十七 常用培养基配方

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1、十七常用培养基配方17.1营养琼脂培养基成分蛋白胨10g牛肉膏3g氯化钠5g琼脂15~20g蒸馏水1000mL制法:将除琼脂以外的各成分溶解于蒸馏水内,加入15%氢氧化钠溶液约2ML,校正PH7.2—7.4,加入琼脂,加热煮沸,使琼脂溶化。分装在三角锥瓶中,在121℃下高压灭菌15分钟。17.2乳糖胆盐发酵管培养基(单料)成分蛋白胨20g猪胆盐5g乳糖10g0.04%溴甲酚紫水溶液25mL蒸馏水1000mlPH7.4制法将蛋白胨,胆盐及乳糖溶于水中,校正PH值,加入指示剂分装,每支管10ml,并放入一个小倒管(产气管),

2、在115℃下高压灭菌15分钟。注:双料乳糖胆盐发酵管培养基除蒸馏水外,其他成分加倍。17.3乳糖发酵管培养基(单料)成分蛋白胨20g乳糖 10g0.04%溴甲酚紫水溶液25ml蒸馏水1000mlPH7.4制法将蛋白胨及乳糖溶于水中,校正PH,加入指示剂分装,每支管3ml,并放入一个小倒管(产生气),在115℃下高压灭菌15分钟。注:双料乳糖发酵管培养基除蒸馏水外,其他成分加倍。97317.4伊红美琼脂(EMB)培养基成分蛋白胨10g乳糖10g磷酸氢二钾2g琼脂2g2%伊红溶液20ml0.65%美兰溶液10ml蒸馏水100

3、0mlPH7.1制法将蛋白胨,磷酸盐和琼脂溶解于蒸馏水中,校正PH,分装于三角锥瓶内,在121℃下高压灭菌15分钟后备用。临用时加入乳糖并加热熔化琼脂,冷却至50—60℃,加入伊红和美蓝溶液摇匀,浇注平板。17.5远藤氏培养基配方:蛋白栋10.0g乳糖10.0g磷酸氯二钾3.5g亚硫酸氢钠2.5g碱性品红0.4g琼脂10.0g蒸馏水100ml制备:配料放入蒸馏水中,搅拌15分钟,使其溶解,分装到三角瓶或试管,121℃灭菌20分钟,冷却后贮于暗处,最佳温度为4—8℃以保持浅粉红色。17.6UBA培养基酵母浸膏6.1g蛋白胨

4、15g番茄汁(244ml)12.2g葡萄糖16gK2HPO40.31gKH2PO403.1gMgSO·7H2O0.12gNaCl0.006gFeSO4·7H2O0.006gMnSO4·H2O0.006g琼脂12g蒸馏水750ml啤酒250g973将上述配料加入水中,加热至沸,搅拌至完全溶解,趁热加入未脱气的啤酒,轻轻搅拌混合,用HCI或NaOH调pH为6.0+0.1,分装于三角瓶中,,121℃蒸汽灭菌20min。待冷却后,放置在36±℃培养24h小时备用。17.7乳酸杆菌培养基UBA+ABP抑制剂溶液(UBA见前)ABP

5、抑制剂溶液配料放线菌酮0.1g溴甲酚绿0.15g无离子水80ml2-苯乙醇20ml配制把溴甲酚绿放入50毫升水中,煮沸至完全溶解,把放线菌酮溶于30毫升水中,将两种溶液混合,分装于带螺旋盖的瓶中,每瓶20毫升,在121℃蒸汽灭菌10分钟,冷却后,每个瓶内加5毫升2-苯乙醇,并拧紧瓶盖。该溶液会分成两层,使用前须用力摇匀。17.8KOT培养基配方胰朊酶蛋白胨5.0g麦汁浸出生2.5g酵母浸出物2.5g肝浓缩物1.0g麦芽糖5.0g葡萄糖5.0gL-苹果酸0.5g吐温-801mlK2HPO40.5gMgSO4·7H2O0.1

6、25gMnSO4·5H2O0.025g盐酸半光氨酸0.5g胞苷0.2g胸苷0.2g啤酒800ml放线菌酮100mlNaN350mg琼脂20g蒸馏水至100mlPH25.497317.9日本KL-2B培养基配方:胰蛋胨20.0g麦汁浸生物10.0g酵母浸出生5.0g麦芽糖10.0gK2HPO43.0gMgSO4·7H2O1.0gMnSO4·5H2O0.25g柠檬酸2.75g吐温-80100mgNaN350mg琼脂20g蒸馏水至1000mlPH5.217.10MRS麦芽糖琼脂培养基没有一种单独的方法能够检测所有的乳酸细菌,这

7、些细菌对各种糖的利用能力是有差别的,许多菌株能在好氧条件下在琼脂培养基上生长,而另一些菌株则更容易在厌氧条件下生长。下面列出的培养基,能检测出许多种的乳酸细菌。但是,这些培养基不是绝对的,使用者可根据自己的经验进行修正后采用。原理:液体样品培养在含有合适的不同种类琼脂培养基的培养皿中,计算活菌落数。麦芽糖5.0g蛋白胨10.0g牛肉浸膏粉8.0g酵母浸出物4.0g葡萄糖20.0g吐温-801.0mlK2HPO42.0g醋酸钠5.0g柠檬酸铵2.0gMnSO4·5H2O0.2gMgSO4·7H2O0.05g琼脂15g在蒸馏

8、水中溶解,并定容至1L。用1.0NHCl或0.1NNaOH调至4.7。蒸汽灭菌121℃,20分钟。17.11Ra-Ray培养基NBB培养基是德国进行啤酒有害菌检查常用培养基,正如大家所知德国在有害菌研究领域处于领先地位,所以很多文献中提到使用NBB培养基有必要讲清楚。NBB培养基是Prof.Back专门为检查啤酒有害

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