，接种于通用培养基，培养于36±1°C或30°C（以30°C较好）3~5天，从第二天起，每日取培养液1ml，加甲基红指示剂1~2滴，阳性呈鲜红色，弱阳性呈淡红色，阴性为黄色。迄至发现阳性或至第5天仍为阴性、即可判定结果。甲基红为酸性指示剂，pH范围为4